大型儀器操作類培訓的實踐與探索
——以流式細胞儀為例

劉艷青 沈鏈鏈* 管強東 鐘義紅 程 潔

（南京醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院 江蘇·南京 211166）

大型儀器在高等院校的人才培養(yǎng)、專業(yè)建設和學科發(fā)展中發(fā)揮了重要作用，技術與管理培訓對大型儀器使用效益的發(fā)揮具有絕對的促進作用。各高等院校和科研院所普遍意識到，在獲得國家投資的數(shù)量和連續(xù)性已經(jīng)基本得到保障的基礎上，如何加強大型儀器功能的應用、拓展和開發(fā),已是目前大型儀器管理工作中的當務之急。南京醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院科研共享平臺是一個院內(nèi)共享的儀器平臺，大型儀器專人專管，小型儀器自行刷卡使用。平臺現(xiàn)有包括流式細胞儀在內(nèi)的多臺大型儀器，學生制備好樣本后由儀器負責人上機檢測分析。雖然學生不用親自操作儀器，但學生對流式細胞術相關知識的掌握直接關系到樣本質量，最終決定實驗結果的好壞。流式細胞術因其靈敏度高、數(shù)據(jù)客觀，在生物醫(yī)學領域被廣泛應用，但根據(jù)我平臺以往的流式細胞術相關實驗來看，很多學生在實驗設計、制備樣本的過程中存在問題，到上機檢測時才發(fā)現(xiàn)沒有優(yōu)化實驗條件或犯了錯誤，導致實驗結果不滿意甚至實驗失敗。以往，我平臺定期請技術支持舉辦講座，主要以理論授課為主，但效果并不理想，主要表現(xiàn)為參與人數(shù)不多，培訓結束后的調查問卷顯示滿意度不高等。因此，本次在充分了解學生需求的基礎上，舉辦了操作培訓，由技術支持全程演示樣本制備、上機檢測、數(shù)據(jù)分析的過程，取得了較滿意的效果。

根據(jù)以往理論培訓現(xiàn)場的情況以及結束后的調查問卷反饋，前期的理論培訓存在以下問題：

（1）理論培訓相對枯燥。理論類的培訓相對比較枯燥、乏味，如介紹儀器原理等不結合儀器本身講解，學生很難有興趣聽講并完全理解。學生在聽講過程中容易走神，現(xiàn)場提問、討論等參與度不高，氣氛不佳。

（2）培訓的主題內(nèi)容太寬泛。由于培訓的主題內(nèi)容太寬泛，如“流式細胞儀的原理及應用”這樣的主題并不能吸引足夠多的學生來到現(xiàn)場。另外，在培訓的過程中，有的學生只聽了部分內(nèi)容，就認定所講內(nèi)容與自己的科研不相關，提前離場。

（3）某些知識點不能用理論知識很好地講解。某些知識點需要用樣本上機，結合操作能更加直觀地理解，而理論類的培訓對初學者來說很難完全接受，如流式細胞術的“調補償”等概念，即使經(jīng)過理論培訓后對相關知識有所了解，也并非完全懂得“調補償”的概念以及正確準備樣本管用于調補償。

（4）重點內(nèi)容不能引起足夠的重視。

如，多色實驗的配色方案在流式細胞術中尤其重要，若配色不合理，可能造成結果不滿意甚至實驗失敗。而單純的理論講解并不能引起學生足夠的重視，在后續(xù)的實驗中依然隨意配色，影響實驗結果。

因此，本次提前運用調查問卷，了解到大多數(shù)學生對流式細胞術很感興趣并且未來可能用到流式細胞術，但對于多色實驗如何配色，如何處理血樣（或組織樣本），如何進行胞內(nèi)染色、為何以及如何調補償，如何分析實驗數(shù)據(jù)等問題有疑問且有強烈的學習欲望。

為了滿足學生的上述需求，擬定了本次操作培訓的基本方案：演示一個完整的實驗（調節(jié)性T細胞流式檢測），采用小鼠血液為樣本，經(jīng)過裂解紅細胞、表面染色，固定破膜，胞內(nèi)染色，上機檢測，數(shù)據(jù)分析等完整的實驗步驟，讓學生對流式細胞術的應用有完整、清晰的了解。并且為了直觀地演示流式多色實驗的配色方案的重要性，本次培訓設計了兩種配色方案（相對較好、相對較差的配色方案）。設計培訓滿意度調查問卷，培訓結束后讓學生填寫問卷。

