冰凍切片與石蠟切片診斷甲狀腺疾病的臨床價值研究

王洋 王翠芳

甲狀腺疾病為常見內分泌系統疾病的一種,其發病率近年來不斷增加,為了及時對甲狀腺疾病進行確診,必須合理采用診斷方式［1,2］。甲狀腺疾病不具有特異性的臨床表現,采用影像學檢查時難以進行準確的診斷,因此甲狀腺結節性病變還需要通過手術進行檢查。甲狀腺疾病診斷常采用冰凍切片與石蠟切片兩種方式,石蠟切片是甲狀腺疾病診斷的最終方法,但是其耗時過長,不利于早期診斷；冰凍切片能幫助醫師獲取及時且正確的診斷,這為選擇合適的手術方案帶來極大的助力。但是由于取材有限、時間短,冰凍切片的質量時常不如石蠟切片,部分難以明確診斷而造成假陰性、延遲診斷等。本次研究主要對甲狀腺疾病的冰凍切片與石蠟切片的診斷結果進行研究,探討兩種診斷方式對甲狀腺疾病的診斷價值,提出相應措施以提高診斷結果的準確性,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017年6月～2019年6月本院收治的60例甲狀腺疾病患者的臨床資料,患者均進行甲狀腺疾病手術,其中男11例、女49例；年齡19～78歲,平均年齡(35.655.31)歲；其中良性病變45例(良性甲狀腺腫瘤16例、甲狀腺疾病29例)、惡性病變15例(包括甲狀腺乳頭狀癌9例、甲狀腺濾泡狀癌5例、甲狀腺髓樣癌1例)。

1.2 方法 術中觀察甲狀腺及周圍病變組織,術中送檢新鮮組織,醫師根據需要選材,恒溫冰凍切片機制片。完整擺放切取的病變組織,-20℃恒溫下冰凍,滴入包埋劑后冰凍,冰凍切片機制成5 μm的切片,酒精快速固定液固定25 s后常規水洗、快速蘇木精-伊紅染色法(HE)染色、脫水、透明、固封,醫師鏡下進行診斷［3,4］。

冰凍制片剩余的組織以及取材后剩余組織進行常規涂蠟切片作為對照,10%甲醛固定液固定,乙醇脫水后配置浸漬液,將組織放置于浸漬液中,石蠟包埋,切片機制成5 μm切片,脫蠟、染色,光學鏡檢。

1.3 觀察指標 觀察比較兩種診斷方法的診斷時間及診斷結果(誤診率、延遲診斷率以及檢出率)。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件對數據進行處理。計量資料以均數±標準差()表示,采用t檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種診斷方法診斷時間比較 冰凍切片的診斷時間為(27.34±3.36)min,短于石蠟切片的(2461.64±611.65)min,差異具有統計學意義(t=30.828,P<0.05)。

2.2 兩種診斷方法的診斷結果比較 冰凍切片檢查中誤診1例、延遲診斷3例；石蠟切片無漏診,無延遲診斷；兩種方法的誤診率、延遲診斷率比較差異均無統計學意義(P>0.05)。冰凍切片檢出良性病變45例(包括良性甲狀腺腫瘤16例、甲狀腺疾病29例),惡性病變14例(包括甲狀腺乳頭狀8例、甲狀腺濾泡狀癌5例、甲狀腺髓樣癌1例)；石蠟切片檢出良性病變45例(良性甲狀腺腫瘤16例、甲狀腺疾病29例)、惡性病變15例(包括甲狀腺乳頭狀癌8例、甲狀腺濾泡狀癌5例、甲狀腺髓樣癌1例)；兩種方法的檢出率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩種診斷方法的診斷結果比較 ［n(%),n=60］

3 討論

作為人體重要的內分泌器官,甲狀腺是無法被其他組織、器官所替代的。甲狀腺疾病的致病因素較多,常見因素包括自身免疫性疾病、電離輻射、碘攝取異常以及遺傳因素等,其發病機制也較為復雜。手術治療是甲狀腺疾病的常用治療方式,當前尚缺乏準確且有效的術前診斷方法,因此術中選取合適的診斷方式幫助改善患者的預后。石蠟切片是診斷甲狀腺疾病的最終確診方式,其診斷結果可靠,但是由于制作復雜的緣故造成診斷時間較長,難以進行快速診斷。甲狀腺手術過程中,冰凍切片在低溫條件下對組織進行快速冷卻,硬度足夠即切片觀察,作為診斷的方式,其具有制作簡便、快捷的優勢,通常而言可以在30 min內得到診斷結果,這能幫助術者明確甲狀腺性質與部位,能幫助指導手術方式、范圍等,有助于確保手術治療效果［5］。

