富硒靈芝粗提物對2型糖尿病模型大鼠脂代謝、肝功能及炎癥反應的改善作用研究

楊丹陽 姜濤 周徑 張雪楊

中圖分類號 R285.5 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2019）03-0364-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.03.17

摘 要 目的：研究富硒靈芝粗提物對2型糖尿病（T2DM）模型大鼠脂代謝、肝功能及炎癥反應的改善作用。方法：將120只大鼠隨機分為正常對照組（n=20，生理鹽水）和造模組（n=100）。正常對照組大鼠喂養普通飼料，造模組大鼠喂養高脂飼料。4周后，造模組大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素溶液（30 mg/kg）復制T2DM模型。將造模成功的90只大鼠再次隨機分為模型對照組（生理鹽水）、陽性對照組（二甲雙胍，200 mg/kg）和富硒靈芝粗提物低、中、高劑量組（300、600、1 200 mg/kg，以提取物計），每組18只。灌胃給藥，每天1次，每周周一至周六給藥。分別于給藥4、8周后各組均取一半大鼠，檢測其血清中葡萄糖、胰島素水平，并計算胰島抵抗指數；采用酶聯免疫吸附法檢測其血清中肝功能指標[天冬氨酸轉氨酶（AST）、丙氨酸轉氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（AKP）]、血脂指標[游離脂肪酸（FFA）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）]和炎癥因子[腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）、IL-1β]水平；蘇木精-伊紅染色后，通過顯微鏡觀察其肝組織病理學變化；并分別采用實時熒光定量-聚合酶鏈式反應法和Western blot法檢測其肝組織中過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）、過氧化物酶酰基輔酶A 氧化酶1（ACOX1）的mRNA和蛋白表達水平。結果：與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后血清中葡萄糖、胰島素含量顯著增加（P<0.01），胰島素抵抗指數顯著升高（P<0.01）；血清中肝功能指標、血脂指標和炎癥因子水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）；肝細胞腫脹呈圓形，且體積較正常對照組明顯增大，肝臟有不同程度的脂肪變性及空泡樣變，并伴隨有少量炎細胞浸潤現象；肝組織中PPARα、ACOX1的mRNA和蛋白表達水平顯著降低（P<0.05或P<0.01）。與模型對照組比較，除富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠給藥4周后的胰島素抵抗指數和血清中AST、ALT、IL-6、IL-1β水平以及給藥8周后血清中葡萄糖、胰島素、ALT水平和給藥4、8周后4個血脂指標水平降低不顯著外（P>0.05），其余各組大鼠在給藥4、8周后上述血清指標水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）；給藥4、8周后大鼠肝組織病理學變化不同程度減輕；各給藥組大鼠給藥4、8周后肝組織中PPARα、ACOX1的蛋白和mRNA表達水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）。結論：富硒靈芝粗提物可上調肝組織中PPARα和ACOX1蛋白和mRNA的表達，促進蓄積的脂肪酸排出，明顯改善T2DM模型大鼠脂肪酸代謝、炎癥反應和肝功能。

