女性HPV感染及基因分型年齡分布的臨床調查

李瑞敏 宋文月 尹保娜 安 芳 褚艷蓉 張 莉

人類乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是宮頸癌及癌前病變的主要病因，預防和監(jiān)測HPV感染可有效防治宮頸癌。HPV感染率及亞型分布在不同人群、不同地域、年齡之間存在明顯的差異［1，2］。本研究通過對焦作市婦幼保健院18 336例婦科門診患者宮頸刷片標本進行HPV亞型檢測，分析HPV感染及基因分型年齡分布情況，為該地區(qū)宮頸癌篩查和防治工作提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1研究對象 2015年1月～2017年12月在焦作市婦幼保健院婦科門診就診并參加HPV分型檢測的女性患者18 336例，年齡15～89歲。分為5個年齡段：＜26、26～35、36～45、46～55和 ＞55歲。

1.2樣本采集 暴露宮頸，用棉簽擦去分泌物，用HPV采樣刷在宮頸口順時針方向旋轉5周，緩緩取出采集刷，將采樣刷放入取樣管中，-20℃保存，避免反復凍融，1周內檢測完畢。

1.3檢測方法 具體操作按照21種（HPV）分型檢測試劑盒（廣東凱普生物科技股份有限公司）說明進行病毒DNA提取、PCR擴增、雜交、顯色，診斷脫落細胞標本中的21種HPV病毒DNA分子的存在。

1.4統(tǒng)計方法 應用SPASS 19.0軟件，計數(shù)資料以%表示；采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1HPV亞型感染分布情況 對18 336例婦科門診患者進行HPV分型檢測，HPV43未被檢出，其余20種亞型均被檢出（見圖1）。HPV感染前3位的亞型為HPV16（5.2%）、HPV52（3.5%）和 HPV58（2.9%），均為高危亞型。

圖1 21種HPV亞型感染分布

2.2HPV感染率情況 18 336例的總感染率為22.3%（4084/18 336）。2015、2016、2017年感染率分別為 24.2%（1106/4571）、21.2%（1249/5891）、18.9% （1488/7874）；HPV感染率呈下降趨勢，三年比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；HPV感染前3位的亞型HPV16、HPV52、HPV58三年比較無下降趨勢（圖2）。

圖2 2015、2016、2017年度HPV感染率

2.3HPV感染年齡分布 總檢測樣本年齡段中：＜26歲組感染率最高（32.9%，250/779），其次為 ＞55歲段（27.0%，210/778），與其他3年齡段比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；5組年齡段感染率呈U型分布（圖3-A）。

HPV感染前3位的亞型 HPV16、HPV52、HPV58各年齡斷均呈U型分布，HPV16在各段中感染率均為最高（圖3-B）。

HPV感染患者中單純高危亞型、高+低危亞型、低危亞型感染率分別為18.4%、1.7%、2%，3組感染率在不同年齡段亦均呈現(xiàn)出U型趨勢分布，且在不同年齡段均以單純高危亞型感染為主（圖3-C）。

HPV感染患者中一、二、三重感染的感染率分別為16.8%、4.2%、0.5%。3組感染率在不同年齡段亦均呈現(xiàn)出U型趨勢分布，且在不同年齡段均以一重感染為主（圖3-D）。

圖3 HPV感染年齡分布

3 討論

目前，宮頸癌是女性最常見的生殖道惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，居全球第2位。1977年，著名學者zur Hausen就提出，HPV感染可能會導致宮頸癌。1995年，國際癌癥研究中心正式宣布宮頸HPV感染為宮頸癌發(fā)病的主要原因。2005年，宮頸HPV檢測被推薦為宮頸癌篩查方法。2014年，世界衛(wèi)生組織宣布HPV分型檢測是宮頸癌篩查的重要初篩手段。因此，研究HPV感染趨勢、亞型分布特征、區(qū)域流行情況，對于HPV疫苗研發(fā)、數(shù)據(jù)監(jiān)控及宮頸癌的防治具有重要的臨床指導意義。

根據(jù)HPV的致病性，HPV分為與惡性腫瘤有關的高危亞型和與良性病變有關的低危亞型。本研究采用的導流雜交技術可檢測出21種亞型，其中包括15種高危亞型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和 6種低危亞型（6、11、42、43、44、81/CP8304）。HPV感染亞型分布有一定區(qū)域性。全球范圍內最主要的基因型是HPV16型，第2位是HPV18型［3］，而本研究中HPV感染前3位的亞型依次為HPV16、52、58，與其有一定差異，但與我國相關文獻報道基本一致［4～6］，提示焦作地區(qū)可能與我國其他地區(qū)感染亞型基本一致，應以這三種亞型為主要預防對象。

本研究中門診患者總HPV感染率為22.3%，2015、2016、2017年HPV感染率分別為24.2%、21.2%、18.9%，呈明顯下降趨勢。其原因可能與政府不斷的進行宮頸癌知識宣傳教育和宮頸癌普查有關。但近三年HPV16、52、58三種高危亞型并無下降趨勢，進一步提示其為主要預防對象。

HPV感染率在不同年齡段存在差異，本研究中＜26歲段感染率最高（32.9%），隨著年齡的增加，感染率逐漸降低，46歲以后感染率開始回升，和國內外一些研究結果相一致［7，8］。女性26歲前是 HPV感染的高峰期，可能是由于年輕女性性生活比較頻繁，衛(wèi)生習慣和健康意識薄弱，宮頸炎發(fā)病率較高，宮頸上皮黏膜屏障遭到破壞后，病毒易入侵所致。但年輕女性的的HPV感染多為一過性感染，大多數(shù)患者經過一定時間通過自身免疫能將HPV病毒自然清除。女性55歲后是HPV感染的另一高峰期，可能是由于該年齡段女性自身免疫力下降易受病毒入侵、且對病毒清除能力下降所致［9］。這就提示年輕女性和老年女性是HPV感染的高發(fā)人群，宮頸癌篩查時要多給以關注。

不同亞型HPV感染對宮頸細胞惡性病變的發(fā)生、發(fā)展有不同的影響，高危型HPV感染常導致宮頸癌［10］。本研究中高危型檢測結果還顯示，門診患者中高危型HPV感染率（18.7%）明顯高于高危+低危型（1.4%）和低危亞型（2%）。在各個年齡段中，前三位的HPV感染亞型亦呈現(xiàn)出U型趨勢分布。其提示年輕女性是高危HPV感染的好發(fā)年齡段，這可能是導致近些年宮頸癌發(fā)病率升高、發(fā)病年齡提前且逐漸出現(xiàn)年輕化趨勢的原因。HPV感染有一重感染，亦有多重感染，多重感染因患者攜帶病毒量多，易發(fā)生癌變。本研究中雖然一重感染多，但多重感染亦呈現(xiàn)U型分布，因此年輕女性和老年女性癌變幾率較大。這也提示我們在宮頸癌篩查時要多關注年輕女性和老年女性。

綜上所述，本臨床調查顯示HPV感染以HPV16、52、58為主要亞型，在不同年齡組分布存在差異，在宮頸癌篩查中對年輕女性或老年女性的患者要多給予關注。