中醫(yī)藥干預(yù)血漿同型半胱氨酸水平保護損傷血管內(nèi)皮細胞的研究進展

林 浩1，龐 延，唐梅玲1，余梅平1，黃舒培，盧健棋

同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是體內(nèi)甲硫氨酸脫甲基后產(chǎn)生的中間代謝產(chǎn)物，是一種可損傷血管內(nèi)皮細胞的含硫氨基酸[1]，體內(nèi)Hcy含量增加與冠狀動脈病變、心室重構(gòu)、腦卒中事件發(fā)生相關(guān)，Hcy含量增加可誘導內(nèi)皮細胞凋亡，導致內(nèi)皮細胞能障礙，對冠狀動脈造成一定損害，Hcy含量過高也是動脈粥樣硬化的一個獨立危險因素[2-3]。因此，如何降低血漿Hcy水平以保護血管內(nèi)皮細胞功能對防治心腦血管疾病具有重大意義。目前中醫(yī)藥干預(yù)血漿Hcy水平以保護血管內(nèi)皮細胞取得顯著進展，現(xiàn)綜述近年來相關(guān)研究進展。

1 血漿Hcy的現(xiàn)代研究

1.1 血漿Hcy來源和代謝途徑 Hcy是蛋氨酸循環(huán)過程中S-腺同型半胱氨酸水解反應(yīng)后的產(chǎn)物，在體內(nèi)主要有3條通路[3-4]：①再甲基化途徑，需要以維生素B12作為輔助因子和四氫葉酸還原酶(MTHFR)共同作用，通過再甲基化重新合成蛋氨酸；以甜菜堿為甲基供體，在甜菜堿-高半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶參與下合成蛋氨酸和二甲基甘氨酸。②轉(zhuǎn)硫途徑：是一個不可逆過程，Hcy在胱硫醚-β-合成酶(CBS)及輔酶維生素B6參與下，與絲氨酸合成胱硫醚，胱硫醚進一步斷裂成胱氨酸和α-酮丁酸。③極小部分Hcy在細胞內(nèi)形成后排出至血漿中并參與循環(huán)。

1.2 血漿Hcy致病機制 現(xiàn)有研究認為，血漿Hcy致病機制主要包括以下幾方面：①Hcy激活血管內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)使細胞一氧化氮(NO)釋放減少，引起血管舒張功能和抗炎能力受損。通過上調(diào)fos癌基因表達，誘導細胞增殖，促進細胞外和線粒體內(nèi)Ca2+釋放，促進平滑肌細胞增殖，從而導致血管管壁增厚，管腔變窄[5]。②Hcy通過抑制凝血酶影響蛋白表達和活性，使凝血酶滅活減少，并增加血小板黏附，激活部分凝血因子使機體處于血栓前狀態(tài)。③Hcy激活內(nèi)皮細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化應(yīng)激產(chǎn)生活性氧，加強低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)自身氧化，削弱高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、總膽固醇作用，促進動脈粥樣性硬化損傷[6]。④Hcy誘導促炎癥基因表達，促進炎性分子分化，同時降低抗炎基因表達，增加炎性巨噬細胞在動脈粥樣硬化病變積累，加速血管動脈粥樣硬化[7]。⑤Hcy抑制機體脂肪組織對胰島素敏感性，增加糖尿病患病風險[8]。血漿Hcy升高不僅與動脈粥樣硬化發(fā)生相關(guān)，并具有一定的致病性，同時補充維生素B12、維生素B6、葉酸等治療能有效降低血漿Hcy水平[4]。

2 中醫(yī)學對高血漿Hcy水平致病病因病機的認識

中醫(yī)學并無高Hcy血癥這個病名，但結(jié)合其生理病理，與中醫(yī)“胸痹、真心痛、眩暈、消渴病”等密切相關(guān)，根據(jù)其病因病機進行以下幾個方面探討。

2.1 先天稟賦論 先天是指人體受胎時胎元，中醫(yī)學認為腎為“先天之本”，內(nèi)藏先天之精氣，是人體生命之本源。《靈樞·刺節(jié)真邪》說：“真氣者，所受于天，與谷氣并而充身者也?！蹦I精充足，則真氣充盛，形體健壯，抗病力強；若腎精不足，則真氣虧虛，形體虛衰，易于為病。腎之精氣相當于現(xiàn)代醫(yī)學的遺傳物質(zhì)，同時高Hcy血癥與先天遺傳有關(guān)，MTHFR、CBS及甲硫氨酸合成酶基因突變或缺失可影響血漿Hcy代謝導致血漿Hcy水平升高[9]。《素問·上古天真論》闡述男女腎中精氣由盛到衰的演變過程，人體生命活動呈生老病死的規(guī)律變化，隨著年齡增長，人體生理發(fā)生改變。陳曉紅等[10]對10 400名健康體檢者進行血漿Hcy水平測定，發(fā)現(xiàn)血漿Hcy水平與年齡呈正相關(guān)；王永文等[11]研究發(fā)現(xiàn)男性血漿Hcy含量較高于同齡女性。