關鍵詞 富硒靈芝粗提物；2型糖尿病；過氧化物酶體增殖物激活受體α；過氧化物酶酰基輔酶 A氧化酶1；大鼠

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the effects of selenium-enriched Ganoderma lucidum crude extract on lipid metabolism， liver function and inflammatory response in type 2 diabetic model rats. METHODS： Totally 120 rats were randomly divided into normal control group （n=20， normal saline） and model group （n=100）. Normal control group was fed with normal diet， and model group was fed with high-fat diet. 4 weeks later， model group was given intraperitoneal injection of Streptozotocin solution （30 mg/kg） to induce T2DM model. After modeling， 90 rats were randomly subdivided into model control group （normal saline）， positive control group （metformin， 200 mg/kg） and selenium-enriched G. lucidum crude extract low-dose， medium-dose and high-dose groups （300， 600， 1 200 mg/kg， calculated by extract）， with 18 rats in each group. They were given medicine intragastrically， once a day， from Monday to Saturday. Half of rats in each group were selected 4， 8 weeks after medication； the serum levels of glucose and insulin were detected， and islet resistance index were calculated. The serum levels of liver function indexes （AST， ALT， AKP）， blood lipid indexes （FFA， TC， TG， LDL-C） and inflammatory factors （TNF-α， IL-6， IL-1β） were detected by ELISA. After HE staining， the histopathological changes of liver tissue were observed by microscopy. mRNA and protein expressions of peroxisome proliferator activated receptor α （PPARα） and peroxidase acyl coenzyme A oxidase 1 （ACOX1） in liver tissue were detected by RT-qPCR and Western blot assay. RESULTS： Compared with normal control group， glucose， insulin serum levels and islet resistance index were significantly increased （P<0.01）； serum liver function indexes， blood lipid indexes and inflammatory factor levels of model control group were increased significantly in model control group after 4 and 8 weeks medication （P<0.05 or P<0.01）. The hepatocyte swelling of model control group was round and the volume was significantly larger than that of blank control group. The liver had different degrees of steatosis and vacuolization， accompanied by a small amount of inflammatory cell infiltration. mRNA and protein expressions of PPARα and ACOX1 in liver tissue were decreased significantly （P<0.05 or P<0.01）. Compared with model control group， except that there was no significant decreased in islet resistunce index and AST， ALT， IL-6， IL-1β serum levels after 4 weeks of medication， and glucose， insulin， ALT serum levels after 8 weeks of medication and the levels of 4 blood lipid indexes after 4 and 8 weeks of medication in selenium-enriched G. lucidum crude extract low-dose group （P>0.05）， above serum indexes of other groups were decreased significantly after 4 and 8 weeks of medication （P<0.05 or P<0.01）. After 4 and 8 weeks of medication， the pathological changes of liver tissue in rats were alleviated in varying degrees. protein and mRNA expressions of PPARα and ACOX1 in liver tissue were increased significantly after 4 and 8 weeks of medication （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： Selenium-enriched G. lucidum crude extract can up-regulate protein and mRNA expressions of PPARα and ACOX1 in liver tissue， promote the excretion of accumulated fatty acid and significantly improve fatty acid metabolism， inflammatory response and liver function in T2DM model rats.

KEYWORDS Selenium-enriched Ganoderma lucidum crude extract； Type 2 diabetes mellitus； Peroxisome proliferator activated receptor α； Peroxidase acyl coenzyme A oxidase 1； Rat

糖尿病（Diabetes mellitus，DM）是一種全球性疾病，其發病率呈顯著上升趨勢，其中2型糖尿病（T2DM）占總發病數的80%以上[1-2]。T2DM的發病機制非常復雜，與肝損傷、肥胖、高血脂、炎癥、胰島素抵抗等因素均有一定關系，且隨著病程的進展，最終會導致機體脂質代謝的紊亂，而過多的脂類沉積會使肝臟負荷過重，引發相關并發癥。靈芝是我國中醫藥寶庫中的珍品，具有抗癌、保肝解毒、軟化血管、抗衰老的作用[3]。硒是人體中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px） 的組成成分，是人體必需的微量元素。靈芝對硒具有高度的富集作用，用富硒水來灌溉靈芝，可明顯增加靈芝中硒的含量[4]。富硒靈芝是以靈芝作為硒的轉化載體培養獲得的，其兼具靈芝與硒的生物活性。據文獻報道，富硒靈芝能有效提高機體免疫力，并且具有降血脂、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老等作用[5-7]，可明顯改善高脂飲食誘導的非酒精性脂肪肝大鼠的癥狀，調節固醇調節原件結合蛋白1c（Sterol regulatory binding proteins-1c，SREBP-1c）及 乙 酰 輔 酶 A 羧 化 酶 α（ Acetyl-CoA carboxylase α，ACCα）表達[8]，對非酒精性脂肪肝具有一定的防治作用。但是，目前國內外均未報道其是否具有治療DM的作用。

