胰島素樣生長因子-Ⅰ及其受體在糖尿病足潰瘍的表達及臨床價值

王亭

（濟寧市第一人民醫院檢驗科，山東濟寧 272000）

糖尿病患者常并發嚴重的足部潰瘍，研究表明，約有15%的糖尿病患者可能會并發足部潰瘍，而糖尿病足部潰瘍的患者其死亡率高達29%[1-2]。臨床上，導致糖尿病足的因素多種多樣，目前有研究表明，胰島素樣生長因子-I(ICF-I)和傷口的愈合有密切的關系[3]。為進一步的研究ICF-I的表達和糖尿病足的關系，現該院以2018年6月—2019年6月為研究時段，開展深入探究，詳細報道見下。

1. 資料與方法

1.1 一般資料

經患者和患者家屬同意以及醫院倫理委員會的批準實施，選該院治療的30例糖尿病足患者（A組），30例單純糖尿病患者（B組）和30例非感染非糖尿病手術患者(C組)作為本次研究對象。A組患者年齡：57～78 歲，平均年齡（64.43±12.24）歲，病程在 4～12 年，平均病程(7.45±2.20)年，餐后 2 h 的血糖為（13.31±2.34）mmol/L；空腹血糖為（8.45±1.21）mmol/L；B 組患者的年齡為 50～78 歲，平均年齡（59.67±14.33）歲，病程在3～14年，平均病程(8.18±2.54)年;C組病患的年齡為 61～80 年，平均年齡（58.37±19.34）歲，病程在 4～13年，平均病程(7.17±2.92)年。上述患者進行一般資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。 納入標準[4]：（1）確診為2型糖尿病；（2）無嚴重臟器損傷。排除標準：（1）患者昏迷或存在精神障礙；（2）患者在90 d內有糖尿病并發癥史；（3）嚴重的腎肝功能不全；（4）其他疾病導致的周圍神經病變和血管病變；（5）不署知情協議書。

1.2 方法

獲取足部組織標本：A組：在手術中或是清創換藥時取病變交界處的皮膚組織；B組、C組：在手術中取切緣皮膚的全層組織，組織的厚度約為2.5 mm，大小取1 cm×1 cm。用10%的甲醛將所取標本固定2 d，脫水，包埋，最后制備為石蠟切片，厚度4 μm，至少2張，其中1張進行常規的HE染色，另1張進行ICF-I抗體的免疫化學染色。在400倍的顯微鏡下對3組標本進行觀察。

1.3 組織ICF-I的表達強度依據組織免疫組化的染色深淺

棕褐色是3分，棕黃色是2分，淡黃色是1分，無色是0分。依據陽性細胞概率打分：細胞陽性概率，10%是 1分，11%～50%是2分，51%是3分，無陽性的細胞評分為0分。組織的表達強度可用染色強度乘以細胞陽性率表示：0～2 分是(-)，3～4 分是(+)，5～7 分是(++)，8～9分是(+++)。組織ICF-1陽性指數的測定方式：首先用低倍鏡下選出ICF-I(+)細胞分布最密集的區域，之后在400倍鏡下對5個視野中的陽性細胞和上皮細胞數計數，陽性指標可用（陽性細胞/上皮細胞）%來表示，由2人完成，計數采用雙盲法，差異大于10%，便需要重新計數。

1.4 統計方法

使用SPSS 20.0統計學軟件進行數據的統計分析，使用（±s）表示計量資料，使用[n(%)]表示計數資料。P＜0.05為差異有統計學意義。

2. 結果

2.1 組織IGF-ⅠRα的免疫組化

在IGF-ⅠRα的免疫組化染色中，上皮細胞的胞膜與胞漿內出現棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纖維細胞與表皮細胞的胞膜上。

2.2 組織IGF-ⅠRβ的免疫組化

在IGF-ⅠRβ的免疫組化染色中，上皮細胞的胞膜與胞漿內出現棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒細胞、巨噬細胞和表皮細胞的胞膜上。

2.3 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的陽性指數

在三組皮膚標本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的組織陽性指數存在統計學差異，B組較C組的表達減弱，A組較B組的表達則進一步減弱，差異有統計學意義（P＜0.05）。 詳見表1。

表1 各組皮膚組織中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα陽性指數比較（±s）

表1 各組皮膚組織中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα陽性指數比較（±s）

組別IGF-Ⅰ Rα IGF-Ⅰ Rβ A 組（n=30）B 組（n=30）C 組（n=30）74.45±20.45 46.97±14.08 19.45±8.45 69.87±15.51 53.24±12.48 16.09±9.45

2.4 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的表達強度

在三組皮膚標本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的表達強度存在統計學差異，B組較C組的表達減弱，A組較B組的表達則進一步減弱，差異有統計學意義（P＜0.05）。 詳見表2。

表2 各組皮膚組織中IGF-ⅠRα和IGF-ⅡRβ表達強度比較

3 討論

糖尿病足潰瘍是一種嚴重的糖尿病并發癥，導致慢性潰瘍，最終引起截肢，影響患者的生活質量。由于糖尿病足的發病率較高，而且對患者的影響較大，所以更應引起人們對于該疾病的關注[5]。研究表明，ICFI和糖尿病足有一定的關系，ICF-I為一種由70個氨基酸共同組成的單鏈多肽，編碼基因在12號染色體的短臂上，和胰島素原具有高度同源性。ICF-I不僅可以能誘導多種細胞因子的表達，還能促進膠原、聚葡萄糖胺和纖粘連蛋白等胞外基質的分泌和合成，加速創面修復之后的組織改建，和糖尿病足部潰瘍密切相關[6]。該次的研究表明，在IGF-Ⅰ Rβ和IGF-Ⅰ Rα的免疫組化染色中，上皮細胞的胞膜與胞漿內出現棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纖維細胞與表皮細胞的胞膜上。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒細胞、巨噬細胞和表皮細胞的胞膜上。在三組皮膚標本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的組織陽性指數以及表達強度均存在統計學差異，且B組較C組的表達減弱，A組較B組的表達則進一步減弱，差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，ICF-I的不足或是缺乏可能和糖尿病導致機體內皮細胞破壞有關，和糖尿病足部潰瘍病人潰瘍長期存在密切相關，建議在臨床進行進一步研究。