非洲豬瘟綜述(續2)

張軍杰 郭小勇 宋慶慶

摘? 要：歐洲、俄羅斯聯邦、中國和最近暴發非洲豬瘟的蒙古及越南已經更加意識到非洲豬瘟對全球的養豬業和食品安全造成了致命性的打擊。我們將在本綜述中闡述一下什么是非洲豬瘟？它會導致什么情況？非洲豬瘟如何傳播？以及非洲豬瘟當前全球流行情況;同時，我們還討論防控非洲豬瘟在家豬和野豬中傳播的方法以及疫苗的開發前景。

關鍵詞：非洲豬瘟;流行病學;疫苗;傳播

中圖分類號：S855.3 文獻標志碼：C 文章編號：1001-0769（2019）10-0013-03

6? 疫苗開發前景

20世紀50年代，Detray（1957）第一個報道了暴發非洲豬瘟后康復的豬能夠抵抗非洲豬瘟病毒相關毒株的攻擊。由于這些研究證明豬獲得了高水平的保護作用，所以非洲豬瘟病毒疫苗的開發前景被看好。然而，疫苗研究的進展緩慢，疫苗注冊允許在田間使用仍有很長的路要走。有證據表明非洲豬瘟病毒抗體在保護豬免受感染上起著一定的作用，Onisk等（1994）和Wardley等（1985）證明，從受保護的豬上被動獲得抗體的新生仔豬能夠得到部分的保護。CD8+細胞在產生保護作用上仍是必要的，因為CD8+細胞亞群的抗體介導耗竭能夠消除病毒的弱毒株誘發的保護作用。因此，有效的疫苗能夠誘導豬產生保護性的抗體和細胞免疫應答。最近，一個專家小組回顧了有效疫苗的開發前景，并且已經出版（Arias等，2017a）。

6.1 非洲豬瘟病毒滅活疫苗

非洲豬瘟病毒的復雜性是導致疫苗開發進程緩慢的重要原因。通常用于產生抗簡單病毒的病毒滅活苗還沒有取得成功（Blome等，2014;Stone和Hess，1967），因為滅活苗通過誘導產生能夠抑制病毒感染細胞的抗體發揮作用。這些中和抗體不能完全阻止非洲豬瘟病毒的感染，這很可能是由于非洲豬瘟病毒粒子有兩種感染方式——細胞內成熟和細胞外成熟。此外，Andres（2017）和Hernaez等（2016）證明，非洲豬瘟病毒進入巨噬細胞的機制有兩種，即網格蛋白介導的細胞凋亡和巨胞飲作用。這種多層病毒粒子含有80多種蛋白（Alejo等，2018），不同的蛋白質存在于細胞外包膜和細胞內成熟的感染性病毒粒子的表面，因此中和抗體必須作用于多種蛋白。早期的研究確定了病毒蛋白p72/B646L、p54/E183L和p30/CP204L作為中和抗體的作用目標。

6.2 弱毒活疫苗

King等（2011）、Leitao等（2001）、O'Donnell等（2017）和Reis等（2016，2017）報道，弱毒活疫苗能使高達100%的免疫豬產生保護作用，但疫苗的安全性，如由疫苗引發的不良反應以及疫苗株在田間持續傳染的能力，影響了非洲豬瘟病毒疫苗的這種開發策略。候選的弱毒活疫苗株已經在細胞培養基上通過傳代產生，或者通過對高致病性毒株的基因進行合理的敲除后產生。此外，Boinas等（2004）和Leitao等（2001）證明，非洲豬瘟病毒的低毒力分離株有可能會成為疫苗的候選株。

對非洲豬瘟病毒基因功能了解上取得的進展使疫苗研發人員確定了需要敲除的目標基因，以生成候選弱毒活疫苗株;這些展現出的希望包括I型干擾素反映的抑制因子，如MGF360和505/530或DP148R的成員。Lewis等（2000）已經成功地敲除了能夠直接促進病毒復制的其他基因，如B119L/9GL——可編碼病毒裝配所需氧化還原路徑中的一個蛋白。O'Donnell等（2017）報道，敲除能夠編碼某些功能未知的蛋白的基因（如DP96R/UK）已經能夠削弱非洲豬瘟病毒的毒力。從非洲豬瘟病毒弱毒株研究中獲得的教訓包括對不同毒株進行基因敲除不會總是產生相同的結果。

