濟南地區自然人群幽門螺桿菌感染情況及其免疫分型研究

韓玉剛,崔云朋,李 靜,田偉田,曲輝臨△

1.山東電力中心醫院檢驗科，山東濟南 250001；2.山東省職業衛生與職業病防治研究院，山東濟南 250002

幽門螺桿菌(Hp)是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的革蘭氏陰性桿菌[1]。Hp定居于人胃黏膜上皮，感染率在發達國家可達50%，發展中國家甚至更高，是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關性淋巴組織淋巴瘤以及胃腺癌等疾病發病機制中的重要因素[2]。1994年，國際癌癥研究署將Hp感染定為Ⅰ類致癌原[3]。為了解濟南地區Hp感染情況，本研究采用免疫印跡法對2 557例于山東電力中心醫院進行健康體檢的濟南地區居民進行Hp免疫分型檢測，以明確不同年齡、性別自然人群的Hp感染率及其表型的分布特征。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1-12月于山東電力中心醫院接受健康體檢者2 557例為研究對象，其中男1 775例，女782例；年齡19～91歲，平均(49±13)歲。所有受檢者根據年齡分為5組，其中<30歲組187例、30～<40歲組487例、40～<50歲組759例、50～<60歲組625例、≥60歲組499例。

1.2儀器與試劑 Hp抗體分型檢測試劑盒(免疫印跡法)由深圳伯勞特生物制品有限公司提供。

1.3方法 受檢者采集靜脈血3 mL，分離血清，采用免疫印跡法進行檢測，操作過程嚴格按照說明書要求。將試劑盒從冰箱取出室溫平衡10～15 min，在放有印跡膜的反應槽中加入應用液和待檢血清，置搖床上室溫搖動30 min，棄去反應槽液體，加入洗滌應用液反復洗滌3次，加入酶聯試劑后室溫搖動30 min，棄去反應槽液體，加入洗滌應用液反復洗滌3次，加入顯色劑置搖床上室溫搖動5 min，顯色；待陽性帶顯色清晰，蒸餾水沖洗3次終止反應，將印跡膜上的顯色區帶與試劑盒提供的標準區帶進行比較，檢測細胞毒素相關蛋白[CagA-116 000(116 000為相對分子質量，其他抗體類同)]、空泡毒素A(VacA-95 000和VacA-91 000)、尿素酶A(UreA-30 000)和尿素酶B(UreB-66 000)水平。相關抗體顯色程度低于質控帶判斷為陰性，反之則為陽性。

分型判斷標準，(1)Hp Ⅰ型：僅CagA、VacA任意一種或兩種抗體同時陽性；(2)Hp Ⅱ 型：僅UreA和UreB任意一種或兩種抗體同時陽性，而CagA、VacA抗體為陰性；(3)Hp陰性：CagA、VacA、UreA和UreB抗體均為陰性[4]。

1.4統計學處理 采用SPSS17.0軟件進行數據分析。計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1不同性別受檢者Hp感染情況 男、女Hp總感染率分別為56.4%和59.6%，差異無統計學意義(P>0.05)；男、女Hp Ⅰ型感染率分別為33.5%和35.8%，Hp Ⅱ型感染率分別為56.1%和59.2%，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2不同年齡受檢者Hp感染情況 Hp總感染率為57.4%，其中Hp Ⅰ型感染率為34.2%，Hp Ⅱ型為57.0%。感染率最高為50～<60歲組，為61.1%，其中Hp Ⅰ型為35.8%，Hp Ⅱ型為61.0%；<30歲組Hp感染率為48.1%，其中Hp Ⅰ型為30.5%，Hp Ⅱ型為47.1%，為感染率最低組。Hp Ⅰ型感染率在各年齡組間比較，差異無統計學意義(P>0.05)。40～<50和50～<60歲組的Hp總感染率和Hp Ⅱ型感染率與<30歲組比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3不同年齡組Hp免疫分型陽性率比較 同一年齡組中，均以UreA-30 000抗體陽性率最高，各年齡組分別為96.7%、97.0%、98.5%、99.0%、96.1%；以VacA-91 000抗體陽性率最低，各組分別為43.3%、47.3%、46.2%、40.8%、43.1%。同一年齡組中，其他各型抗體陽性率與UreA-30 000陽性率比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；而不同年齡組同一免疫分型的陽性率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表1 不同性別受檢者Hp感染情況[n(%)]

注：Hp Ⅰ型陽性和Hp Ⅱ型陽性者中包括二者均為陽性者。

表2 不同年齡組受檢者Hp感染情況[n(%)]

注：Hp Ⅰ型陽性和Hp Ⅱ型陽性者中包括二者均為陽性者；與<30歲組比較，*P<0.05。

表3 不同年齡組Hp免疫分型陽性率比較[n(%)]

