飼糧蛋白質水平對云南半細毛羊空懷母羊體增重、血清尿素氮、瘦素及繁殖激素的影響

王思宇，李銀江，歐陽依娜，李衛娟，姚新榮，梁家充，薛 白，洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫科學院，云南昆明650224；2.云南省種羊繁育推廣中心，云南尋甸655204；3.四川農業大學動物營養研究所，四川成都611130）

母羊空懷期是斷奶后至配種受胎的準備階段，此期飼養目標是恢復體況，達到配種要求（謝艷麗等，2011）。飼糧蛋白質水平不僅對動物增重有影響，還對母羊發情、排卵和胚胎早期發育等繁殖性能有影響。蛋白質不足可導致母體發情排卵推遲，空懷期延長（閆學志，2017）；適當提高飼糧蛋白質水平可增加母羊排卵、提高發情率（楊寧等，2009）；但攝入過多的蛋白質，氮代謝產生過多的氨和尿素可能會損傷卵子和胚胎、影響子宮酸堿環境、降低孕酮濃度而使受精率下降、影響胚胎的生長發育從而降低母羊繁殖率（閆學志，2017）。因此飼糧蛋白質水平過高過低均不利于生產。NRC綿羊需要量標準（第六版）中50～60 kg體重的母羊日增重10 g/d時建議蛋白質攝入量為95～104 g/d，配種前兩周補飼日增重100 g/d時為150～157 g/d。目前，針對綿羊空懷期的營養研究，特別是飼糧蛋白質水平對云南半細毛羊的研究鮮見報道。因此，本研究旨在通過探討不同蛋白質水平飼糧對云南半細毛羊空懷母羊增重及與蛋白質代謝的作用，為其科學飼養提供理論基礎，也為云南半細毛羊繁殖激素的進一步研究提供參考數據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 選擇50只體況良好、無疾病、體重（52.91±4.33）kg、38月齡的經產兩胎空懷期云南半細毛羊母羊開展試驗。

1.2 試驗設計 試驗開始前使用獸藥阿苯達唑、伊維菌素、球蟲凈和氯氰碘柳胺鈉按照使用說明進行驅蟲。試驗動物平均分為5組，每組10只，分別飼喂蛋白質水平為8.44%、9.95%、12.31%、13.58%、15.90%的飼糧，飼糧配方及營養水平見表1。所有試驗羊在羊舍單欄（每欄一只羊）飼喂，進行為期44 d的飼養試驗，包括14 d預試期和30 d正式試驗。預試期間每天08:00、17:00各喂料1次，自由飲水，每天記錄每只試驗羊的采食量，根據前一天的采食量調整第2天飼喂量，確保有10%左右的剩料。飼喂時將小黑麥草直接放于料槽中，精料和小麥秸（粉狀）混合后置于塑料盆（每只羊單獨使用一個塑料盆）中，塑料盆置于料槽中。每天記錄采食量時用總飼喂量減去剩料量。正試期每天的飼養管理同預試期。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生產性能指標 試驗羊稱重均為早上空腹稱重。預試期開始時稱重后即進行分組，對各組羊體重均值進行統計分析，如果組間有差異則進行羊只調整，直至差異不顯著。正試期開始時再次稱重并進行統計分析，如果各組體重均值有差異則調整羊只分組使差異不顯著并延長預試期14 d，如果各組體重均值無差異則開始正式試驗。正試期結束時羊只稱重。正試期每天記錄每只試驗羊的采食量。計算正試期間的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.3.2 血清指標 每組隨機選擇5只羊在正式試驗結束前3 d晨飼前于頸靜脈實行無菌采血，連續采血3 d，檢測結果取3 d的均值。每只試驗羊采血10 mL，靜置30 min后于3000 r/min離心20 min，獲得血清，將血清分裝于1.5 mL離心管內，于-20℃冰柜中保存待測。

血清促卵泡素（FSH）、雌二醇（E2）、促黃體生成素（LH）、孕酮（PROG）和LEP使用酶標儀（Molecular Devices公司，Versa Max型），按照試劑盒說明書測定；BUN使用紫外可見分光光度計（尤尼柯，UV-2600型），按照試劑盒說明書測定；FSH、E2、LH、PROG和BUN試劑盒購自南京建成海浩生物科技有限公司；LEP試劑盒購自上海浩本生物科技有限公司。

