納布啡對瑞芬太尼致大鼠痛覺過敏的作用

馮政 董希瑋 王勝

【摘要】目的：觀察本實驗劑量的瑞芬太尼是否能誘發大鼠產生痛覺過敏，靜脈注射納布啡后能否抑制大鼠痛覺過敏的發生及發展。方法：選擇健康的雄性SD大鼠，隨機分為5組，制作疼痛切口模型后泵注不同的藥物，測定熱縮足潛伏期及PKC表達水平。結果：比較各組大鼠熱縮組潛伏期，制作手術后切口疼痛模型后各組均縮短;靜脈泵注后R組大鼠熱縮足潛伏期較RN組、RI組大鼠縮短。與R組大鼠相比較，RN組、RI組大鼠PKC表達水平降低。結論：本實驗劑量靜脈泵注瑞芬太尼導致大鼠產生了痛覺過敏。靜脈推注納布啡可以抑制瑞芬太尼導致的大鼠痛覺過敏，這種改變可能通過PKC途徑來產生。

【關鍵詞】納布啡;瑞芬太尼;痛覺過敏;PKC

【中圖分類號】R821.4+1

【文獻標識碼】A

【文章編號】2095-6851（2019）09-080-02

阿片類藥物是最常用的鎮痛藥物及最有效的中樞性鎮痛藥物[1]，但作為治療疼痛的阿片類藥物在使用時卻可能使患者對疼痛的敏感性增強，這稱作阿片類藥物誘發的痛覺過敏（OIH），OIH發生的機制復雜。瑞芬太尼通常用于術中鎮痛。然而，許多臨床證據表明瑞芬太尼可以增強傷害性刺激的感受，這種稱為瑞芬太尼誘導的痛覺過敏[2]。本研究觀察芬太尼是否能誘發大鼠產生痛覺過敏，靜脈注射納布啡后能否抑制大鼠痛覺過敏的發生及發展。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 選擇健康清潔雄性SD大鼠40只。隨機分為 5 組;測定每組熱縮足潛伏期，對照1組（C1）測定熱縮足潛伏期后七氟醚麻醉，取 L4-6節段脊髓，測定PKC表達水平;其余各組使用七氟醚麻醉后于大鼠右足底制作手術切口疼痛模型，2 h后測定各組大鼠熱縮足潛伏期;對照2組（C2）大鼠測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻醉后取L4-6節段脊髓，測定PKC表達水平;余下各組大鼠留置尾靜脈導管，瑞芬太尼組（R組）以1μg/（kg·min）的速度經尾靜脈導管輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成2 h后測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻后醉取L4-6節段脊髓，測定PKC表達水平;瑞芬太尼+納布啡組（RN組）以1μg/（kg·min）輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成后靜脈推入納布啡1 mg/kg，2 h后測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻后取L4-6節段脊髓，測定PKC表達水平;瑞芬太尼+PKC抑制劑組（RI組），以1μg/（kg·min）輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成后靜脈推入PKC抑制劑，2 h后測定熱縮足潛伏期，取L4-6節段脊髓，測定PKC表達水平。

1.2 實驗方法 大鼠尾靜脈穿刺置管，將大鼠至于足底測試儀籠內，啟動儀器，足底測試儀啟動到停止的時間即為熱縮足潛伏期，共進行5次試驗，取中間3次平均值為熱縮足潛伏期值。使用七氟醚麻醉大鼠，大鼠麻醉后頸椎脫位處死。取L4-6段脊髓進行Western Blot檢測。

1.3 統計結果 使用SPSS 22.0軟件進行統計分析。測量數據表示為平均數±標準差（x±s）。當比較組內的行為數據時，選擇重復測量設計的方差分析。比較兩組的蛋白質印跡結果。采用t檢驗。P <0.05被認為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠不同時間點熱縮足潛伏期比較 比較各組大鼠熱縮組潛伏期，制作手術后切口疼痛模型后各組均縮短;靜脈泵注后R組大鼠熱縮足潛伏期較RN組、RI組大鼠縮短，見表1。