2.2 后天失養(yǎng) 《醫(yī)宗必讀》云：“一有此身，必資谷氣，谷入于胃，灑陳于六腑而氣至，和調(diào)于五臟而血生，而人資以為生者也”，故曰后天之本在脾。脾胃為氣血生化之源，精微物質(zhì)依靠飲食的攝入，脾氣的運化輸布作用，使機體氣血充盈，營衛(wèi)調(diào)和，陰陽相濟；若精微物質(zhì)不足，導致人體生理機能出現(xiàn)異常。B族維生素缺乏是導致血漿Hcy水平升高的又一個重要因素。李宗鋒等[12]對610例高脂血癥病人進行血清Hcy水平測定，與正常組比較，高脂血癥病人Hcy水平與維生素B12及葉酸水平呈負相關(guān)(r值分別為-0.571和-0.634，P<0.05)，與王蕾等[13]薈萃分析結(jié)果一致。故飲食水谷對維持機體平衡至關(guān)重要。

張景岳云：“煙草味辛氣溫，性微熱，升也，陽也”。酒性偏熱偏濕，嗜飲酒，易內(nèi)生濕熱，而胃土喜潤惡燥，得燥熱之邪，陰虧津傷，導致脾胃功能失調(diào)，機體生理發(fā)生改變。Mouhamed等[14-15]研究發(fā)現(xiàn)，長期吸煙、飲酒與血漿Hcy水平呈正相關(guān)。五味偏嗜，亦可破壞臟腑之間平衡關(guān)系，產(chǎn)生相應(yīng)的病理變化。高敏等[16]研究發(fā)現(xiàn)飲食以肉食、乳制品為主的蒙古族病人血清Hcy水平較漢族病人高。

2.3 高血漿Hcy致病與中醫(yī)證型的相關(guān)性 現(xiàn)代研究表明，高血漿Hcy水平促進平滑肌細胞增生，損傷血管內(nèi)皮細胞，促進動脈粥樣硬化，并影響凝血機制，促進血栓形成，導致血管狹窄、閉塞。“眩暈”“胸痹”“中風”等疾病的主要病機與氣血運化失常、痰濁血瘀密切相關(guān)。王恒和等[17]對220例冠心病病人進行中醫(yī)辨證分型并分析血漿Hcy水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)心血瘀阻型和痰阻心脈型病人血漿Hcy明顯高于其他證型(P<0.05)；韓培海等[18]發(fā)現(xiàn)171例急性腦梗死痰熱腑實型、氣虛血瘀型病人血漿Hcy水平明顯高于痰火阻絡(luò)型(P<0.05)；史亞楠等[19]將5 999例腦卒中高危人群(排除難以分組及結(jié)果差異較大的34例病人)分為高Hcy組與Hcy正常組(高Hcy組2 282例和Hcy正常組3 683例)，檢測發(fā)現(xiàn)影響血漿Hcy水平的中醫(yī)證候要素與痰濕最相關(guān)，高Hcy病人痰濕所占比例明顯。由此可見，高血漿Hcy水平致病的病機是脾腎虧虛為本，痰濁血瘀為標。

3 中醫(yī)藥干預(yù)血漿Hcy水平保護血管內(nèi)皮細胞相關(guān)研究

3.1 中藥或中藥提取物

3.1.1 川芎嗪 川芎嗪是從川芎根莖提取的一種屬酰胺類生物堿單體，許棟明等[20]通過體外建立Hcy損傷ECV304細胞模型，檢測影響血管內(nèi)皮舒張因子NO和一氧化氮合酶(NOS)變化，判斷細胞損傷程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鹽酸川芎嗪可升高損傷細胞NO和NOS水平，對Hcy損傷的ECV304細胞具有保護作用。

3.1.2 黃芪 余健等[21-22]研究發(fā)現(xiàn)黃芪中活性成分黃芪黃酮、人參皂苷Rg1同樣具有鹽酸川芎嗪對Hcy損傷血管的保護作用。

3.1.3 杜仲 松脂醇二葡萄糖苷(PDG)是從杜仲干燥莖皮中提取的活性成分，屬于雙環(huán)氧木質(zhì)素類。吳東兒等[23]研究發(fā)現(xiàn)PDG組細胞上清NO含量明顯上升，并與含量呈正相關(guān)，PDG組細胞表達明顯下降，微囊中Caveolin-1對內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)具有負向調(diào)控作用，從而穩(wěn)定細胞NO動態(tài)平衡，改善內(nèi)皮細胞功能。

3.1.4 白藜蘆醇 張麗等[24]研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對Hcy損傷細胞具有拮抗Caveolin-1mRNA和蛋白表達，同時提高eNOS表達，促進細胞釋放NO的作用；徐倩等[25]研究發(fā)現(xiàn)丹皮酚不僅可提高細胞NO水平，且發(fā)現(xiàn)Hcy模型組細胞活力最低(P<0.01)，隨著丹皮酚含量越大，細胞活力越高(P<0.05)。

