兩種實驗方法檢測食品中金黃色葡萄球菌的比較探討

黃少瓊

摘 要：目的：比較Baird-Parker平板計數法和MPN計數法檢測食品中金黃色葡萄球菌的結果，比較兩種實驗方法的優劣。方法：隨機采集90份食品作為實驗樣品，分為實驗組（食品25g+生理鹽水225ml+1ml金黃色葡萄球菌菌液）、陽性對照組（250ml生理鹽水+1ml金黃色葡萄球菌菌液）和樣品對照組（食品25g+1ml金黃色葡萄球菌菌液）各30份，應用Baird-Parker平板計數法和MPN計數法進行定量計數，統計金黃色葡萄球菌的陽性檢出結果。結果：相比之下，MPN計數法對于金黃色葡萄球菌的陽性檢出率（35.56%>12.22%）相對更高（P<0.05）。結論：在食品中金黃色葡萄球菌的實驗檢測中，MPN計數法顯然是更好的選擇，可以獲得更加準確的檢測結果，可作為食品質量安全評價的重要參考。

關鍵詞：食品；金黃色葡萄球菌；檢測；實驗方法

飲食是人們日常生活中的重要活動，是攝入營養和能量的主要途徑，維持人體健康活動。飲食安全則關系到人們的身體健康，與相關疾病的發生有著密切的聯系，應當引起足夠的重視。人們在飲食的過程中，食品受到金黃色葡萄球菌等大腸桿菌以及沙門氏菌多種致病菌的污染，則會增加食物中毒的風險，誘發食源性疾病。在食品生產加工的過程中，致病菌檢驗是十分重要的環節，對于各類致病菌有著嚴格的限量標準。在食品安全檢驗的，需要采用高效、靈敏、準確的實驗方法，其實驗結果能夠作為食品安全質量評價的重要參考依據[1]。本研究主要對食品中的金黃色葡萄球菌進行實驗檢測，比較不同實驗方法的檢測結果，現報告如下。

1材料與方法

1.1材料

實驗樣品：隨機采集90份食品作為實驗樣品，其中包括餅干18份、罐頭15份、膨化食品12份、肉制品18份、乳制品15份以及方便食品12份。培養基：由青島海博生物技術有限公司生產的Baird-Parker平板、瓊脂、凍干兔血漿、氯化鈉胰酪胨大豆肉湯管（10%），營養肉湯等。試劑：亞碲酸鉀卵黃增菌液（廣東環凱微生物科技有限公司）。菌株：金黃色葡萄球菌標準菌株（ATCC29213，南京便診生物科技有限公司）。應用以上樣品、培養基、試劑和菌株作為實驗材料，進行食品中金黃色葡萄球菌的實驗檢測。

1.2方法

1.2.1樣品制備

將實驗樣品分為三組：實驗組、陽性對照組和樣品對照組各30份。在實驗組的菌液制備的過程中，在瓊脂培養基上培養金黃色葡萄球菌，取新鮮培養物，與3ml營養肉湯混合，制成肉湯菌懸液，并在4℃的環境下保存。在實驗前進行稀釋，經過預試驗檢測后，選取所需的菌液濃度（10-5稀釋濃度）。在樣品制備的過程中，在無菌均質袋加入食品25g（液體樣品25ml）、生理鹽水225ml以及1ml金黃色葡萄球菌菌液（10-5濃度），獲得實驗樣品。

在陽性對照組的樣品制備中，將250ml生理鹽水與1ml金黃色葡萄球菌菌液（10-5濃度）混合。而在樣品對照組的樣品制備中，則是在無菌均質袋加入食品25g（液體樣品25ml）、生理鹽水225ml，均勻混合。

1.2.2定量檢測

取實驗組、陽性對照組和樣品對照組的樣品勻液1ml，接種于Baird-Parker平板之上，在37℃ 的條件下進行培養，48h后對菌落進行觀察，行革蘭氏染色。完成血漿凝固酶驗證后，對金黃色葡萄球菌進行計數，獲得計算結果。另外取樣液1ml，分別接種在3個氯化鈉胰酪胨大豆肉湯管（10%），在37℃ 的條件下進行培養，48h后各取一環培養物， 在Baird-Parker平板上培養 （37℃，48h），對菌落進行觀察，行革蘭氏染色。完成血漿凝固酶驗證后，采用MPN計數方法，對金黃色葡萄球菌進行計數，計算各組實驗樣品中金黃色葡萄球菌的陽性檢出結果。

