支原體肺炎病兒體內Toll樣受體4、CXCL8、可溶性髓系細胞觸發受體-1水平變化及臨床意義

李會娟，靳秀紅，梁東閣，常會娟

小兒支原體肺炎的發生率具有一定的上升趨勢，流行病學研究證實，小兒支原體肺炎的發生率可達272～383/10 000左右［1］。臨床上小兒支原體肺炎的發生，能夠導致重癥肺部感染的發生，增加了多器官功能損傷的風險［2］。

在探討小兒支原體肺炎的病情進展機制的過程中，可以發現炎癥相關因子的改變，在促進肺部感染性病情的擴散等方面發揮了重要的作用。Toll

樣受體4（TLR4）能加深炎癥性反應的程度，加劇中性粒細胞的激活效應，進而促進了肺泡上皮組織的損傷［3］；趨化因子CXCL8能夠通過誘導單核細胞或者巨噬細胞的激活，提高相關炎癥性細胞對于肺泡上皮細胞膜完整性的破壞，進而導致病兒的肺換氣或者肺通氣功能障礙［4］；可溶性髓系細胞觸發受體-1（sTREM-1）是重要的炎癥因子及氧化應激性指標，其濃度的上升能夠導致下游炎癥信號通路的激活，提高了效應因子如白細胞介素6（IL-6）的上調，進而促進了肺部感染性病情的進展［5］。為了揭示小兒支原體肺炎體內TLR4，CXCL8，sTREM-1水平變化及臨床意義，本次研究收集了相關臨床病例，探討了TLR4，CXCL8，sTREM-1的表達及其與病兒病情的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年12月至2017年10月在鄭州大學附屬兒童醫院接受治療的支原體肺炎病兒100例為觀察組，男68例，女32例，年齡范圍為3～11歲，年齡（8.75±2.01）歲。納入標準：（1）年齡≤12周歲；（2）經檢查確診為支原體肺炎；（3）無其他呼吸系統疾病者；排除標準：（1）不愿參與本項研究者；（2）近期合并其他感染性疾病者。根據不同疾病程度再分為重癥組35例和非重癥組65例，重癥的診斷：①呼吸困難與缺氧癥狀明顯，吸氧后癥狀不能緩解；②有明顯中毒癥狀（如昏迷等）；③有心力衰竭或中毒性腦病或中毒性麻痹；④肺部濕羅音密集，X線有大片陰影者；⑤有嚴重合并癥，如膿胸、膿氣胸等。選取同期接受體檢的健康兒童100例為對照組，男65例，女35例，年齡范圍為3～12歲，年齡（8.81±2.13）歲，納入標準：年齡≤12周歲，近期無感染性疾病者。兩組的一般資料差異無統計學意義，具有可比性。所有病兒及健康兒童近親屬均知情同意。本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2 檢測方法采集入院后靜脈血，離心后收集上清液，采用免疫發光法檢測TLR4，CXCL8，sTREM-1水平，檢測儀器為美國Bio-Bad全自動酶標儀，配套試劑盒購自羅氏檢測公司；采用全自動生化法檢測腫瘤壞死因子a（TNF-α）、IL-6、超敏C反應蛋白（hs-CRP）值，配套試劑盒購自南京碧云天生物檢測公司。

1.3 評價指標觀察兩組研究對象、不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平、炎癥因子和肺功能指標的差異，分析支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關性。

1.4 統計學方法采用SPSS 11.5軟件進行分析。計數和計量資料分別采用例和±s表示。TLR4、CXCL8、sTREM-1水平、炎癥因子和肺功能指標的比較采用t檢驗進行分析；采用Pearson相關分析法分析支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關性。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較

觀察組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平均高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 支原體肺炎和健康對照組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

