膜聯蛋白A1、sd-LDL、Angptl2與冠心病及對冠狀動脈粥樣硬化病變程度的診斷價值

吳威 衣欣 蒙奕兵 張雪

冠心病（Coronary heart disease，CHD）作為日益增長的公共健康問題，已發展成嚴重威脅中老年群體健康的首要病因[1]。臨床加強CHD病情評估，并針對性治療是改善預后、降低住院率、病死率的關鍵環節。低密度脂蛋白（Low Density Liporotein，LDL）表達異常已成為醫學界公認的CHD獨立危險因素[2]。近年隨血脂蛋白研究深入發現，不同形態LDL誘發動脈粥樣硬化能力存在差異性，其中以小而密低密度脂蛋白（sd-LDL）與CHD發病發展關系最為密切[3]；此外，基礎研究顯示，血清膜聯蛋白A1（AnxA1）與冠狀動脈粥樣硬化形成存在一定關聯性，可作為評價斑塊性質的特異性指標[4]；血管生成素樣蛋白2（Angptl2）是一種內臟脂肪細胞分泌蛋白，與動脈粥樣硬化、胰島素抵抗、炎癥反應等病理生理有關，但與CHD患者冠脈病變嚴重程度的報道鮮見[5]。基于此，本研究通過分析血清AnxA1、sd-LDL、Angpt l2與CHD患者冠狀動脈狹窄演化的關聯性，旨在為臨床完善診斷、治療方案提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2017年8月至2019年8月102例CHD患者作為研究對象。符合CHD診斷標準[6]；查體、超聲心動圖診斷確診；首次發病，既往無相關治療史；入組前3個月內未服用影響血脂藥物；患者、家屬知情研究簽署同意書。排除標準：伴其他心血管疾病者；合并嚴重感染性疾病者；存在惡性腫瘤疾病者；伴血液系統疾病者。本研究經醫學倫理委員會審批通過。

1.2 方法

血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平檢測。①樣本采集：晨空腹坐位以非抗凝真空管取肘靜脈血2mL，靜置10min，離心9min（半徑8 cm，轉速3500r/min），分離血清保存至液氮待測。②檢測：取血清室溫解凍（避免反復融凍）用全自動生化分析系統（西門子，型號：Adiva 2400）以過氧化酶法測sd-LDL；以酶聯免疫吸附法測AnxA1、Angptl2水平。試劑、試劑盒均為上海紀寧實業有限公司提供。相同資深專科醫師參考試劑盒說明書規范完成。

1.3 觀察指標

①不同臨床特征患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平。②血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2與Gensini評分相關性。Gensini評分標準[7]：狹窄＜25%計1分；25%～50%計2分；51%～75%計4分；76%～90%計8分；91%～99%計16分；100%計32分。不同病變節段冠狀動脈×對應系數：左主干病變×5。左前降支近段×2.5、中段×1.5、遠段×1，左回旋支近段×2.5、遠段、后降支×1，后側支×0.5，第一對角支×1，第二對角支×0.5，右冠進/中/遠段×1。各分支積分相加為總分。③血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2與冠狀動脈病變支數相關性。④血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2對冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的診斷價值。⑤血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2聯合對冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的診斷價值。

1.3 統計學處理

采用SPSS 22.0統計分析軟件，計數資料以%表示，兩組間比較采用χ2檢驗；相關性以Pearson分析；符合正態分布的計量資料以（）表示，兩組間比較采用t檢驗；應用受試者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲線分析血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2對冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同臨床特征患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平

不同年齡、性別患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平相比，差異無統計學意義（P＞0.05）；不同疾病類型、Gensini評分、冠狀動脈病變支數患者血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2水平存在顯著，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同臨床特征患者血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2水平比較[n，（±s）]Table1 Comparison of serum ANXA 1，SD LDL and Angptl2 levels in patients with different clinical characteristics[n，（±s）]