1.3統計學處理

以SPSS19.0統計學軟件進行數據的處理和分析，應用（ ±s）和（%）進行計量和計數，由t值和χ2檢驗，P<0.05代表對比具有統計學意義。

2結果

根據Baird-Parker計數，在90份樣品中，檢出金黃色葡萄球菌陽性11份，陽性率為12.22%。而根據MPN計數，在90份樣品中，檢出金黃色葡萄球菌陽性32份，陽性率為35.56%，具體見于表1：

3討論

金黃色葡萄球菌屬于革蘭氏陽性菌，是一種常見的致病菌種。人體受到金黃色葡萄球菌的侵襲，容易引起呼吸道和肺部感染、胃腸道疾病以及全身感染性疾病，對患者的身體健康造成損害。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界，而飲食是該病菌侵襲人體的主要途徑。在人們的日常飲食中，由于食品中存在金黃色葡萄球菌，容易引發食物中毒，同時還會引起多種病癥。為了預防“ 病從口入”，需要加強對食品質量安全的檢查， 對于食品中存在的金黃色葡萄球菌有著嚴格的限量要求。在食品的生產加工環節，需要嚴格把控，并需要進行微生物檢驗，實施定量檢測方法，根據金黃色葡萄球菌的檢出結果，評價食品質量安全[2]。

在金黃色葡萄球菌的實驗檢測中，一般采用Baird-Parker平板計數法和MPN計數法。本組實驗結果顯示，在90份食品中金黃色葡萄球菌的定量檢測中，MPN計數法對于金黃色葡萄球菌的陽性檢出率為35.56%，顯著高于Baird-Parker平板計數法的12.22%，充分說明MPN計數法是比Baird-Parker平板計數法更好的實驗檢測方法。

在實驗檢測中應用Baird-Parker平板計數法，在Baird-Parker平板上接種培養，統計金黃色葡萄球菌數量。但是該實驗過程易受到其他菌種的干擾，導致檢出率的降低。在食品的微生物檢測中，金黃色葡萄球菌只是致病菌的一種，還大量存在著其他菌種，金黃色葡萄球菌在其中的含量不高，這在一定程度上影響到了Baird-Parker平板計數的準確性。而MPN計數法在實驗檢測中的應用，則是利用氯化鈉胰酪胨大豆肉湯進行增菌處理，然后在Baird-Parker平板上接種培養，能夠減少其他菌種的干擾，獲得準確的檢測結果，其對于金黃色葡萄球菌的陽性檢出率更高。另外，受到實驗樣品理化性質、細菌依附等因素的影響，MPN計數法的檢測結果也會受到一定的干擾和影響。為了提高食品中金黃色葡萄球菌檢測結果的準確性，可聯合應用Baird-Parker平板計數法和MPN計數法，充分發揮兩種實驗方法的優勢，滿足不同條件的下金黃色葡萄球菌定量檢測[3]。

綜上所述，Baird-Parker平板計數法、MPN計數法等不同實驗方法均可應用于食品中金黃色葡萄球菌的檢測，其中MPN計數法的應用效果更高，能夠準確檢出金黃色葡萄球菌的分布情況，便于采取有效的控制措施，為食品質量安全管理提供了重要支持。

參考文獻：

[1]胡金強，雷俊婷，白艷紅，等.食品中金黃色葡萄球菌PCR-ELISA檢測技術建立[J].食品工業科技，2016，37（20）：63-67.

[2]周莉，王永，王法云，朱海華，張立攀.食品中金黃色葡萄球菌概況及新型檢測技術研究進展[J].中國釀造，2016，35（02）：1-4.

[3]李荔枝，胡萍.快速檢測食品中金黃色葡萄球菌及其腸毒素型的研究進展[J].江西農業學報，2011，23（08）：144-146.