1.4 數據統計分析 試驗數據采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析，多重比較采用LSD法，試驗數據用“平均值±標準差”表示，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結果

2.1 不同蛋白質水平飼糧對云南半細毛羊空懷母羊生長性能的影響 由表2可知，各組初始體重、末重和料重比差異均不顯著（P＞0.05）。組3的平均日增重較組2顯著降低31.00%（P＜0.05），其余各組的差異不顯著（P＞0.05）。組3的日采食量較組2顯著降低8.72%（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）。從組1到組5日均蛋白質采食量顯著增加（P＜0.05），且除組2與組3間未達極顯著水平外，其余各組間差異均達極顯著水平 （P＜0.01），其中組2較組1提高24.04%（P＜0.01）、組3較組2提高13.10%（P＜0.05）、組4較組3提高14.45%（P＜0.01）、組5較組4提高14.85%（P＜0.01）。

2.2 不同蛋白質水平飼糧對BUN、LEP及繁殖激素的影響 由表3可知，各組的促卵泡素和促黃體素濃度沒有顯著差異（P＞0.05）。對于血清雌二醇（E2）濃度，組3較組1極顯著提高128.60%（P＜0.01）、較組2極顯著提高133.38%（P＜0.01）；組4的E2水平較組1和組2分別顯著提高53.77%（P＜0.05）和56.98%（P＜0.05）；組5的E2水平較組1和組2分別顯著提高78.33%（P＜0.05）和82.06%（P＜0.05）；組4的E2水平較組3顯著降低32.74%（P＜0.05），但與組5差異不顯著（P＞0.05）。從組1至組4，孕酮（PROG）濃度逐漸升高，組4濃度較組1極顯著提高61.21%（P＜0.01），較組2顯著提高46.60%（P＜0.05）；組5的PROG濃度與組4差異不顯著（P＞0.05），但較組1顯著提高42.70%（P＜0.05）。隨著飼糧蛋白質水平的升高，BUN濃度逐漸增加，各組差異均達到顯著水平（P＜0.05），并且除第3組和第4組外，其余各組間差異達到極顯著水平 （P＜0.01）。從組2到組5依次較前一組提高34.65%（P＜0.01）、34.94%（P＜0.01）、7.29%（P＜0.05）、10.12%（P＜0.01）。對于瘦素（LEP），組5較組2顯著降低29.23%（P＜0.05），較組4降低36.11%（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

日增重是衡量動物生長速度的重要指標，目前很多研究結果認為，羊的日增重隨著飼糧蛋白質含量的增加先增加而后下降或者增重不顯著（田春麗，2015）。本研究中從組1到組5，飼糧蛋白質含量依次升高，日均蛋白質采食量也顯著增加，日增重除第3組較第2組顯著下降外，其余各組沒有差異。組1、組2、組4和組5的空懷母羊日增重沒有顯著差異。組3日增重與組2差異大，日增重的變化規律與采食量一致，因此推測組3日增重低的主要原因是采食量偏低。隨著動物體重和月齡的增加，生長速度逐漸下降，日增重水平有所降低，有研究表明，體重約36 kg時日增重可達120～226 g（哈麗代等，2016；王斌星等，2016），體重約40 kg的成年母羊日增重多為35～92 g（王惠，2012；趙玉民，2005）。有研究報道在放牧條件下，云南半細毛羊母羊在3歲左右體重達到約50 kg，其后體重緩慢下降（李高榮等，2001）。本研究中母羊體重約為54 kg，日均增重為69～100 g，取得了較好的生長速度，一是得益于充足的營養供給；二是舍飼條件下動物運動量小，耗能少。哺乳結束后母羊體重一般較配種所需的理想體重低2～3 kg（周利勇，2012），按照母羊兩年產三胎的繁殖計劃，空懷期一般為1個月，據此估算1個月增重2～3 kg，則日增重應在65～100 g/d。本研究中除組3外，其余各組的日增重均在80 g/d以上，可達到增重要求。各組料重比沒有差異，從飼糧成本來看，主要使用的蛋白質飼料豆粕和菜籽粕價格較高，兩者比例從組1到組5逐漸上升，飼糧成本也隨之升高。考慮到組2（9.95%蛋白質水平）表現出最快生長速度，因此9.95%的飼糧蛋白質水平更為適宜。

