吸煙對支氣管哮喘患者血清TOLL樣受體9表達的影響

陳列　章小國　陳麗萍

【摘 要】目的：探討吸煙對支氣管哮喘血清Toll樣受體9（TLR9）表達的影響。方法：收集于2017年我科吸煙哮喘患者30例、非吸煙患哮喘患者30例，作為實驗組;選取同期于我院體檢的健康非吸煙者30例作為對照組。應用酶聯免疫吸附實驗（ELISA）法測定吸煙哮喘患者、非吸煙哮喘患者、健康非吸煙者血清中TLR9表達，從免疫水平分析吸煙對哮喘患者的影響。 結果：吸煙哮喘組血清TLR9表達較非吸煙哮喘組升高（P<0.05），吸煙哮喘組血清TLR9表達較健康非吸煙組升高（P<0.05），非吸煙哮喘組血清TLR9表達較健康非吸煙者升高（P<0.05）。結論：吸煙可通過調節TLR9表達增加而增加免疫應答，進而促進氣道炎癥發生，這可能在哮喘的發生、發展中起到一定作用。

【關鍵詞】? 支氣管哮喘;Toll樣受體9;免疫調節

【中圖分類號】R562.25 【文獻標識碼】B【文章編號】1002-8714（2019）11-0109-02

哮喘是以Th2細胞損傷為主的慢性炎癥性疾病.吸煙能夠促進許多慢性病的發生。吸煙可以分為主動吸煙和被動吸煙。煙草煙霧中含有許多有害物質，吸煙可以引起以Thl/Th2功能失衡介導的IgE依賴型速發變態反應以及嗜酸性粒細胞浸潤為主的慢性氣道炎癥發生，造成哮喘急性發作;吸煙還可以促進白三烯分泌增多，引起平滑肌收縮，黏液分泌增多，促進氣道結構細胞增殖，參與氣道重構[1]。TLR9是Toll樣受體家族一員，是Ⅰ型跨膜蛋白，由胞外區，跨膜區和胞內區組成，也是識別細菌非甲基化的 CpG DNA 并介導其免疫刺激活性的受體。TLR9目前已在許多疾病中被研究，人類線粒體 DNA（ mtDNA） 與TLR9在系統性紅斑狼瘡、高血壓、心肌炎和心肌損傷、急性肺挫傷、腎小球足細胞損傷的發生、發展中均起到一定作用[2-4]。本文以吸煙支氣管患者作為研究對象，通過測定血清TLR9表達，明確吸煙對支氣管哮喘的影響，明確TLR9在哮喘發生的過程中，對慢性氣道炎癥的作用。

1 研究對象及方法

1.1研究對象 2016年1月至2017年12月期間于沈陽醫學院附屬第二醫院呼吸科住院患者中被診斷為支氣管哮喘患者60例，吸煙者30例，非吸煙者30例。同期于我院體檢的健康非吸煙者30例。哮喘患者均符合中國支氣管哮喘防治指南[3]，要求滿足條件：（1）年齡18～70歲，性別不限，且無吸煙史。（2）有較好的依從性，能配合肺功能檢查。（3）近半年未使用全身糖皮質激素。（4）行肺功能檢查前4h內未飲酒者。（5）行肺功能檢查前6h內未吸入短效β2受體激動劑及12h內未吸入長效β2受體激動劑。（6）自愿簽署知情同意書。并排除其他疾病引起的喘息、胸悶及咳嗽。

1.2方法

1.2.1 標本采集 所有研究對象采血前空腹8-12小時，晨起取肘靜脈血5ml，靜置 1 h 后，3000 r /min離心10 min，分離血清，-80 ℃ 冰箱保存待使用。

1.2.2 試驗方法 采用酶聯免疫吸附法分別檢測血清中ELISA 法測定血清中TLR9表達。過程嚴格按照說明書進行操作。

1.2.3 統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，進行兩獨立樣本t檢驗，結果以-x±s表示，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

試驗結果（表1）提示 吸煙哮喘組TLR9表達水平低于非吸煙哮喘組，差異有統計學意義（P<0.05）;吸煙哮喘組TLR9表達水平低于健康對照組，差異有統計學意義（P<0.05）;非吸煙哮喘組TLR9表達水平低于健康對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

TLRs是固有免疫家庭中的模式識別受體， 參與人體抵御病原入侵的第一道屏障。人體內共有 10個TLRs成員（TLR1 ～TLR10） ， 可以識別不同的病原體。TLR9 的配體主要來源于細菌/病毒 DNA和 mtDNA。細菌/病毒 DNA 誘導的 TLR9 信號是機體的固有免疫機制之一，能幫助機體抵御感染等致病因素; 而 mtDNA 配體誘導的 TLR9 信號似乎總是對機體有害，可導致組織炎癥，或者直接促進細胞損傷[5-8]。

本文通過測定健康人群血清TLR9表達，比較哮喘患者TLR9表達變化，結果提示哮喘患者血清TLR9表達較健康對照組增加，同時以吸煙哮喘、非吸煙哮喘患者作為研究對象，通過檢測血清TLR9表達，得出結論吸煙可使哮喘患者血清TLR9表達增加，這可能是吸煙誘導哮喘發生、發展的原因之一。此項結果可能成為臨床治療的理論依據。

參考文獻

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