注：與同一年齡組UreA-30 000比較，*P<0.05。

3 討 論

Hp是一種微需氧革蘭陰性菌，與慢性胃炎、消化性潰瘍及胃癌的發生密切相關[2-4]，我國Hp感染率較高，但各地報道的感染率不同，引起的病變程度也不同。部分患者感染后僅表現為胃炎或無明顯胃部病變，而部分患者可表現為消化性潰瘍甚至胃癌[5-7]。究其原因，除了患者個體差異、胃黏膜損傷等因素外，Hp的不同毒力因子在Hp的致病性中也發揮著重要作用[8]。

Hp有多種毒力因子，目前研究最多，且與嚴重胃部疾病相關的兩種毒力因子為CagA和VacA。CagA是Hp Cag致病島上CagA基因的編碼產物，是一種致癌蛋白，也是Hp感染導致宿主產生炎性反應的重要效應蛋白，可誘導上皮細胞產生IL-8、激活NF-κB信號通路、重塑細胞骨架及參與細胞基座的形成，通過細胞信號轉導引起胃黏膜上皮細胞增殖及萎縮，與消化性潰瘍和胃癌的發生密切相關[7-8]。VacA是除CagA外被廣泛研究的毒力因子，其可通過誘導胃黏膜上皮細胞空泡化、引起線粒體釋放細胞色素C導致細胞凋亡、引發促炎性反應并結合細胞膜受體等多種作用，導致定植部位胃黏膜上皮細胞損傷[7]。Hp尿素酶作為Hp的定植因子和毒力因子，在Hp感染過程中起發揮著特殊作用。尿素酶不僅存在于Hp的細胞質中，還是Hp主要的細胞膜表面蛋白，在Hp血清學檢測中是主要的標志性抗原之一，Hp尿素酶由多個亞單位構成，其中UreA-30 000和UreB-66 000能使機體產生較強烈的免疫應答，并生成相應的抗體[9]。

目前Hp按是否表達CagA和VacA分為兩型：Ⅰ型為致病性較強的產細胞毒素菌株[CagA和(或)VacA陽性]；Ⅱ型為毒性較弱的不產細胞毒素菌株(CagA和VacA陰性)，這類菌株感染后一般只引起慢性淺表性胃炎或無臨床表現。Hp感染后特異性地定植于胃上皮細胞并在局部增殖，刺激機體產生炎性反應及免疫反應，產生可檢測的全身性抗體，且具有其特異性，如CagA與相對分子質量為128 000和116 000的免疫區帶相關，而VacA則對應相對分子質量為95 000和91 000的區帶。因此通過免疫印跡法對Hp進行免疫分型檢測，有助于判定感染Hp的不同致病類型，對Hp感染患者的跟蹤與治療有重要意義。

國內外研究表明，Hp感染與社會經濟、衛生狀況等密切相關，Hp的感染率在發達國家為30%～50%，我國自然人群Hp感染率在50%以上，且經濟條件落后、衛生條件差的地區感染率更高[9]。Hp的檢測方法包括組織學檢測、快速尿素酶檢測、核素標記的尿素呼氣試驗、免疫印跡法及分子生物學檢測等方法，其中免疫印跡法具有簡便、快捷、重復性好的優點，尤其適合于大規模的體檢及流行病學調查。本研究對濟南地區2 557例于山東電力中心醫院進行健康體檢的自然人群進行了Hp及其免疫分型檢測，結果顯示Hp總感染率為57.4%，男、女分別為56.4%和59.6%；其中Hp Ⅰ型為34.2%，Hp Ⅱ型為57.0%。本研究Hp Ⅰ型感染率與國內其他地區報道相近，而總感染率和Hp Ⅱ型感染率高于國內平均水平[7,10]，因此推測本地區總檢出率的增高主要是由于Hp Ⅱ型的高感染率引起。進一步分析發現，Hp Ⅱ型UreA抗體檢出率明顯高于UreB抗體，因此本地區高檢出率的UreA抗體決定了Hp的高感染率。

本研究不同年齡組Hp感染率存在差異，其中感染率最低為<30歲組，Hp總感染率為48.1%，Hp Ⅰ型為30.5%，Hp Ⅱ型為47.1%；而感染率最高為50～<60歲組，Hp感染率為61.1%，Hp Ⅰ型為35.8%，Hp Ⅱ型為61.0%；比較不同年齡組的Hp感染率發現，Hp總感染率和Hp Ⅱ型感染率有隨年齡增大而升高的趨勢，但≥60歲組檢出率有所下降，與相關報道一致，可能與該組多為離退休老干部，文化水平與家庭生活層次較高、衛生條件較好有關[9]。

綜上所述，本地區Hp的感染率高，主要以Hp Ⅱ型感染為主，且不同年齡、性別人群的感染率不同，臨床應將Hp感染作為防治的重點，根據流行病學資料，有針對性地開展預防、治療及跟蹤隨訪工作，從根本上降低消化系統潰瘍和惡性腫瘤的發生率，提高本地區居民的身體素質和健康水平。