表1 不同臨床特征患者血清Anx A1、sd-LDL、Angptl2水平比較[n，（±s）]Table1 Comparison of serum ANXA 1，SD LDL and Angptl2 levels in patients with different clinical characteristics[n，（±s）]

臨床病理特征年齡（歲）＜60≥60性別男女疾病類型（例）穩定型心絞痛不穩定型心絞痛急性心肌梗死Gensini評分（分）0～2021～60＞60冠狀動脈病變支數（支）12≥3 n 5547534946223438 34305729 16 AnxA1（μg/L）1.55±0.401.59±0.38 1.56±0.331.58±0.36 1.17±0.201.49±0.352.16±0.571.20±0.221.54±0.38 2.07±0.551.31±0.241.62±0.322.41±0.50 t/F/P值-1.044/0.299-0.293/0.770-63.411/＜0.001-41.118/＜0.001-76.518/＜0.001sd-LDL（mmol/L）1.27±0.301.29±0.271.26±0.28 1.30±0.251.02±0.16 1.27±0.201.64±0.39 1.04±0.121.33±0.18 1.52±0.211.08±0.171.35±0.241.87±0.35 t/F/P值-0.351/0.726-0.759/0.450-53.079/＜0.001-68.751/＜0.001-78.045/＜0.001Angptl2（ng/mL）2.30±0.422.21±0.452.28±0.502.24±0.46 1.41±0.372.53±0.643.24±0.701.42±0.402.38±0.613.19±0.831.57±0.39 2.76±0.573.81±0.86 t/F/P值0.515/0.6080.419/0.676-108.006/＜0.001-69.042/＜0.001-125.570/＜0.001

2.2 血清AnxA1、sd-LDL、Angpt l2與Gensini評分相關性

Pearson相關系數分析血清AnxA1（r=0.723）、sd-LDL（r=0.784）、Angptl2（r=0.644）與Gensini評分呈正相關，差異具有統計學意義（P＜0.05），圖1～3。

圖1 血清AnxA1與Gensini評分相關性Figure1 correlation between serum ANXA1and Gensiniscore

圖2 血清sd-LDL與Gensini評分相關性Figure2 correlation between serum SD LDL and Gensiniscore

圖3 血清Angpt l2與Gensini評分相關性Figure3 correlation between serum Angptl2 and Gensiniscore

2.3 血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2與冠狀動脈病變支數相關性

Pearson相關系數分析血清AnxA1（r=0.787）、sd-LDL（r=0.780）、Angptl2（r=0.855）與冠狀動脈病變支數呈正相關，差異具有統計學意義（P＜0.05），圖4～6。

圖4 血清AnxA1與冠脈病變支數相關性Figure4 correlation between serum ANXA1and number of coronary lesions

圖5 血清sd-LDL與冠脈病變支數相關性Figure5 correlation between serum SD LDL and number of coronary lesions

圖6 血清Angptl2與冠脈病變支數相關性Figure6 correlation between serum Angptl2 and number of coronary lesions

2.4 血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2對冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的診斷價值

將Gensini評分＞60分定義為冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變。ROC曲線分析顯示，血清AnxA1診斷冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的ROC曲線下的面積（Area Under Curve,AUC）值為0.791，大于血清sd-LDL、Angptl2，當截斷值＞1.61μg/L時，敏感度為84.72%，特異度為66.67%。見表4。

表4 ROC分析結果（%）Table4 ROC analysis results（%）

2.5 3者聯合診斷

血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2聯合診斷冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變AUC為0.895，95%CI為0.819～0.947，診斷敏感度為79.17%，特異度為90.00%，見圖7。