表1 支原體肺炎和健康對照組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

注：TLR4為Toll樣受體4，sTREM-1為可溶性髓系細胞觸發受體-1

組別對照組觀察組t值P值sTREM-1/（ρg/mL）18.42±3.12 55.36±5.69 56.925＜0.001例數100 100 TLR4/（ng/mL）1.03±0.02 3.48±0.67 36.551＜0.001 CXCL8/（pg/mL）148.53±19.12 288.67±12.65 61.127＜0.001

2.2 兩組炎癥因子和肺功能指標的比較觀察組TNF-α、IL-6、hs-CRP水平高于對照組，FVC、MMEF、PEF水平低于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 支原體肺炎和健康對照組炎癥因子和肺功能指標的比較/±s

表2 支原體肺炎和健康對照組炎癥因子和肺功能指標的比較/±s

注：TNF-α為腫瘤壞死因子α，IL-6為白細胞介素6、hs-CRP為超敏C反應蛋白，FVC為用力肺活量，MMEF為最大呼氣中期流量，PEF為最大呼氣流量

組別對照組觀察組t值P值PEF/（L/s）7.86±0.64 6.11±1.03-14.431＜0.001例數100 100 TNF-α/（μg/L）15.37±2.43 24.55±4.18 18.987＜0.001 IL-6/（pg/mL）9.06±1.65 45.25±9.58 37.228＜0.001 hs-CRP/（mg/L）1.68±0.72 5.63±1.35 25.817＜0.001 FVC/L 2.65±0.63 2.38±0.57-3.178＜0.001 MMEF/（L/s）2.82±0.67 2.17±0.48-7.886＜0.001

2.3 不同疾病程度病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平比較重癥支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平高于非重癥組（P＜0.05）。見表3。

表3 不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

表3 不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

注：TLR4為Toll樣受體4，sTREM-1為可溶性髓系細胞觸發受體-1

組別重癥組非重癥組t值P值sTREM-1/（ρg/mL）60.75±5.28 49.62±4.22 11.502＜0.001例數35 65 TLR4/（ng/mL）4.01±1.13 3.12±0.71 4.231 0.000 CXCL8/（pg/mL）319.47±16.14 250.35±15.08 21.330＜0.001

2.4 不同疾病程度病兒炎癥因子和肺功能指標的比較重癥支原體肺炎病兒的TNF-α、IL-6、hs-CRP水平高于非重癥組，FVC、MMEF、PEF水平低于非重癥組（P＜0.05）。見表4。

表4 不同疾病程度支原體肺炎病兒炎癥因子和肺功能指標的比較/±s

表4 不同疾病程度支原體肺炎病兒炎癥因子和肺功能指標的比較/±s

注：TNF-α為腫瘤壞死因子α，IL-6為白細胞介素6，hs-CRP為超敏C反應蛋白，FVC為用力肺活量，MMEF為最大呼氣中期流量，PEF為最大呼氣流量

組別重癥組非重癥組t值P值PEF/（L/s）5.76±1.11 6.62±1.23 3.448 0.001例數35 65 TNF-α/（μg/L）32.12±3.09 16.01±2.36 29.147 0.000 IL-6/（pg/mL）50.84±8.26 40.67±7.24 6.375 0.000 hs-CRP/（mg/L）6.84±1.65 4.48±1.02 7.706 0.000 FVC/L 2.01±0.41 2.46±0.67 4.159 0.000 MMEF/（L/s）1.85±0.36 2.52±0.54 7.404 0.000

2.5支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關性支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子水平正相關，與肺功能水平負相關。見表5。

表5 支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關性

3 討論

在具有自身免疫力下降的兒童中，支原體肺炎的發生率具有進一步的上升表現［6-7］。臨床上小兒支原體肺炎的發生，不僅能夠導致病兒肺部感染性癥狀的發生，同時還能夠導致病兒心臟、肝腎組織的受累，導致病兒不良臨床結局的發生［8-9］。現階段臨床上缺乏對于小兒支原體肺炎的有效診斷指標，雖然影像學檢查能夠評估肺部感染性疾病的發生風險，但胸部CT或者X片檢查等的滯后性較為明顯，早期多數病兒并無顯著的影像學檢查的改變。血清學指標的分析，能夠為小兒感染性疾病的診斷過程中發揮重要的作用，其能夠指導臨床上小兒支原體肺炎的早期臨床干預，進而改善病兒的臨床結局。

