牛、羊副結核病的診斷和防控

張寶鎖

摘要：牛、羊副結核病的發病初期表現為間斷性腹瀉，之后出現頑固性腹瀉，進行性消瘦，下頜及肉垂浮腫。該病是由副結核分枝桿菌引起的反芻獸（尤其牛）的一種慢性消化道傳染病，幼齡動物最為易感，成年動物只有在接觸大量的病原后才能發生感染。該病的確診需進行實驗室診斷。該病使用抗生素治療的療效不顯著，主要還是做好日常的預防和控制工作。

關鍵詞：牛;羊;副結核病;診斷;防控措施

中圖分類號：S858.2 ??文獻標識碼：B文章編號：2095-9737（2019）09-0141-01

1?流行病學

多種反芻動物可以感染副結核病。通常動物在馴養或捕獲飼養的條件下，最易出現臨床癥狀。臨床疾病的發生與應激因素（如分娩、擁擠、運輸或采用了不適宜的飼料配方）的存在密切相關。遺傳因素與該病的發生有一定關系，一些特定品種牛（如短角牛）易較早出現發病。臨床癥狀不明顯的排菌動物和慢性感染動物廣泛存在以及環境中病原的持續存在，造成了病原的傳播。在美國，牛群中總感染率為1%～3%。在病原傳播方面，牛奶和胎盤的傳播意義尚未明確。

2?臨床癥狀和剖檢變化

牛：臨床表現包括體重緩慢下降，腹瀉，但體溫和食欲正常。在發病階段，病變可從回盲區延伸至整個腸道，黏膜下層浸潤巨噬細胞、上皮樣細胞和一些含有大量副結核分枝桿菌的巨細胞。輸出淋巴結腫脹，充斥著大量含副結核分枝桿菌的巨噬細胞。由于固有層和黏膜下層的肉芽腫增生性炎癥，牛的典型肉眼病變為腸黏膜形成永久性橫向皺褶。隨著病情的發展，通常有臨床癥狀的病牛最終會發生死亡。

綿羊和山羊：臨床中，患病綿羊或者山羊出現腹瀉的情況并不常見。如果所飼養羊群的飼料消耗增加，應立即檢查是否存在副結核分枝桿菌感染。綿羊和山羊的腸道病變沒有牛的腸道病變明顯。山羊感染后，通常會出現體重減輕。

3?實驗室診斷

樣品采集。對于牛最好采集回盲區的樣品（腸或淋巴結）;但對于活牛，直腸的黏膜刮取物相對容易獲得;對于有價值的牛，可取回盲淋巴結進行活組織檢查。對于綿羊和山羊，取回盲淋巴結進行檢查最有診斷意義。對于牛、羊，采集腸內容物或腸壁刮取物也有一定意義。

直接檢查。對淋巴結壓片、直腸或腸壁刮取物涂片進行萋-尼氏抗酸染色。副結核分枝桿菌的抗酸染色后呈陽性，為短而細小的桿菌，呈束狀排列，而樣品中其他一些抗酸染色陽性結構（腐生分枝桿菌或細菌的內生芽孢）是單獨存在的，而且較大。組織切片經蘇木素-伊紅染色后，可觀察到典型的肉芽腫病變，如采用抗酸染色，可看到大量的胞內和胞外的副結核分枝桿菌。

分離培養。依據該菌的體外增殖方式，即可做出可靠的診斷。對于糞便樣品或活組織檢查時采集的淋巴結樣品，首先要用氯化十六烷基吡啶進行去污染處理，然后將經去污染處理的樣品接種于含有分枝桿菌生長素（最好使用由副結核分枝桿菌產生的分枝桿菌生長素）的卵黃培養基上。由于丙酮酸鈉可抑制一些菌株的生長，因此接種時要使用含有和不含有丙酮酸鈉的卵黃培養基，同時也要使用含有和不含有分枝桿菌生長素的卵黃培養基，一般需要培養8周，才能形成肉眼可見的菌落。有報道描述了一種采用聚合酶鏈式反應（PCR）對DNA插入序列IS900（一種副結核分枝桿菌特異的DNA序列）擴增后，應用14C-棕櫚酸進行放射測定的技術，在2～4周內，該技術可完成對糞便樣品的檢測。

4?防控措施

目前在體內，還未有對副結核分枝桿菌有效而經濟的抗生素可用。新型大環內酯類抗生素（如克拉霉素）及一些處于試驗階段的氟喹諾酮類藥物，體外試驗是有效的，但由于價格昂貴而無法用于臨床。然而，盡管在環境保證的情況下，單獨使用氯苯酚嗪或者與乙胺丁醇或利福布丁共用，治療效果也不理想。體外試驗表明，副結核分枝桿菌對異煙肼有抗藥性，在體內可能也有抗藥性。

根除感染動物并防止其在畜群中發生傳播，是控制該病的最好方法。此外，還需采取一些飼養管理措施，具體包括：將新生動物與母畜和其他成年動物隔離飼養;確保產房處于無污染的區域;飼喂新生動物時，要防范可能存在的潛在感染因素，不飼喂未經巴氏法消毒的初乳或乳汁。采取免疫學診斷方法和細菌分離培養方法鑒定疑似感染動物和排菌動物。分離培養方法可用于對血清學檢測結果的進一步確證;不能采用血清學方法檢測免疫接種過的畜群，可采用分離培養方法進行檢測。分子檢測技術可快速對發病動物的非糞便樣品（如外周血）進行鑒定，具有廣闊的應用前景。

采用巴氏消毒法是控制該病的重要手段，這樣不僅可保證用于飼喂犢牛的初乳或乳汁不含感染性副結核分枝桿菌，而且也具有公共衛生意義。如果牛奶中副結核分枝桿菌的數量比較多，高溫、短時間的巴氏消毒法也不能100%殺滅該菌。這種方法對于將幾個奶牛場所產牛奶混合后進行處理的地區公共衛生意義可能不大，但對于單獨處理自產牛奶的奶牛場，就顯得非常重要。因有關控制疑似感染該菌動物的出售與運輸的規定較欠缺，所以該病的預防較困難。只有建立統一的檢疫與報告程序，才能減少動物感染副結核分枝桿菌。在一些國家，采用注射該病的活疫苗和滅活疫苗來預防發病，但這些疫苗的使用不是很普及。