本次研究結果顯示：冰凍切片的診斷時間為(27.34±3.36)min,短于石蠟切片的(2461.64±611.65)min,差異具有統計學意義(t=30.828,P<0.05)。冰凍切片檢查中誤診1例、延遲診斷3例；石蠟切片無漏診,無延遲診斷；兩種方法的誤診率、延遲診斷率比較差異均無統計學意義(P>0.05)。冰凍切片檢出良性病變45例(包括良性甲狀腺腫瘤16例、甲狀腺疾病29例),惡性病變14例(包括甲狀腺乳頭狀8例、甲狀腺濾泡狀癌5例、甲狀腺髓樣癌1例)；石蠟切片檢出良性病變45例(良性甲狀腺腫瘤16例、甲狀腺疾病29例)、惡性病變15例(包括甲狀腺乳頭狀癌8例、甲狀腺濾泡狀癌5例、甲狀腺髓樣癌1例)；兩種方法的檢出率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。從本次研究的結果上看來,冰凍切片與石蠟切片進行診斷的結果基本一致,但是冰凍切片的診斷時間明顯更短。本次研究中,冰凍切片誤診的為甲狀腺惡性腫瘤,其發生原因較多,包括取材不當、制片質量差、取材時未能包含包膜、送檢腫瘤的包膜不完整以及未能全面認識乳頭狀腺癌形態的多樣性等。

甲狀腺冰凍切片對甲狀腺疾病的確診價值較高,但是其存在一定誤診的可能。作者認為,進行冰凍切片檢查時,為了提高診斷的正確性,應從以下方面著手。①提高巨檢與取材質量,正確進行診斷的前提是仔細觀察,因此應對標本作多個剖面,剖面不夠將造成漏診風險增加。甲狀腺乳頭狀微癌的直徑≤1 cm,因此應進行縱行剖切,每間隔0.2 cm作一個剖面,觀察是否有腫大淋巴結、向外浸潤性生長淋巴結、是否有刀割時砂粒感或質堅的小結節,觀察是否有脆弱壞死區及灰黃色或灰白色區,觀察是否成乳頭狀、魚肉狀,觀察瘤體包膜完整性以及是否有結節等,對此類性狀特殊的區域均應切取制片,當有包膜時,應同時切取包膜；對鈣化組織應進行脫鈣制片,從而提高發現率［6］。②提高制片質量,冰凍切片診斷時應確保切片質量優良,要求染色清晰、厚薄均勻、切片完整,避免折皺、冰晶、空泡的發生,當切片質量不佳時應進行重新切片。③提高鏡檢能力：a.甲狀腺濾泡癌不具有完整的包膜,其具有侵襲性生長的特點,因此診斷時難度較低,但是當病灶有包膜時,此時診斷較難；轉移、血管侵犯以及包膜侵犯都是對其進行診斷的重要依據,但是冰凍切片難以觀察血管受累,鏡下仔細尋找包膜侵犯的依據,主要是包膜纖維組織被瘤組織楔形斜行切斷。多數情況下的甲狀腺濾泡性癌有較多核分裂相,細胞異質性,濾泡不規則或濾泡小,濾泡腔無膠質或少膠,但是胚胎性腺瘤或不典型腺瘤也可能有上述表現,應注意鑒別區分；腫瘤的密度較低且呈現出濾泡性增長時,多為良性腫瘤,當腫瘤密度較高且實體狀生長時則多為惡性,當無法對濾泡性腫瘤的良惡性進行判斷時,此時應通過石蠟切片進行診斷,沒有把握時,切勿做出勉強的肯定診斷［7,8］。b.提高對乳頭狀癌形態特征的識別與鑒別能力,甲狀腺乳頭狀癌是臨床較為常見的惡性腫瘤,當甲狀腺乳頭狀癌表現典型時,不難進行診斷,但是常伴有或多或少的濾泡成分,同時難以通過冰凍切片判斷乳頭軸心小血管,這使得診斷難度較大。作者的體會如下：切面不同,冰凍切片中的乳頭狀結構也會呈現出多種形態,常見絨毛狀、腦回狀、車軌狀、花瓣狀以及樹枝狀,此類結構都是較為典型的結構；高倍鏡下觀察乳頭狀癌細胞核的特征性改變,并非所有冰凍切片都有毛玻璃樣核改變,但冰凍切片觀察可見核溝、核重疊、核內假包涵體,核內假包涵體的顏色為淡紅色,形狀圓形,空泡為白色；當發現砂粒體-嗜堿性同心圓層狀結構時,此時支持惡性腫瘤的診斷,因為甲狀腺良性病變幾乎無砂粒體結構；但是應注意將砂粒體結構與一般鈣化、濃縮凝固膠狀物進行區別,除此之外,甲狀腺癌病例多具有廣泛纖維化這一特征,有時可以發現輪廓分明的帶狀結構貫穿腫瘤；鈣化病變必須進行脫鈣處理后進行石蠟切片,同時及時告知臨床醫師；注意區分特殊乳頭狀癌,彌漫硬化型乳頭狀癌有淋巴細胞浸潤、鱗狀上皮化生以及致密纖維化,應注意與橋本甲狀腺炎進行區分,前者的實性巢廣泛,砂粒體豐富,對鑒別診斷有利；濾泡型乳頭狀癌完全或主要由濾泡組成,其砂粒體、纖維性小梁生成、浸潤生長方式有利于進行鑒別診斷；結節性甲狀腺腫或甲狀腺腺瘤也有乳頭狀結構,二者與甲狀腺癌進行區別時,其乳頭分枝少,乳頭粗鈍,乳頭內部無纖維血管性軸心,常見繼發性濾泡結構。

綜上所述,甲狀腺疾病術中冰凍切片診斷有助于在短時間內明確診斷結果,對術中治療有利,該方法存在一定誤診的可能,應正確取材,提高制片質量,提高對甲狀腺乳頭的識別、鑒別能力,從而減少誤診。