TLR4的上升能夠反應中性粒細胞的激活程度，評估病兒體內的急性感染性病情變化。基礎方面的研究認為，TLR4的上升能夠提高中性粒細胞對于肺泡組織的浸潤程度，導致血管內皮細胞損傷、肺泡上皮細胞凋亡等病理改變的發生［10］；CXCL8表達濃度的上升不僅能夠影響到中性粒細胞的激活，還能夠促進巨噬細胞的上調，增加巨噬細胞對于肺泡上皮組織的吞噬能力；sTREM-1是重要的趨化因子和炎癥因子，其能夠通過對于MAPK的激活，進而促進下游炎癥性瀑布因子的激活，加劇了肺部感染性病情的擴散［11］。部分研究者報道了CXCL8在支原體肺炎病兒血清中的表達情況，認為其表達濃度的上升與肺炎病兒的病情發生密切相關［12］，但缺乏對于不同指標與病兒病情嚴重程度和肺功能的關系研究。

本次研究中可以發現，在小兒支原體肺炎中，TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達濃度均明顯的上升，高于非支原體感染組，差異較為明顯，提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1均可能影響到了小兒支原體肺炎的病情進展過程，通過薈萃國內外相關文獻，筆者認為TLR4、CXCL8、sTREM-1的高表達與肺炎的病情關系，可能與下列幾個方面的因素有關［13-14］：（1）TLR4的上升能夠導致小氣道平滑肌細胞的炎癥性浸潤程度的增加，導致小氣道阻塞的風險上升，影響到了肺換氣過程；（2）sTREM-1的上升能夠導致下游TNF-α的激活，增加了其對于肺泡間質成分的破壞作用。郭冰冰等［15］研究者也發現，在支原體肺炎病兒中，TLR4的表達濃度可平均上升30%以上，同時在治療預后較差或者發生了遠期并發癥的病兒中，TLR4的表達濃度可進一步的上升。TNF-α、IL-6及hs-CRP的表達是評估病兒體內炎癥反應的重要指標，在支原體肺炎病兒血清中，TNF-α、IL-6、hs-CRP的表達明顯的上升，提示了病兒體內存在明顯的炎癥反應激活的表現，而肺功能指標則明顯的下降，提示病兒的肺功能累及表現較為明顯，這主要考慮與長期的炎癥性反應，導致支氣管平滑肌的痙攣，進而影響到肺通氣或者肺換氣過程。重癥支原體肺炎病兒，其肺部實質性病變程度較為明顯，病兒的咳喘、咳痰及發熱等臨床表現較為嚴重，短期內可合并有其他組織臟器的損害，臨床上通過支原體抗體評估重癥支原體肺炎病情的一致性率較低，而本次研究中，在重癥組病兒中，TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達濃度可進一步的上升，高于非重癥組，同時體內的炎癥反應因子的上升也較為明顯，肺功能的下降同樣較為顯著，提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達與支原體肺炎病兒的病情嚴重程度密切相關，臨床上可以通過檢測血清中相關指標，進而評估小兒支原體肺炎的病情。相關關系分析也可見，支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子水平正相關，與肺功能水平負相關，進一步提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達與病兒綜合性病情的關系，這主要由于TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達能夠影響到病兒體內的炎癥反應的調控，并能夠促進氣道阻塞、支氣管痙攣等病理改變的發生。

本次研究的創新性在于探討了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達與肺炎病兒肺功能的關系。綜上所述，支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平較高，與炎癥因子和肺功能指標相關，且受疾病嚴重程度的影響。