真核細胞的脂肪酸β-氧化是由線粒體和過氧化物酶體共同完成的。過氧化物酶體是飽和/不飽和的極長鏈脂肪酸進行β-氧化的唯一場所。研究表明，DM患者線粒體中脂肪酸β-氧化會增強[9]。T2DM患者普遍存在血游離脂肪酸（FFA）水平異常升高的現象，過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）作為配體活化型核轉錄因子，在T2DM的發病中起著重要作用，過氧化物酶酰基輔酶A 氧化酶1（ACOX1）也是脂肪細胞內與脂肪氧化相關的酶，同時也是過氧化物酶體β-氧化系統的起始酶。故本研究擬建立T2DM大鼠模型，用富硒靈芝粗提物給藥后，檢測其肝組織病理學改變以及脂代謝、炎癥因子、肝功能的變化，并觀察其肝組織中PPARα 和ACOX1的表達水平變化，為富硒靈芝的開發利用提高參考。

1 材料

1.1 儀器

Multiskan FC全波段酶標儀（美國Thermo Fisher公司）；UV5Bio紫外分光光度計（瑞士Mettler-Toledo公司）；ABI 7500實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-qPCR）儀（美國ABI公司）。

1.2 藥品與試劑

富硒靈芝粗提物（沈陽市康硒生物工程研究所，批號：20180112，淡黃色粉末狀，含硒量為3.162 mg/kg、多糖為5.10 mg/kg）；鹽酸二甲雙胍片（中美上海施貴寶制藥有限公司，批號：20180477，規格：0.5 g）；鏈脲佐菌素（STZ，美國Sigma公司，批號：18883-66-4，純度：99.9%）；膽固醇（太原永耀生物科技有限公司，批號：20180046，純度：99.8%）；葡萄糖、胰島素、FFA、三酰甘油（TG）、血清總膽固醇（TC）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：分別為58367-01-4、11070-73-8、kt30249、20171107、20170564、20170365）；白細胞介素1β（IL-1β）、IL-6、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、丙氨酸轉氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（AKP）測定試劑盒（美國Bio-Swamp公司，批號：分別為kt59812、kt40133、kt25328、15364-33-2、15362-12-8、15366-35-1）；總RNA提取試劑盒[天根生化科技（北京）有限公司，批號：20170203]；反轉錄試劑盒（美國Thermo Fisher公司，批號：163578-12-2）；兔抗PPARα、ACOX1多克隆抗體（美國Abcam公司）；鼠抗β-肌動蛋白（β-actin）抗體（美國Santa Cruz公司）；辣根過氧化物酶（HRP）標記的羊抗兔免疫球蛋白G（IgG）二抗和HRP標記的羊抗鼠IgG二抗（北京中杉金橋公司）；ECL發光試劑盒（美國Millipore公司）；引物基因由美國Invitrogen公司合成。

1.3 動物

SD大鼠120只，♂，體質量180～200 g，由昆明醫科大學實驗動物學部提供，動物生產許可證號：SCXK（滇）- K2013-0002，動物使用許可證號：SYXK（滇） K2015- 0002。將大鼠適應性喂養2周后用于實驗，期間大鼠正常飲食，飼養在通風、溫度為15～25 ℃、濕度為55%～75%、晝夜各12 h交替的環境中。

2 方法

2.1 分組、造模與給藥

將120只大鼠隨機分為正常對照組（n=20）和造模組（n=100）。正常對照組大鼠喂養普通飼料，造模組大鼠喂養高脂飼料（由10%豬油、2.5%膽固醇、1%豬膽酸鹽、20%蔗糖和65.5%常規飼料組成）。4周后，造模組大鼠腹腔注射STZ溶液（30 mg/kg）復制T2DM模型[10]。于注射2周后，大鼠尾部取血測血糖，若血糖>16.7 mmol/L則視為造模成功[11]。將造模成功的90只大鼠隨機分為模型對照組、陽性對照組（200 mg/kg）[12]和富硒靈芝粗提物低、中、高劑量組（300、600、1 200 mg/kg，以提取物計）[13]，每組18只。富硒靈芝粗提物組大鼠灌胃富硒靈芝粗提物溶液（以生理鹽水為溶劑），陽性對照組大鼠灌胃二甲雙胍溶液（以生理鹽水為溶劑），正常對照組和模型對照組大鼠灌胃相同體積的生理鹽水，每天給藥1次，每周周一至周六給藥。