2.2 各組大鼠PKC表達水平 與R組大鼠相比較，RN組、RI組大鼠PKC表達水平降低，見圖1。

3 討論

瑞芬太尼是一種超短效μ阿片受體特異性激動劑，代謝不依賴肝臟及腎臟的功能，主要通過組織酯酶和血漿水解代謝即使長時間輸注也不會蓄積，這些特性讓瑞芬太尼變成一種非常優秀的靜脈麻醉藥物，但大劑量使用瑞芬太尼會造成患者術后對疼痛的敏感性增加，增加術后鎮痛藥物的需求，影響康復，給患者和醫生帶來很大的麻煩[3]。早期的以氯胺酮為代表的NMDA受體抑制劑通過抑制PKC表達，進而抑制NMDA受體，以達到治療痛覺過敏的目的，該類藥物在臨床中并沒有起到顯著的臨床療效。納布啡誕生之初的目的就是為了減少純阿片類藥物的不良反應，有研究表明[4]，選擇性κ受體激動劑可減少大鼠的痛覺過敏，但κ受體激動劑本身也可導致痛覺過敏的發生，因此本實驗使用納布啡，一種μ受體拮抗劑和κ受體的激動拮抗劑實驗納布啡是否能夠抑制瑞芬太尼導致的大鼠痛覺過敏的發生及發展過程。

本實驗結果顯示，通過比較各組大鼠不同時間點熱縮足潛伏期。單純持續泵注瑞芬太尼組的大鼠出現了對疼痛的敏感化，推斷出靜脈持續泵注瑞芬太尼誘發了大鼠的痛覺過敏的產生，而使用瑞芬太尼及納布啡組大鼠的熱縮足潛伏期高于單純泵注瑞芬太尼組，與假手術組大鼠的熱縮足潛伏期相比并無顯著差異，可以認為納布啡可以抑制瑞芬太尼導致的大鼠痛覺過敏的產生。

比較各組大鼠的PKC表達水平，單純泵注瑞芬太尼組大鼠PKC表達水平顯著高于假手術組;使用瑞芬太尼加納布啡及使用瑞芬太尼加PKC抑制劑組大鼠PKC表達水平低于單純泵注瑞芬太尼組大鼠;推測瑞芬太尼導致大鼠痛覺過敏可能通過PKC途徑來實現;使用瑞芬太尼加PKC抑制劑組大鼠PKC表達水平低于使用瑞芬太尼加納布啡組大鼠，這與大鼠熱縮足潛伏期結果并不十分一致，大鼠痛覺過敏的產生可能除PKC通路外還有其他通路起著關鍵作用.

綜合以上實驗結果推測納布啡可以抑制瑞芬太尼導致的大鼠痛覺過敏，瑞芬太尼導致大鼠痛覺過敏可能通過PKC途徑來實現，PKC在痛覺過敏的產生及維持方面有著重要的作用。

參考文獻：

[1] 龐德春， 廖振南， 梁友君， et al. 頭部周圍神經阻滯對顱腦手術中瑞芬太尼用量及術后疼痛的影響[J]. 實用醫學雜志， 2014（19）：3081-3083.

[2] 曲直， 劉志民. 世界衛生組織在國家、地區和全球層面對阿片類鎮痛藥消耗和需求的比較[J]. 中國藥物依賴性雜志， 2012， 21（2）：152-158..

[3] 顧喜燕， 王志宏， 于泳浩. Nrf2-自噬通路在大鼠切口痛-瑞芬太尼誘導痛覺過敏中的作用[J]. 天津醫藥， 2018（2）：135-138.

[4] 王熙， 吉林醫學 韓 J. 納布啡的臨床應用進展[J]， 2017， 38（8）： 1565-1567.