原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性及其臨床意義分析

劉煒 徐聆峰 譚宗建

(貴州省人民醫(yī)院生殖中心，貴州 貴陽 550002)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(RSA)主要是指與女性與同一位性伴侶連續(xù)發(fā)生兩次或者是大于兩次的自然流產(chǎn)現(xiàn)象，且近年該疾病的發(fā)生率呈上升趨勢(shì)，發(fā)生率大概在1%～5%之間[1]。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的原因比較復(fù)雜，主要與環(huán)境因素、不良生活習(xí)慣、創(chuàng)傷刺激、全身性疾病、感染因素、生殖器官異常、免疫功能異常、內(nèi)分泌異常、染色體異常等有關(guān)，但是臨床上仍然有50%的患者病因不夠明確，臨床上將其稱為原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(URSA)[2]。原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生與胎兒血液供應(yīng)不足、胎盤組織中血管發(fā)生異常有很大的關(guān)系。妊娠早期血管重塑與形成有利于滋養(yǎng)細(xì)胞侵入胎盤與子宮內(nèi)膜使其正常發(fā)育，最終有利于保證胚胎的順利發(fā)育。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)與相關(guān)的受體相關(guān)受體(VEGFR)，在血管形成當(dāng)中其主要作用的為可溶性VEGF受體-1(sFlt-1)，它還具有維持胎兒營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)、蛻膜組織中血流量、血管密度的作用[3]。我院在原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性及其臨床意義分析中，發(fā)現(xiàn)原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1呈正相關(guān)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年7月至2018年7月我院收治的原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者77例作為研究組，同時(shí)選取在我院進(jìn)行體檢的正常早孕婦女77例作為對(duì)照組，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)已經(jīng)發(fā)生原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)≥2次的患者；(2)妊娠孕周6～12周；(3)經(jīng)過臨床尿人絨毛膜促性腺激素(hCG)、B超、體征、臨床病史確診為已經(jīng)發(fā)生難免流產(chǎn)產(chǎn)婦；(4)健康早孕婦女也符合以下要求：①以往未出現(xiàn)過死產(chǎn)、死胎、自然流產(chǎn)歷史；②此次妊娠期間無任何異常，生命體征正常；③無病毒感染、服藥歷史；④通過B超檢查胚胎發(fā)育正常；⑤無婦科疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在感染性疾病的產(chǎn)婦；(2)精神異常的產(chǎn)婦；(3)存在服藥歷史的產(chǎn)婦。對(duì)照組77例，年齡23～35歲，平均年齡(32.3±1.2)歲；孕周6～12周，平均孕周(9.2±1.2)周；研究組77例，年齡23～36歲，平均年齡(32.5±1.1)歲；孕周6～12周，平均孕周(9.1±1.3)周；產(chǎn)婦資料有可比性(P>0.05)，本研究得到了我院倫理委員會(huì)處批準(zhǔn)。

1.2方法 血標(biāo)本：所有孕婦均在入院后的第2天清晨采集空腹肘靜脈血2 mL，靜置1 h離心分取血清，將分取的血清放置到-70 ℃環(huán)境下保存[4]。血清中VEGF與sFlt-1水平檢測(cè)：將待檢的血清應(yīng)用ELISA法進(jìn)行定量檢測(cè)，ELISA試劑盒由美國(guó)安迪生物提供；人工流產(chǎn)后采集產(chǎn)婦絨毛組織，后沖凈并去除血細(xì)胞，將其放到甲醛溶液(4%)中進(jìn)行固定(36 h)，再將其進(jìn)行石蠟包埋切片后烤片脫蠟，免疫組織化學(xué)二步法對(duì)組織進(jìn)行染色，對(duì)VEGF與sFlt-1表達(dá)情況進(jìn)行觀察[5]。免疫組化判斷標(biāo)準(zhǔn)：VEGF陽性：組織為棕色或者是黃色；sFlt-1陽性：組織為棕黃色顆粒狀。由病理科人員應(yīng)用高倍鏡視野進(jìn)行閱片，并根據(jù)半定量積分法對(duì)免疫組織學(xué)進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分=a×b(a.陽性細(xì)胞百分比，b.陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度)；a為1b=0，細(xì)胞染色不明顯，陰性；b=1，細(xì)胞染色呈淡黃色；b=2，細(xì)胞染色呈黃色；b=3，細(xì)胞染色呈棕黃色；陽性細(xì)胞<20%；a為2，陽性細(xì)胞為21%～60%；a為3，陽性細(xì)胞為61%～90%；a為4，陽性細(xì)胞≥90%。陽性判斷結(jié)果：陽性：組織學(xué)評(píng)分5～12分；陰性：組織學(xué)評(píng)分<5分[6]。

1.3觀察指標(biāo) 比較兩組人群血清中VEGF與sFlt-1水平。比較兩組人群絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達(dá)情況。分析原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性[7]。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清中VEGF與sFlt-1水平對(duì)比 研究組血清中VEGF與sFlt-1水平高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 血清中VEGF與sFlt-1水平對(duì)比

