CMA輔助診斷超三倍體核型引起的自然流產

袁鵬輝 方卉 姜育燊

自然流產是指非人為目的造成的胚胎及其附屬物脫離母體而終止妊娠。自然流產的病因十分復雜，在遺傳因素引起的自然流產病例中，主要為染色體數目的異常，如三體、單體和多倍體等，少量為結構異常，如倒位、缺失和重復［1］。早期的流產檢測方法主要為核型分析和熒光原位雜交（FISH）。核型分析分辨率低，只能檢測＞5Mbp的染色體片段的改變，不能檢測雜合性缺失（LOH）。由于需要細胞培養過程，容易被母體細胞污染，部分活性較差的細胞生長還可能會被抑制，核型分析無法得到準確的核型結果［2］。而FISH檢測需要特定的熒光探針，只能對特定的染色體的已知位點進行檢測，且一次只能檢測單一位點，不適用于全基因組的篩查［3-4］。染色體微陣列分析（CMA）可以在全基因組內檢測染色數目異常，結構異常（微缺失微重復）和雜合性缺失，也可以區分嵌合體，但不能不能檢測染色體平衡易位（相互易位、羅伯遜易位、倒位等）。

1 病例

患者女性，39歲，高齡產婦，孕周8周，因胚胎停育行刮宮流產，臨床主訴有反復不明原因流產史。采集患者流產絨毛組織，利用Affymetrix（昂飛）提供的CytoScan 750K芯片進行染色體微陣列分析檢測。檢測核型結果復雜，具體結果為71，XXY，+13，+22，即胚胎核型整體為三倍體，另外又增加一條13號染色體和一條22號染色體，如圖1所示。

圖1 全基因組概覽圖

2 討論

自然流產是指孕周＜28周，胚胎重量＜1000g，非人為目的造成的胚胎及其附屬物脫離母體而終止妊娠。據統計，自然流產的發生率為15%～40%，其中＞80%為發生在12周以內的早期流產［5］。自然流產的病因復雜，除了遺傳因素以外，還包括子宮結構因素、內分泌因素、感染因素、環境因素、免疫因素等［1］。在自然流產病例中，胚胎染色體異常的檢出率大約為60%，并且隨著流產次數的增加，染色體異常的比例逐漸下降［1，6］。三倍體的發生率為1%～3%，胎兒很少能存活至出生［3］。超三倍體核型（hypertriploid），是指在三倍體基礎上又增加一條或多條染色體，染色體條數在70（＞3×23）和80（＜3×23+1/2×23）之間的核型。三倍體病例中，約6%的病例為超三倍體核型。

本例首次在流產胚胎組織中報道此種超三倍體復雜核型71，XXY，+13，+22。三倍體危害較大，胎兒很少能存活至出生，少數存活的嬰兒帶有多個嚴重出生缺陷，常見缺陷包括：生長遲緩、先天性心臟缺陷、神經管缺陷，三倍體嬰兒出生后常只能存活幾天［7］。

13號染色體三體（T13）綜合征，又稱為帕陶綜合征，是導致自然流產的三體綜合征之一，13號染色體的胚胎活產率為33%［8］。存活至出生的患兒，在新生兒中所占的比例約為1/10000，13號染色體三體患兒的臨床表型多樣，有智力障礙、運動障礙、小頭畸形、眼部結構性缺陷、脊髓缺陷、肌肉骨骼發育異常、泌尿生殖系統異常等［9］。

22號染色體三體（T22），是常見的引起自然流產的常染色體三體類型，22號染色體三體引起的流產占所有自然流產病例的3%～5%［10］。但是，存活至出生的22號染色體三體患兒卻較為少見［11］。22號染色體三體患兒的臨床表現為頭小畸形、無耳廓、頸蹼、唇腭裂、指端發育不良等［11-12］。 超三倍體復雜核型71，XXY，+13，+22可以認為是在正三倍體69，XXY的基礎上，又增加一條13號染色體和一條22號染色體，目前暫無該染色體異常類型引起的流產或者患兒病例的報道。

在本病例中，由于樣本經過低溫運輸，難以進行細胞培養，且培養過程易受母體細胞污染，故而采用核型分析進行診斷的難度較大。而目前FISH常用的探針主要針對13號染色體、18號染色體、21號染色體、X染色體和Y染色體，不能準確診斷該樣本，且需要多次實驗，成本較高。而采用CMA方法，不需要細胞培養，一次實驗，就能夠獲得樣本最初全部的染色體結構和數目信息。