蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測

袁柱良 李海英

摘 要 蔬菜中農藥殘留作為食品安全管理的重要內容，關于檢驗蔬菜中的農藥殘留量主要是檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量。氣相色譜法是檢測這兩類農藥的主要標準方法，盡管所具有的靈敏度較高，但是需要耗費較長時間，不適合在臨床檢驗中進行大力推廣。為此，找到快速檢測方法刻不容緩。

關鍵詞 蔬菜；有機磷；氨基甲酸酯類農藥；殘留量；快速檢測

通過檢測農產品中的農藥殘留可充分確保農產品的質量安全，為此農產品檢測的重點在于科學的檢測農藥殘留量。當下，我國有一百多種有機磷與氨基甲酸酯類農藥，質量參差不齊，品種復雜，在檢測時很難有效的應用色相譜方法[1]。若使用CL-BIII殘留農藥測定儀，對于假陽性問題很難得到有效避免。現就兩種快速檢測方法進行詳細介紹，詳情如下。

1 酶抑制法

1.1 原理

有機磷與氨基甲酸酯類農藥在一定情況下能夠對膽堿酯酶的正常功能進行有效抑制，且抑制率的高低直接取決于農藥濃度。通過對待測樣品的檢測可掌握對乙酰膽堿酶活性抑制情況的了解，根據紫外可見分光光度計原理和412nm波長的吸光度隨時間的變化值可將抑制率計算出來，同時能夠初篩/定性分析待測樣品。陰性：抑制率不足50%、陽性：超過50%[2]。

1.2 調試儀器

采用CL-BIII八通道殘留農藥測定儀。將電源接通后，開機進行半小時預熱；設置參數，選擇通道，對照試樣與樣品試樣可分別在第1、2-8通道放置；設置當日測試日期；調0使吸光度為0.000.

1.3 試劑配制

顯色劑：取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氫鈉15.6mg，20ml提取溶解，保存在4℃條件下。提取溶液：取無水磷酸氫二鈉11.9g、磷酸二氫鉀3.2g，溶解時采用1000ml蒸餾水，所制成的提取液pH為8.0.乙酰膽堿酯酶：使用提取液進行溶解，控制3分鐘吸光度變化值超過0.3，搖勻后保存在4℃條件下備用，保存期小于4天。底物：取硫代乙酰膽堿25.0mg，溶解時使用30ml蒸餾水，搖勻并同樣在在4℃條件下保存備用。

1.4 空白對照

取2.5ml提取液、1.0ml顯色劑、1.0ml酶，進行15分鐘靜置，加入底物之后開展上機測試，嚴格根據標準開展空白對照組，且保存，按下“裝入對照樣例”鍵，將對照數據庫打開，然后選擇“標準對照庫”，在各個通道中裝入當天做好的空白對照[3]。

1.5 樣品制備

從每顆蔬菜上取樣檢測，取1.0g葉菜類，不要太碎，主要是葉子。針對特殊菜，如蔥蒜等需要密切留意假陽性，采用標準對照庫來進行樣品比對工作。花菜類：取3棵樣品，取葉1.0g；果菜類：順皮削取1.0g；食用菌可采用整株浸泡的方式。

1.6 樣品檢測

在樣品瓶中放入事先稱取好的樣品，加入提取液5.0ml，15分鐘靜置后在5ml玻璃試管中吸入2.5ml樣品瓶溶液，同時加入1.0ml顯色劑、1.0ml酶液，15分鐘靜置后加入底物1.0ml搖勻，倒入比色皿中進行上機測試。在溫度不足37℃時，會降低酶反應速度，由此會延長顯色劑、酶液的放置反應時間，膽堿酯酶空白對照3分鐘后與對照差值超過8才能繼續進行操作。

1.7 結果判斷

陽性：被測樣品酶抑制率大于50%，說明蔬菜上有機磷與氨基甲酸酯類農藥殘留量較高，該樣品需要重復檢測2次以上。

2 速測卡法

2.1 材料

固化有靛酚乙酸酯與膽堿酯酶試劑的緩沖溶液、試紙、天平、（37±2）℃恒溫裝置。

2.2 整體測定法

取具5g極具代表性的蔬菜，在帶蓋瓶中放置并加入一定劑量的緩沖液。靜置2分鐘后開展預反應，在實驗條件允許的情況下在37℃水浴箱中進行10分鐘的處理，每個實驗批次都需要將相關緩沖液的空白對照卡設定下來[4]。

在使用表面測定法的過程中，首先將一定數量的緩沖液滴到所選定的蔬菜表面上，均勻的涂抹并進行預反應，每次測定都需要設置同一個緩沖液的對照組。

2.3 結果判定

若蔬菜殘留的有機磷和氨基甲酸酯類藥物沒有抑制酶，則用陰性表示，反之則用陽性表示。通過對比實驗結果顏色發現，若白色卡片與對照組卡片顏色保持一致或出現天藍色則為陰性，若白色卡片為淺藍色或未變色則判定為陽性。

3 討論

上述兩種檢測方法具有各自檢出限，在不同檢測要求與條件下可有選擇的使用。速測卡法檢測在使用時應該注意相關事項，若實驗溫度不足37℃，則相應的會減緩酶反應速度，由此需要適當的延長放置時間；若實驗中空白卡片不變色，則與溫度過低、葉片表面緩沖液較少有關[5]。

當下，在使用酶抑制率法的過程中還存在一些問題，如需進一步提升酶制劑質量問題，且重視酶純度問題。由于酶活性是開展實驗的必要條件，若酶活性不達標則不能繼續開展實驗。同時，在具體實驗中多使用常規分光光度計，以此可滿足檢測要求，但是實驗操作與計算相對麻煩，使用改進的分光光度儀可簡化操作與計算過程。

4 結束語

綜上所述，速測卡操作法的操作比較簡單，且試藥具有較高穩定性；酶抑制率法操作相對比較復雜，試藥穩定性較低，且需要保存在4℃條件下，但是通過判斷數據形式可知這種方法具有直觀性，在具體應用時需對實際檢測要求與條件進行充分考慮。

參考文獻：

[1]陳軍麗.不同前處理對酶抑制法檢測蔬菜有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的影響[J].現代農村科技，2019（05）：50-51.

[2]禹子鳳.茶葉中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測技術[J].農民致富之友，2018（23）：41.

[3]陳冬梅，張金娥.基質固相分散-氣相色譜質譜聯用法測定蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘留量[J].山東化工，2018，47（03）：62-63+66.

[4]羅輝泰，黃曉蘭，吳惠勤，等.基于酶抑制原理的電噴霧質譜法快速篩查蔬菜中氨基甲酸酯類農藥殘留[J].分析化學，2014，42（11）：1561-1567.

[5]王林，王晶，張瑩，楊大進，鄧峰.蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測方法研究[J].中國食品衛生雜志，2003（01）：39-41.