烏梅類楊梅四倍體種質(zhì)鑒定分析

張淑文 戚行江 梁森苗 鄭錫良 任海英

摘要?[目的]對烏梅類楊梅四倍體種質(zhì)進(jìn)行鑒定分析，為楊梅育種提供材料基礎(chǔ)。[方法] 通過染色體檢測、果實(shí)外觀、質(zhì)量和品質(zhì)等表型性狀的測定，對四倍體2008X4進(jìn)行鑒定。[結(jié)果]2008X4的染色體數(shù)目為32條，與‘荸薺種（16條）相比染色體數(shù)量加倍，為四倍體材料，且在單果質(zhì)量、縱徑、橫徑、可溶性固形物、總糖、葡萄糖、糖酸比、VC等果實(shí)質(zhì)量和品質(zhì)性狀上顯著高于‘荸薺種。[結(jié)論]該烏梅類四倍體材料可作為目標(biāo)優(yōu)株，也可為優(yōu)質(zhì)大果的倍性雜交育種提供親本選擇。

關(guān)鍵詞?楊梅;四倍體;種質(zhì);鑒定

中圖分類號?S667.6文獻(xiàn)標(biāo)識碼?A

文章編號?0517-6611（2019）22-0024-02

Abstract?[Objective] The identification and analysis of tetraploid germplasm of Myrica rubra?were carried out to provide material basis for breeding of Myrica rubra. [Method] The tetraploid 2008X4 was identified by chromosome test， fruit appearance， quality and other phenotypic characters. [Result] The number of chromosomes of 2008X4 was 32， which was double as that of ‘Biqizhong （16） which was a tetraploid material， and it was significantly higher than that of ‘Biqizhong in fruit quality and quality traits such as single fruit weight， lengthwise diameter， broadwise diameter， soluble solids， total sugar， glucose， sugar acid ratio， vitamin C. [Conclusion] The tetraploid material can be used as the target excellent plant， and lay the material foundation for the new variety selection of high quality， big fruit and the parent selection of hybrid breeding.

Key words?Myrica rubra;Tetraploid;Germplasm;Identification

楊梅（Myrica rubar Sieb.et Zucc.）是我國南方重要的經(jīng)濟(jì)作物，果實(shí)風(fēng)味獨(dú)特，并具有較高的藥用和保健價值[1-3]，因此，楊梅作為功能性水果越來越受到廣大消費(fèi)者的青睞，在水果中的地位也得到大幅提升。自然界中栽培楊梅常以二倍體的形式存在（2n=16），為小染色體物種。‘荸薺種為浙江地方良種，屬烏梅類品種，樹勢中庸、樹姿開張、枝梢較稀疏、葉色深綠，果實(shí)中等，果形略扁圓，在浙江地區(qū)廣為種植[4]。

2002年，筆者所在課題組對浙江種質(zhì)資源開展了深入調(diào)查，在浙江仙居括蒼水庫北岸發(fā)現(xiàn)‘荸薺種枝條變異，其果實(shí)、果核、葉片等明顯增大，葉片變厚，通過染色體檢測，確定其為‘荸薺種的四倍體突變材料;隨即將該枝條在蘭溪等地進(jìn)行嫁接觀察，經(jīng)二代營養(yǎng)系高接，進(jìn)行果實(shí)外觀、質(zhì)量和品質(zhì)等表型性狀的鑒定，確認(rèn)遺傳表現(xiàn)穩(wěn)定，2008年將其命名為2008X4，作為優(yōu)質(zhì)大果的備選品種。

1?材料與方法

1.1?試驗(yàn)材料

2016—2017年，于浙江仙居楊梅種植園中分別對‘荸薺種和2008X4進(jìn)行了果實(shí)取樣和品質(zhì)分析（圖1），2年的果實(shí)取自每個材料的相同單株，每年每單株重復(fù)取成熟期果實(shí)3次，每次1 kg，共3 kg。

1.2?試驗(yàn)方法

1.2.1?染色體檢測。

剪取‘荸薺種和2008X4的莖尖，利用下述方法進(jìn)行固定、染色體制片和鏡檢。于10：00—11：00剪取生長旺盛的莖尖，置于冰水混合物中處理10～12 h，卡諾氏 I 固定液（無水乙醇∶冰醋酸 = 3∶1，體積比）室溫下固定24 h以上備用。固定好的根尖用1%的纖維素酶和1%的果膠酶混合液37 ℃解離1～2 h。用于核型分析的染色體制片，直接用卡寶品紅壓片，顯微鏡下觀察、拍照，進(jìn)行染色體分析。