3 討論

sd-LDL是LDL主要類型之一，有學者對sd-LDL與CHD間關系進行研究，B型分布的血清LDL是獨立于年齡、體質量、性別之外的獨立危險因素，可使CHD患者繼發心肌梗死風險提高3倍[9]。學者孫愛梅等[10]研究表明，血清LDL在不穩定型心絞痛、在急性心肌梗死患者中表達異常升高，經多因素回歸分析其表達與高血壓史、腰臀比有關，但校正上述因素后，與健康群體對比，血清sd-LDL表達仍與急性冠狀動脈綜合征存在相關性。本研究結果顯示，不同疾病類型、Gensini評分、冠狀動脈病變支數患者血清AnxA1存在顯著差異（P＜0.05），其介導冠狀動脈病變的機制可能是sd-LDL氧化活性強，血漿清除緩慢，與血管壁粘附后易進入動脈壁內并不斷積聚，致動脈壁氧化損傷，加重斑塊不穩定性[11]。學者秦明明等[12]研究顯示，血清sd-LDL診斷動脈粥樣硬化的敏感度73.6%。本研究顯示，血清AnxA1診斷冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的AUC值最大，為0.791，最佳敏感度為84.72%，略高于上述研究，可能是因本研究采取ROC曲線分析可連續性、動態分析診斷效能，更接近實際診斷價值。

Angptl2是一種分泌型糖蛋白，具有廣泛性生物學作用，絕大多數介導血管生成，少量參與血糖、脂質代謝過程[13]。病理研究顯示，Angptl2能通過加重胰島素抵抗，促進血小板凝聚進一步惡化機體炎癥反應[14]。炎癥反應與CHD發病關系密切，已得到臨床廣泛性證實。因此推測：Angptl2可能通過激活、強化機體炎癥反應過程加重冠脈血管斑塊形成，誘發CHD發生。本研究檢測發現，CHD患者普遍存在血清Angptl2高表達狀態，且不同冠脈病變類型患者間表達存在顯著差異（P＜0.05）。Angptl2與Toll樣受體4配體結合后可通過整合素有關途徑大量激活炎癥細胞因子表達，繼而產生抗血管內皮細胞損傷效應，促進血管壁重塑，介導動脈粥樣硬化形成，且會增加斑塊不穩定性，加重病情。學者何攀文等[15]研究顯示，隨CHD患者Gensini評分升高，血清Angptl2表達呈上升趨勢。本研究結果顯示，血清Angptl2表達與CHD患者Gensini評分呈正相關（P＜0.05），與上述研究結果近似，同時本研究還發現，血清Angptl2表達與冠狀動脈病變支數存在密切關系，進一步ROC曲線分析顯示，血清Angptl2診斷冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的AUC值為0.723，可為臨床診斷提供參考數據。

AnxA1是重要炎癥調控蛋白之一，在人體大多數組織細胞，尤其是單核細胞、粒細胞中呈強陽性表達，參與中性粒細胞/單核細胞、炎癥代謝產物與血管內皮細胞的黏附過程[16]。學者霍倩倩等[17]采取RT-PCR技術、Westernblot探究AnxA1與頸動脈粥樣硬化斑塊間關系，發現無論是基因層面還是AnxA1蛋白表達層面，粥樣硬化斑塊患者均顯著升高。與本研究結果一致，學者梁蓉[18]研究顯示，AnxA1基因組異常改變、編碼蛋白質失活與動脈粥樣斑塊穩定性關系密切。但以往研究中未見血清AnxA1對CHD診斷價值分析，本研究ROC曲線分析結果表明，血清AnxA1診斷冠狀動脈粥樣硬化嚴重病變的敏感度為84.72%，特異度為66.67%，能有效診斷冠狀動脈粥樣硬化，但特異性欠佳，可能存在誤診情況，臨床需首先排除腫瘤、其他血管疾病或輔助其他診斷手段。

綜上可知，CHD患者存在血清AnxA1、sd-LDL、Angptl2異常表達情況，且與冠脈病變嚴重程度關系密切，3者聯合檢測在CHD患者冠脈嚴重病變診斷中價值最高，可為臨床診斷、完善治療方案提供數據參考。