3.1.5 大蒜素 常萍等[26]研究表明大蒜素能明顯降低高Hcy血癥大鼠血漿Hcy水平，且能升高大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低血清丙二醛(MDA)水平，對抗高Hcy血癥引起的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而對血管內(nèi)皮細胞發(fā)揮保護作用。

3.1.6 丹參酮 黃明宜等[27]使用不同含量丹參酮ⅡA藥物干預(yù)Hcy所致血管內(nèi)皮細胞損傷模型，并計算細胞凋亡率，結(jié)果顯示丹參酮ⅡA具有拮抗Hcy誘導的血管內(nèi)皮細胞凋亡，并降低GPP78基因表達水平，減緩血管內(nèi)皮細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所起的保護作用。

3.1.7 二苯乙烯苷(TSG) TSG是從何首烏提取的生物成分，李軍等[28]對TSG對Hcy誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞細胞間黏附分子-1(ICAM-1)、血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達的影響研究發(fā)現(xiàn)，TSG水平在10 μmol/L內(nèi)能抑制Hcy所致MCP-1、ICAM-1及VCAM-1 mRNA表達升高(P<0.05或P<0.01)，有效降低凋亡細胞比例。

3.1.8 紅景天苷 紅景天苷是傳統(tǒng)藏藥紅景天的成分，朱琳等[29]研究發(fā)現(xiàn)紅景天苷可減少人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷，同時減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(Bip和CHOP)和活化(PERK和IRE1α)。

3.1.9 姜黃素 有研究顯示，研究姜黃素Hcy硫內(nèi)酯(HTL)誘導融合內(nèi)皮細胞株(eahy926)損傷的保護作用及機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)姜黃素可明顯降低培養(yǎng)液乳酸脫氫酶(LDH)活性，提高培養(yǎng)液SOD含量，以降低MDA含量，且姜黃素可抑制HTL刺激的培養(yǎng)液腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平提高，使細胞中氧磷酶1(PON1)mRNA水平升高，降低TNF-α mRNA表達，表明姜黃素通過抗氧化、抑制信號轉(zhuǎn)導途徑作用，提高PON1水平拮抗HTL引起的血管病變。

3.2 中醫(yī)組方治療 有研究顯示，以化痰逐瘀為法，擬黃連溫膽湯加減治療37例H型高血壓病人，治療4周后檢測血清Hcy、NO、內(nèi)皮素(ET)及血管內(nèi)皮功能水平，結(jié)果與常規(guī)治療對照組比較，黃連溫膽湯治療組不僅能較好地控制血壓，同時降低血漿Hcy水平及升高NO水平，降低ET水平，從而改善血管內(nèi)皮功能(P<0.05)[31]。相關(guān)臨床研究發(fā)現(xiàn)，相較于常規(guī)藥物+葉酸，使用活血化瘀的血府逐瘀湯治療高血壓能有效降低Hcy水平(P<0.05)，且NO、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、SOD水平明顯增高(P<0.05)[32]。

張宏等[33]將280例穩(wěn)定型心絞痛合并高Hcy血癥病人隨機分為兩組(每組140例)，觀察組和治療組均給予相同常規(guī)藥物治療，治療組在常規(guī)藥物治療基礎(chǔ)上給予銀杏酮酯滴丸治療，治療30 d后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組降低Hcy水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，觀察組ICAM-1，VCAM-1表達和增高細胞NO水平低于對照組(P<0.05)。目前研究某些中成藥具有良好的臨床療效，王旭東等[34]在常規(guī)治療原發(fā)性反杓型高血壓基礎(chǔ)上加用麝香保心丸，發(fā)現(xiàn)觀察組病人血漿Hcy、纖維蛋白原及D-二聚體水平低于常規(guī)治療組，且血壓較對照組趨于杓型變化；陳燕銘等[35]研究通心絡(luò)對血漿Hcy損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及機制發(fā)現(xiàn)，通心絡(luò)組細胞活性較對照組高，且升高SODmRNA表達水平及降低MDA水平均具有良好的療效。

4 小 結(jié)

目前血漿Hcy致病機制尚不明確，但大量研究認為高血漿Hcy水平與心腦血管疾病的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)，可能與促進血管平滑肌細胞增殖、血管內(nèi)皮炎性反應(yīng)和影響凝血功能及脂質(zhì)代謝有關(guān)。

通過中醫(yī)藥干預(yù)血漿Hcy水平保護損傷血管內(nèi)皮細胞以減少心腦血管疾病的發(fā)生風險具有重要作用，且傳統(tǒng)中藥具有多靶點、毒副作用小、多種藥理作用及資源豐富等優(yōu)點，作為保護血管內(nèi)皮損傷研究的方法有廣闊的應(yīng)用前景，因此，發(fā)掘更多具有保護血管內(nèi)皮細胞作用的中藥及組方，并從多方面、多角度探討中醫(yī)醫(yī)藥的作用機制，分析有效含量范圍、起效時間及毒副作用，對干預(yù)血漿Hcy水平及保護血管內(nèi)皮損傷有重要的臨床意義并提供研究方向。