2.2 樣本采集及處理

在給藥第4、8周后，各組分別取一半大鼠，腹腔注射3.6%水合氯醛溶液（10 mL/kg）麻醉，剪開，暴露腹腔，無菌條件下快速從心臟取血，將收集的血液靜置30 min后，以 3 500 r/min離心15 min，取上層血清，保存于-80 ℃超低溫冰箱中，待用。然后摘下肝組織，剪取上部1/3組織并置于福爾馬林中固定保存，用于組織病理形態學觀察；將剩余部分肝組織置于-80 ℃超低溫冰箱中保存，用于mRNA和蛋白表達檢測。

2.3 指標檢測

2.3.1 胰島素抵抗指數計算 按照相應試劑盒說明書操作，采用紫外分光光度法檢測大鼠血清中葡萄糖、胰島素水平，并計算胰島素抵抗指數（葡萄糖水平×胰島素水平/22.5）[14]。

2.3.2 血清中炎癥因子指標測定 按照相應試劑盒說明書操作，分別采用紫外分光光度法檢測大鼠血清中血脂指標（FFA、TG、TC和LDL-C）水平；采用酶聯免疫吸附法測定大鼠血清中肝功能指標（AST、ALT、AKP）和炎癥因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）水平。

2.3.3 肝組織病理形態學觀察 取在4%多聚甲醛溶液中固定72 h的大鼠肝組織，常規制備5 μm厚切片，然后行蘇木精-伊紅（HE）染色，最后在光學顯微鏡下觀察其肝組織病理形態學變化。

2.3.4 肝組織中PPARα、ACOX1的mRNA表達水平檢測 采用RT-qPCR法。取大鼠肝組織約20 mg，低溫下勻漿研磨，按照RNA提取試劑盒按說明書步驟提取總RNA，分析總RNA的純度。然后以雙蒸水稀釋定量，取2 μg總RNA為模板反轉錄成cDNA。以2 ?L的cDNA為模板進行RT-qPCR分析。引物序列：PPARα 上游引物序列為5′ -TGCAGCCTCAGCCAAGTTGAA-3′ ，下游引物序列為5′ -TCCCGAACTTGACCAGCCA-3′ ，產物擴增長度為76 bp；ACOX1上游引物序列為5′ -AGGGAA- TTTGGCATCGCAGA-3′ ，下游引物序列為5′ -AGGCCAACAGGTTCCACAAA-3′ ，產物擴增長度為101 bp；內參β-actin上游引物序列為5′ -GCAGATGTGGATCAGCAAGC-3′ ，下游引物序列為5′ -GCAGCTCAGTAACAGTCCGC-3′ ，產物擴增長度為90 bp。反應體系：上、下游引物各0.5 ?L，dNTP 1.6 ?L、Taq DNA 聚合酶1 ?L、靶序列DNA 1 ?L、PCR反應緩沖液2 ?L和雙蒸水18.4 ?L，總反應體系為25 ?L。擴增條件：95 ℃預變性2 min；95 ℃變性10 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸35 s，循環40次；72 ℃最后再延伸5 min。分別記錄目的基因和內參基因的ct值（即每個孔內反映熒光信號強度達到閾值時需要的循環數）。采用2-ΔΔct法對進行定量分析，每組試驗至少重復3次。

2.3.5 肝組織中PPARα、ACOX1的蛋白表達水平檢測 采用Western blot法。取大鼠肝組織約100 mg，加入RIPA組織裂解液，在冰浴下制成10%勻漿，在4 ℃下以14 000 r/min離心10 min，吸取上清。采用二喹啉甲酸（BCA）法進行蛋白定量后，取50 μg總蛋白進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS- PAGE）。根據分子量切取目標蛋白條帶，半干轉膜法轉移至聚偏氟乙烯膜（PVDF）上，以5%的脫脂牛奶封閉2 h，分別加入PPARα、ACOX1多克隆一抗（1 ∶ 1 000），4 ℃過夜，洗膜；加入相應HRP標記的二抗（1 ∶ 20 000），孵育12 h，以TPBS緩沖液洗滌后加入發光聚合物ECL，使用膠片曝光，圖片掃描后用 Image J 軟件計算各條帶的灰度值，以各目標條帶灰度值與內參β-actin條帶灰度值的比值表示目標蛋白的相對表達量，每組實驗至少重復3次。