6.3 亞單位疫苗

敲除非洲豬瘟病毒的單個或一部分基因或蛋白后制成的疫苗最終可能比減毒活疫苗更安全。研究人員在一項研究中將重組蛋白p72/B646L、p54/E183L和p30/CP204L組合起來誘導產生了部分保護力，但在另一項研究中盡管誘導產生了中和抗體，但沒有產生保護作用。CD2v/EP402R重組蛋白的敲除也能誘導產生部分保護力。用CD2v/EP402R胞外結構域p30/CP204L基因和p54/E183L基因的融合以及泛素基因的DNA疫苗接種能夠產生部分保護，一部分非洲豬瘟病毒DNA片段與泛素基因融合也是這樣。DNA疫苗能夠誘導產生強烈的細胞毒性T細胞反應，但缺乏特異性的抗體反應。

在研究更有潛力的保護性抗原上，Jancovich等（2018）和Lokhandwala等（2017）使用不能復制的病毒載體，如腺病毒和痘病毒，已經將非洲豬瘟病毒的基因庫傳輸給豬。Jancovich等（2018）誘導產生了理想的抗體和細胞反應，同時對不同的免疫原性進行了排序。盡管這些結果很有應用前景，但還需要進行更多的研究來確定一個小的抗原池和一種可用于商業疫苗的生產方法。

7? 抗病毒藥和其他控制措施

7.1 抗病毒藥

在缺乏疫苗的情況下，非洲豬瘟防控應考慮采用替代性策略。利用小分子抗病毒藥來限制病毒復制從而防止另一種豬病（典型豬瘟）傳播的想法已經得到驗證。給感染非洲豬瘟病毒的豬服用抗病毒藥可以將血液中的病毒滴度降低1 000倍，使病毒血癥周期縮短74%，同時使病毒在感染豬傳染未治療的哨兵豬的比例減少85%。流行病學模型表明，在預防非洲豬瘟上，抗病毒藥能夠達到傳統控制策略（如撲殺或者緊急免疫）相同的效果。

非洲豬瘟病毒的復制需要大量的病毒特異性酶，包括RNA聚合酶和DNA聚合酶，對開發抗病毒藥而言，這是一個理想的具體目標。Frouco等（2017）、Galindo等（2011）和Hakobyan等（2018）證明，多種藥物能夠阻止非洲豬瘟病毒在細胞培養基上增殖。

7.2 其他控制策略

相關部門已經提出了控制非洲豬瘟流行的其他策略，如培育或選育能夠抵抗非洲豬瘟的豬種。但是，我們首先必須開發出一個能夠成功控制非洲豬瘟的策略以阻止非洲豬瘟病毒的復制。利用有組織的豬育種計劃，這種策略在某些情況下可能會取得成功，但在控制野豬疾病方面大概是無效的。

8? 進一步的研究

當前的非洲豬瘟控制策略很大程度上依賴于快速的檢測、隔離和撲殺，這種策略通常是無效的，且可能會造成豬被大量淘汰。替代性策略，如安全有效的疫苗，可能會提供一個額外的方法，幫助非洲豬瘟呈地方流行性的國家控制此病的暴發，同時對野豬和家豬進行非洲豬瘟病毒凈化。雖然研究人員已經獲得了有希望的候選疫苗株，但在田間應用前還需要進行更深入的研究。要開發下一代疫苗還需要完成一些基礎研究，這包括非洲豬瘟病毒是如何調控宿主的免疫反應以及病毒編碼蛋白在體內和體外逃避宿主免疫防御上的作用。這將使研究人員能夠開發出改良型弱毒活疫苗。

目前我們還需要更多有關免疫保護機制和相互關系以及能夠誘導動物產生該保護作用的病毒抗原的信息，這將有助于促進非洲豬瘟病毒亞單位疫苗的開發。有關病毒與豬巨噬細胞（包括參與入侵動物機體、病毒復制和形態變化的細胞蛋白和病毒蛋白）的基礎研究將有助于為病毒復制和疫苗生產開發改進型細胞系，并確定疫苗研發的新目標。

進一步理解非洲豬瘟病毒在家豬和野豬中傳播的機制將會有助于控制工作，因為人們可以采取多種措施切斷這些傳播途徑。最近，全球非洲豬瘟病毒研究聯盟已經就需要進行的研究發布了一份更完整的報告。

（續完）

原題名：African swine fever（英文）

原作者：L. K. Dixon、H. Sun和H. Roberts（英國）