培訓當天來到現(xiàn)場的學生比以往的理論培訓人數(shù)多。技術支持詳細演示、講解了全部步驟，并且由于有些步驟等待時間比較長，在等待的時間解釋了原理及注意事項，并回答了同學的提問，現(xiàn)場氣氛異常熱烈。不同配色方案的樣本用流式細胞儀上機檢測后發(fā)現(xiàn)，較好的方案比較差的方案獲得了更漂亮的結果。對于剛接觸流式細胞術的同學來說，對于流式細胞術的難點，有了明確的認識，而不會像純理論培訓那樣聽得一知半解。培訓結束后的調查問卷顯示：幾乎所有學生對本次培訓都非常滿意，能完全聽懂培訓的內(nèi)容，對流式細胞術的基本原理、應用及為何、如何調補償?shù)戎R點有了清晰的認識。

流式細胞儀屬于科研儀器中較貴的儀器，大多數(shù)高校或研究單位都實行專人專管的制度。但為了保證樣本質量，對學生進行相關的培訓也很重要。現(xiàn)總結本次培訓的經(jīng)驗如下：

（1）培訓前充分了解學生的需求。以往的理論培訓結束后的調查問卷顯示：學生對相關知識有學習的需求，包括流式細胞儀的原理是什么，有哪些應用，樣本該如何制備等等，但是純理論的培訓并不能形象、直觀地讓學生聽明白所有知識點。因此綜合學生的意見和建議，本次培訓設計了一次操作培訓，完整地演示所有步驟，在樣本制備階段的等待間隙講解關鍵步驟的原理、注意事項，在上機前講解儀器的工作原理以及注意事項等，在上機檢測時講解調補償，數(shù)據(jù)分析等，讓學生學習相關知識更加形象、具體。

（2）采用經(jīng)典實驗進行演示。演示所用的經(jīng)典實驗涉及了流式多色實驗的關鍵步驟（如裂解紅細胞，標記抗體，固定破膜，調補償?shù)龋@些關鍵步驟有許多注意事項，若處理不好，直接影響實驗結果。這些知識的掌握對開展多色實驗至關重要，因此深受學生好評。

（3）兩種配色方案演示不同配色方案對實驗結果的影響。以往的理論培訓曾多次強調，多色實驗的配色方案至關重要，搭配不合理直接影響實驗結果，但依然不能引起學生足夠的重視。因此本次為同一實驗設計了兩種配色方案，上機檢測后看到了兩種配色方案的結果的差異，讓學生自覺地、直觀地得出“配色很重要”這樣的觀念，比理論培訓反復強調的效果好得多。

（4）由學生親自上機操作。由技術支持演示樣本上機檢測、數(shù)據(jù)分析后，在儀器負責人及技術支持的指導下，現(xiàn)場邀請了幾名有興趣的學生親自上機，讓他們了解儀器如何進樣，如何“設門”，如何“調補償”，如何分析數(shù)據(jù)等，取得了很好的效果。

（5）現(xiàn)場氣氛輕松、活躍。以往的理論培訓，均在會議室或教室舉行，講解者站在講臺，參與者坐在座位，反倒形成了嚴肅的氣氛，不利于大家提問、討論。本次操作培訓由于現(xiàn)場制作樣本，需要用到儀器、設備等，所以在實驗室完成。雖然在實驗室進行培訓有各種缺陷，但從培訓效果來看，大家積極提問、交流，甚至主動上前近距離觀看操作，反而營造了很好的氛圍。

總的來說，本次培訓取得了令人滿意的結果，學生反饋很好，在以后的工作中，可以借鑒本次的經(jīng)驗繼續(xù)開展此類的培訓工作。當然，本次培訓也有有待提高的地方，在日后的工作中有待改進。例如，有一名學生在調查問卷反映：如能將所有學生分組（以三、四個人為一組），各組之間的實驗內(nèi)容不完全一樣（例如A組完成配色方案一，B組完成配色方案二，或者A組完成血液樣本的制備，B組完成組織樣本的制備，等），在技術支持的指導下完成樣本制備并上機檢測，最后各組派一名代表對本組的實驗進行總結、討論心得體會等，效果會更好。

高校的儀器平臺是比較特殊的部門，一般都不直接參與教學，但作為大型儀器的負責人，不僅要提高自身的實驗技能，也要想盡辦法提高學生對相關知識的了解程度，盡量讓學生做實驗時避免走彎路，造成時間、財力的浪費。因此，在平時工作中，應當想方設法提高研究生的綜合素質，利用現(xiàn)代大型精密儀器來提高科研水平，切實提高儀器平臺的科研產(chǎn)出率，為我國科研事業(yè)做出最大的貢獻。