2.2兩組絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達(dá)情況對(duì)比 研究組絨毛組織中VEGF與sFlt-1陽性表達(dá)率高于對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達(dá)情況對(duì)比[n(%)]

2.3原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性分析 原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性分析

3 討 論

原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是近年臨床上發(fā)生率較高的疾病，導(dǎo)致該疾病的發(fā)生原因有很多，但是還有很多原因仍不明確。近年來臨床上發(fā)現(xiàn)VEGF與sFlt-1與原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)存在一定的聯(lián)系。VEGF在胚胎發(fā)育、創(chuàng)傷愈合過程中發(fā)揮著非常重要的作用，它會(huì)對(duì)血管形成起到一定的調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)有絲分裂，同時(shí)會(huì)促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增長(zhǎng)繁殖、分化分裂等[8]。本次研究發(fā)現(xiàn)，VEGF與sFlt-1水平越高越容易導(dǎo)致不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。VEGF屬于血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的重要因子，它在誘導(dǎo)血管形成、維持胎盤血流量的過程中發(fā)揮著重要的作用[9]。近年有學(xué)者研究[10]發(fā)現(xiàn)，胎盤絨毛基質(zhì)巨噬細(xì)胞與合體滋養(yǎng)細(xì)胞所產(chǎn)生的VEGF具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖、靜脈血管通透性的作用。VEGF是促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)的主要因子，它在血管生成方面有著重要的作用，該表達(dá)水平出現(xiàn)異常與流產(chǎn)有很大的聯(lián)系。VEGF受體sFlt-1除了具有抑制血管形成的作用，且它可以對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞NO釋放合酶進(jìn)行抑制，抑制VEGF發(fā)揮作用，最終會(huì)對(duì)血管生成過程造成影響，破壞血管通透性與完整性。VEGF發(fā)生異常會(huì)對(duì)胚胎血管生成過程造成影響，導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生，VEGF水平偏高就屬于異常[11]。同時(shí)，VEGF與sFlt-1水平偏高，會(huì)使胚胎處于低氧環(huán)境，兩者之間相互影響會(huì)導(dǎo)致絨毛血管生成受到影響，血管壁通透性降低導(dǎo)致流產(chǎn)[12]。VEGF與sFlt-1水平越高胚胎缺氧也就會(huì)越嚴(yán)重，胎兒各方面的發(fā)育情況也會(huì)受到嚴(yán)重的影響，特別對(duì)血管生成非常不利，加快了流產(chǎn)的發(fā)生[13]。本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組血清中VEGF與sFlt-1水平高于對(duì)照組(P<0.05)，這就說明，VEGF與sFlt-1水平會(huì)對(duì)不明原因的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)造成影響，盡早對(duì)產(chǎn)婦進(jìn)行檢查有利于預(yù)防復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。同時(shí)也說明不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦的血清中VEGF與sFlt-1水平比正常產(chǎn)婦的要高。

相關(guān)研究[14]顯示，VEGF的受體sFlt-1水平如果顯著升高，則會(huì)導(dǎo)致sFlt-1與VEGF的親和力增強(qiáng)，降低產(chǎn)婦血清中VEGF的水平，抑制產(chǎn)婦胎盤中血管的形成，最終會(huì)對(duì)早期胎盤的發(fā)育造成影響，促進(jìn)流產(chǎn)的發(fā)生。本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組絨毛組織中VEGF與sFlt-1陽性表達(dá)率高于對(duì)照組(P<0.05)，這就說明，VEGF與sFlt-1陽性表達(dá)率越高越容易導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生。另外也可以說明可溶性sFlt-1水平越高會(huì)對(duì)VEGF水平進(jìn)行中和，導(dǎo)致VEGF水平不足，最終使產(chǎn)婦的孕期胎盤血管生成造成了抑制，促進(jìn)了流產(chǎn)發(fā)生。

有學(xué)者[15]發(fā)現(xiàn)，對(duì)正常孕婦的妊娠絨毛進(jìn)行培養(yǎng)液培養(yǎng)可以發(fā)現(xiàn)有管狀內(nèi)皮細(xì)胞形成與遷移現(xiàn)象發(fā)生，而在其中加入sFlt-1則會(huì)對(duì)其作用進(jìn)行抑制或者是減弱，說明加入的sFlt-1會(huì)對(duì)VEGF作用進(jìn)行抑制，會(huì)對(duì)胎盤中血管的生成造成影響，最終會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮受到損傷，使血管生成過程受到抑制。本次研究發(fā)現(xiàn)，原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1呈正相關(guān)(P<0.05)，說明sFlt-1水平發(fā)生異常是導(dǎo)致不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的重要因素。

綜上所述，原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1的相關(guān)性及其臨床意義分析中，原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與sFlt-1存在緊密的聯(lián)系，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)是非常有必要的。