1.2.2?果實(shí)外觀性狀測定。

用電子天平稱10個不同果實(shí)，計算得到單果質(zhì)量（n=10，下同）;同樣，用電子天平每次稱量10顆果核，計算得到果核質(zhì)量;可食率=[（單果質(zhì)量-果核質(zhì)量）/單果質(zhì)量]×100%;用電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺測定其果實(shí)的橫徑和縱徑;果形指數(shù)=縱徑/橫徑;采用便攜式色差儀（CR-400，日本柯尼卡美能達(dá)公司）進(jìn)行色差測定，記錄明度（L*）、紅綠值（a*）和藍(lán)綠值（b*）;用TA-XTplus 質(zhì)構(gòu)儀測定果實(shí)硬度，探頭直徑5 mm，下壓速度1 mm/s，結(jié)果以N表示。

1.2.3?果實(shí)營養(yǎng)品質(zhì)性狀測定。

可溶性固形物參考GB 12295—1990標(biāo)準(zhǔn)[5]，采用阿貝折射儀法測定（n=3，下同）。可滴定酸參考GB/T 12456—2008標(biāo)準(zhǔn)[6]，用NaOH滴定法進(jìn)行測定;檸檬酸、蘋果酸和草酸含量參照胡靜等[7]的方法，利用離子色譜法進(jìn)行分離測定;總糖依據(jù)GB/T 5009.8—2009[8]，采用蒽酮比色法進(jìn)行測定;葡萄糖、蔗糖和果糖含量依據(jù)GB/T 18932.22—2003[9]進(jìn)行測定;糖酸比=可溶性固形物/可滴定酸;多酚含量參照孫勃等[10]的方法進(jìn)行測定;黃酮含量參照J(rèn)ia等[11]的方法進(jìn)行測定;VC含量參考Wang等[12]的方法進(jìn)行測定。

1.3?數(shù)據(jù)處理

采用Excel對2016和2017這2年相同指標(biāo)的多次重復(fù)數(shù)據(jù)進(jìn)行均值及標(biāo)準(zhǔn)差的計算，并完成表格的繪制。

2?結(jié)果與分析

2.1?染色體檢測結(jié)果

‘荸薺種染色體數(shù)目為16條（圖2A），2008X4為32條染色體（圖2B），確系染色體加倍為四

倍體材料。

2.2?果實(shí)質(zhì)量和外觀性狀的比較

由表1可知，2008X4的平均單果質(zhì)量為15.595 g，極顯著高于‘荸薺種的11.690 g;2008X4的縱徑為30.283 mm，極顯著高于‘荸薺種的縱徑（26.860 mm）;2008X4的橫徑為31.296 mm，極顯著高于‘荸薺種的橫徑（28.450 mm）;2008X4的果核質(zhì)量為0.955 g，極顯著高于‘荸薺種的0.690 g;2008X4的果實(shí)硬度顯著低于‘荸薺種。2個材料在果形指數(shù)、可食率、明度、紅綠值和黃藍(lán)值等性狀上無顯著差異。

2.3?果實(shí)糖酸和營養(yǎng)性狀的比較

由表2可知，2008X4的可溶性固形物含量為11.990%，顯著高于‘荸薺種的10.410%;2008X4的總糖含量為8.035%，顯著高于‘荸薺種的7.890%;2008X4的葡萄糖含量為1.590%，顯著高于‘荸薺種;2008X4的檸檬酸含量顯著低于‘荸薺種;2008X4的糖酸比為14.802，顯著高于‘荸薺種;2008X4的VC含量為73.707%，顯著高于‘荸薺種。

3?結(jié)論與討論

2008X4是楊梅上最早發(fā)現(xiàn)的四倍體種質(zhì)材料，也是首個選出的烏梅類四倍體優(yōu)株。經(jīng)過與‘荸薺種的比較鑒定發(fā)現(xiàn)，其單果質(zhì)量、縱徑、橫徑等果實(shí)質(zhì)量性狀極顯著高于‘荸薺種，可溶性固形物、總糖、葡萄糖、糖酸比、VC等品質(zhì)性狀顯著高于‘荸薺種，說明其本身可作為新品種加以培育，是極其珍貴的楊梅種質(zhì)資源，也可為優(yōu)質(zhì)大果、特別是深色大果型的倍性雜交育種提供親本選擇。

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