有研究認為蛋白質水平會影響動物采食量，趙智華等（2009）的研究中設計飼糧蛋白質水平為8.23%、10.42%和12.52%，結果表明，動物采食量隨著飼糧蛋白質水平的升高有增加的趨勢。本研究中日均干物質采食量除組3顯著低于組2外，其余各組差異不顯著。代謝能和粗蛋白質均是影響采食量的重要因素（劉金祥等，2001），本研究中設置了蛋白質水平梯度，代謝能保持一致，但代謝能數值為計算值，不排除實際值與計算值有一定差異的可能性。因此組3采食量偏低可能是飼糧代謝能產生的差異。

表2 飼糧蛋白質水平對空懷母羊生長性能的影響

表3 飼糧粗蛋白質水平對BUN、LEP和繁殖激素的影響

對羊料重比的報道多見于生長期的研究，3～4月齡體重30 kg以下的羊料重比約為4.5～8.5，體重在30～35 kg時料重比約為7.5～12.5，體重在36～40 kg時則為8.8～17（唐丹等，2017；史曉雪等，2017）。育成后期母羊料重比在6～8.4（劉寧，2016）。目前鮮有對空懷期、妊娠期和哺乳期羊料重比的報道。有研究表明，料重比隨著羊年齡和體重的增長而增大，飼料轉化效率逐漸降低。本研究中各組料重比均值為20.5（P＞0.05），數值偏大，可能是由于試驗羊已成年，飼料轉化效率變低。

空懷期使羊體況恢復、盡早發情、增加排卵、提高配種成功率，可以提高母羊的生產效率。母羊繁殖性能主要受到下丘腦-垂體-性腺軸激素的作用，其中FSH、LH、E2和PROG是重要的調控激素。相比日糧蛋白質水平的差異，繁殖激素濃度主要受到羊只繁殖周期的影響。目前尚缺乏對云南半細毛羊繁殖激素的相關研究，繁殖激素的作用濃度還有待精確，本研究中結果可為進一步研究云南半細毛羊繁殖激素的濃度提供參考。

BUN來源于機體蛋白、氨基酸降解和瘤胃吸收的氨氮，是反映反芻動物蛋白質代謝的重要指標（火靜萍，2015）。尿素氮與體內氮沉積和蛋白利用率呈負相關（火靜萍，2015）。BUN低說明動物可有效利用飼糧中氮、蛋白質或氨基酸，蛋白質沉積率高；BUN高表明較多蛋白質被氧化代謝，造成了蛋白質飼料的浪費（王興濤等，2016）。李志靜等（2014）報道，BUN正常為3.5～16 mmol/L，在本研究中各組BUN濃度均在此范圍內，且隨著飼糧蛋白質水平的升高顯著增加，這與雷耀庚（2015）等的研究結果一致，也符合蛋白質代謝規律。

LEP是一種由脂肪細胞分泌的蛋白質，其是一種可控制采食量，調節體重的因子，生理作用涉及泌乳、能量、發情和免疫等方面（王春艷等，2012）。羊血清LEP濃度在0.5～35 ng/mL（張秋旭等，2018；石國慶等，2008），不同品種、不同性別的羊血清LEP濃度差異較大。在本研究中隨著飼糧蛋白質水平的升高，LEP的濃度變化沒有明顯規律，各組采食量、日增重變化與LEP水平也不一致，說明飼糧蛋白水平可能對LEP沒有影響。LEP對繁殖性能的作用一般認為是通過調節促性腺激素釋放激素（GnRH）神經元的活性和分泌，從而促進LH和FSH的分泌（Kamalamma等，2016；Vázquez等，2015）。黃欽華（2012）的研究中LEP表現出與FSH和LH相同的變化規律，但也有學者認為LEP對FSH和LH影響結果不一致，有的FSH和LH分泌量隨LEP濃度的提高先上升后下降，有的隨著LEP濃度變化LH水平變化但FSH無變化（石國慶等，2009）。本研究結果中LEP水平與LH、FSH濃度變化沒有顯著規律，可能一方面LEP受到飼糧和動物體脂肪水平的影響（李興升等，2003），另一方面FSH與LH的分泌也受發情周期影響。

4 結論

本研究中飼糧蛋白質水平為9.95%時表現出較好的采食量和較快的生長速度，而料重比、BUN相對不高，因此在實際生產中推薦云南半細毛羊母羊空懷期的飼糧蛋白質水平為9.95%。