2.4 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析。計量資料以x±s表示。多組間數據比較采用單因素方差分析，若方差齊時兩組間比較采用LSD檢驗，若方差不齊時則采用TamhaneT2法。P<0.05表示差異有統計學意義。

3 結果

3.1 胰島素抵抗指數測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后血清中葡萄糖、胰島素含量顯著增加（P<0.01），胰島素抵抗指數顯著升高（P<0.01） 。與模型對照組比較，陽性對照組和富硒靈芝粗提物中、高劑量組大鼠在給藥4、8周后血清中葡萄糖和胰島素含量均顯著減少（P<0.05或P<0.01），胰島素抵抗指數含量均顯著降低（P<0.05或P<0.01）；并且富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠在給藥4周后血清中葡萄糖和胰島素含量顯著減少（P<0.05），在給藥8周后胰島素抵抗指數含量顯著降低（P<0.05），各組大鼠胰島素抵抗指數測定結果見表1。

3.2 血清中肝功能指標水平測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后血清中AKP、AST和ALT水平均顯著升高（P<0.01）。與模型對照組比較，陽性對照組和富硒靈芝粗提物中、高劑量組大鼠在給藥4、8周后血清中AKP、AST和ALT水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），且富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠在給藥4、8周后血清中AKP和給藥8周后血清中的ALT水平顯著降低（P<0.05），各組大鼠血清中肝功能指標測定結果見表2。

3.3 血清中血脂指標水平測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后血清中FFA、TC、TG和LDL-C水平均顯著升高（P<0.01）；與模型對照組比較，陽性對照組和富硒靈芝粗提物中、高劑量組大鼠在給藥4、8周后血清中FFA、TC、TG、LDL-C水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），但富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠差異無統計學意義（P>0.05），各組大鼠血清中血脂指標水平測定結果見表3。

3.4 血清中炎癥因子水平測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均顯著升高（P<0.01）；與模型對照組比較，陽性對照組和富硒靈芝粗提物中、高劑量組大鼠在給藥4、8周后血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平均顯著降低（P<0.05），富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠在給藥4周后血清中TNF-α水平以及給藥8周后血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平顯著降低（P<0.05），各組大鼠血清中炎癥因子水平測定結果見表4。

3.5 肝組織病理學觀察結果

正常對照組大鼠肝組織正常，未受到明顯損傷，肝細胞大小均勻、排列整齊，幾乎觀察不到炎性細胞及細胞中的脂肪顆粒沉淀。而模型對照組大鼠肝組織中多數肝小葉的結構輪廓模糊或基本消失，肝細胞腫脹、呈圓形且體積較明顯增大；有不同程度的脂肪變性及空泡樣變，并伴隨少量炎性細胞浸潤。給藥后，各給藥組大鼠肝組織中炎性細胞浸潤減少，形態恢復明顯，脂肪變性程度及細胞腫脹減輕，但仍有小部分面積脂肪顆粒堆積，且給藥8周后變化情況較給藥4周后更加明顯，大鼠肝組織病理形態學觀察結果見圖1。

3.6 肝組織中 PPARα、ACOX1的mRNA表達水平測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后肝組織中PPARα 、ACOX1的mRNA表達水平均顯著降低（P<0.05）。與模型對照組比較，陽性對照組和富硒靈芝粗提物中、高劑量組大鼠在給藥4、8周后肝組織中PPARα、ACOX1的 mRNA表達水平以及富硒靈芝粗提物低劑量組大鼠給藥8周后肝組織中PPARα、ACOX1的mRNA表達水平均顯著升高（P<0.05），各組大鼠肝組織中PPARα、ACOX1的mRNA表達水平測定結果見圖2。

