王爽?王慧賓?吳磊?胡居吾
摘 要:金銀花是忍冬科忍冬屬類藥食兩用植物,其含有多種活性成分,以揮發油、有機酸、黃酮類、皂苷類等成分的研究較多。但長期以來,對金銀花中含量豐富的多糖成分的研究未有深入考察,本文對金銀花中的水溶性多糖的分子結構和理化性質進行了歸納總結。對金銀花多糖在抗菌、抗氧化活性等功能歸納總結其構效關系,揭示金銀花多糖在治療疾病和增強免疫功能方面的功效和開發潛力。
關鍵詞:金銀花;活性多糖;制備技術
天然來源的活性多糖具有抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗炎、降血糖等多種功能,在治療人體疾病和增強機體免疫功能方面具有其獨特的作用機理。近幾十年來,國內外對真菌類活性多糖的研究較為廣泛和深入,取得了顯著效果和功效優異的藥品和保健品。
金銀花,為忍冬科忍冬屬植物,具有抗炎、抗病毒、清熱解毒等功效。金銀花中的主要活性成分——綠原酸和木犀草苷的含量在《中國藥典》中有明確規定,是鑒定金銀花質量的重要參考標準。而活性多糖作為金銀花中的重要組分,目前還沒有得到過系統的結構和活性方面的分析。本文對近年來金銀花活性多糖的提取制備、結構、活性等研究進展進行概述。
一、金銀花多糖的提取和制備技術
張玉等進行了金銀花多糖的提取實驗,用氯仿/石油醚除脂,Sevag法除蛋白,以正交試驗法得到最佳提取條件為料液比1:30,提取3次,浸提時間2h,浸提溫度90℃,氯仿萃取次數3次,得到多糖得率為4.78%,多糖含量為78.10%。
楊凡等使用超聲波輔助法提取金銀花多糖,超聲2h對原料預處理后,得率達到16.8%。將超聲預處理與水提法相結合后,得率比直接水提法提高43.9%。
李爾春等使用離子交換纖維素柱色譜和凝膠柱色譜從金銀花多糖粗品中分離出三種組分,并用紅外光譜和氣相色譜方法得到了各種組分的單糖組成,單糖成分主要為葡萄糖、半乳糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、鼠李糖等。
鄧慶華等采用水溶醇沉法用正交實驗優化得到金銀花粗多糖,提取條件為溫度90℃,料液比1:10,浸提2次,浸提時間60min,得到粗多糖含量為24%。用氣相色譜法測定了金銀花粗多糖的單糖組成為鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等,并通過凝膠柱層析測定了其分子量分布在1萬到300萬之間。
劉光海等用Sevag法除蛋白6次,從1 kg金銀花中得粗多糖251.4g,精制后得39.4g。多糖含量由61.27%升至80.54%。
趙鵬等用響應面優化法對超聲時間、料液比、提取次數和溫度等因素對得率的影響進行考察,不但提高了得率,而且使提取時間縮短了2/3。
殷洪梅等比較了幾種金銀花粗多糖的脫蛋白方法,實驗表明Sevag-酶法結合脫蛋白效果最好。
二、金銀花多糖的結構和活性研究進展
鄧慶華等通過氣相色譜法測定了金銀花中提取的粗多糖樣品的單糖組成,并通過凝膠柱層析測定了其分子量分布。李爾春等從金銀花多糖粗品中分離出三種組分,并用紅外光譜和氣相色譜方法得到了各種組分的單糖組成。隨后進行了體外抗氧化和小鼠體內抗氧化活性實驗,結果表明金銀花粗多糖的抗氧化活性和使用的多糖濃度相關,可顯著提高小鼠血清和局部組織中某些過氧化物酶的活性。林雄平等利用圓形紙片法對金銀花和苦丁茶中提取的多糖進行抗菌實驗,發現兩種多糖對7種常見的食品腐敗菌具有不同程度的抗菌效果。殷洪梅等利用提取的金銀花多糖對小鼠的免疫調節能力影響進行測試,考察了遲發型超敏反應、血清溶血素值和免疫器官質量等三個因素。結果表明小鼠的免疫能力和多糖使用劑量相關。
三、研究水平和發展趨勢
綜合以上研究,對于金銀花多糖的研究現狀有以下幾點不足之處:1.還未有酸性和堿性多糖的提取及其活性考察報道;2.對金銀花多糖的活性考察大多僅限于粗多糖,這些粗多糖有的未除蛋白,有的未按照分子量進行分級,這種情況下進行的實驗,如單糖組成分析、活性考察等,得到的結果不精確,實驗重現性不好。因為粗多糖中的蛋白等雜質可能會造成干擾。金銀花多糖的分子量范圍較寬,未分級粗多糖則不能夠反映出哪一分子量范圍內具有較強的活性。3.對多糖的提取研究工作只片面追求了得率、脫蛋白效率等方面的提高,但這些提取因素對金銀花多糖的活性影響如何,大多未得到驗證。提取方法對多糖的結構和活性會有不同程度的影響,這在其他活性多糖的研究中已得到證實。
四、結語
綜上可見,國內目前對金銀花多糖的研究報道多側重于提取、純化方面的研究,對多糖的進一步分級純化、結構鑒定和功能活性的考察方面的工作還有待完善和系統研究,對金銀花多糖開展活性功能及構效關系的研究工作將有助于加深對金銀花藥材的認識和全面開發。
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基金項目:江西省重點研發計劃項目(20171BBF60065),江西省科研院所基礎設施配套項目(20161BBI90006),江西省科技計劃項目(20151BBF60024)。