3.7 肝組織中PPARα、ACOX1的蛋白表達水平測定結果

與正常對照組比較，模型對照組大鼠在給藥4、8周后肝組織中PPARα、ACOX1蛋白表達水平均顯著降低（P<0.01）。與模型對照組比較，各給藥組大鼠在給藥4、8周后肝組織中PPARα、ACOX1蛋白表達水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），各組大鼠肝組織中PPARα、ACOX1蛋白電泳圖見圖3、測定結果見表5。

4 討論

由于T2DM的發病機制較為復雜，包括了肝損傷、肥胖、高血脂、炎癥、胰島素抵抗等，所以在本次實驗中筆者采用高脂高糖飲食合并注射STZ（50 mg/kg）的方法復制T2DM大鼠模型。STZ注射后，模型對照組大鼠出現了高血糖、炎癥反應、高脂血癥以及明顯的胰島素抵抗等現象；并且HE染色結果也發現，造模后大鼠肝組織中多數肝小葉的結構輪廓模糊或基本消失，肝細胞的形態膨脹腫大，出現了許多炎性病灶，并伴有出現在胞質中的大量脂滴空泡，種種現象都說明T2DM大鼠造模成功。

據文獻記載，靈芝中存在多種對人體功能有明顯作用效果的生理調節因子，這些生理調節因子可以促進多種細胞因子的合成、抗損傷、減輕炎癥反應、調節機體內環境平衡并促進受損肝細胞恢復。另外，靈芝還具有明顯的抗腫瘤、免疫調節以及改善某些老年性疾病等作用[15-17]。脂代謝紊亂貫穿了從DM的發生到慢性并發癥發展的全過程，T2DM患者群普遍存在FFA水平異常升高的現象。本研究結果也發現，T2DM模型大鼠血清中FFA等血脂水平明顯升高。用富硒靈芝粗提物對T2DM 大鼠進行灌胃給藥后，發現富硒靈芝粗提物能夠促進模型大鼠肝組織中脂肪顆粒的排出、調節血脂異常。同時，隨著給藥時間的積累，上述癥狀改善效果更加明顯，這提示富硒靈芝粗提物對T2DM模型大鼠具有很好的改善作用。

DM病的發生發展過程與炎癥免疫反應關系密切，在T2DM狀態下，患者體內血清中脂多糖（LPS）及炎癥因子（如TNF-α、IL-1β等）處于高水平，而炎癥反應會加重胰島素抵抗和代謝障礙，因此，T2DM也可認為是一種慢性低度自身炎癥性疾病。其次，胰島素作用缺陷引起的葡萄糖利用障礙，使得組織只能更多地依賴體內脂質氧化提供能量[18]。機體血清中隨著脂肪動員增強而產生的大量FFA，FFA是PPARα的天然配體[19]，而PPARα是過氧化物增殖激活酶受體家族最早發現的蛋白之一，其在肝組織特別是在肝細胞的線粒體中含量非常豐富，且作用多種多樣，既能夠調節機體的抗氧化能力，也可以增強肝細胞表面的受體敏感性，還可以調節線粒體脂肪酸催化酶的表達，催化脂肪酸的β-氧化，從而使得機體中脂肪酸和TG的生成量降低，達到降血脂的效果[20]。作為脂肪酸β-氧化的另外一個核心酶，ACOX1是脂肪酸β-氧化系統中的起始酶，其負責整個過程啟動，由于β-氧化在脂肪酸的分解過程中占有非常重要的地位[21-22]，β-氧化是脂肪酸的分解最主要的途徑，因此，對PPARα和ACOX1的研究具有深刻的意義。本研究結果顯示，富硒靈芝粗提物可以通過上調T2DM模型大鼠肝組織中PPARα、ACOX1的mRNA和蛋白表達，促進大鼠肝組織中脂肪酸的β-氧化，從而減少肝組織中的脂質沉積。

綜上所述，富硒靈芝粗提物可改善T2DM模型大鼠肝臟組織中的脂肪分解代謝，調節肝功能，減輕炎癥反應。其作用機制可能是上調肝組織中PPARα、ACOX1的 mRNA及蛋白的表達，促進脂肪酸的β-氧化。

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（收稿日期：2018-06-15 修回日期：2018-12-12）

（編輯：林 靜）