濕疹患兒血清維生素D、IL-17、ECP 的相關性及其與濕疹嚴重程度的關系

王葉萍 徐建新 應玲靜

濕疹是兒童常見的一種炎癥性皮膚病，皮疹表現多樣性，伴明顯瘙癢，病程較長，常反復發作[1]。研究發現，Th17 細胞參與濕疹的發病過程[2]。維生素D可調節免疫反應，參與變態反應疾病的發生[3]。本研究通過檢測中重度濕疹嬰幼兒血清25-羥維生素D3[25-hydroxyvitamin D3，25-（OH）D3]、白細胞介素17（interleukin，IL-17）及嗜酸粒細胞陽離子蛋白（eosinophil cationic pro-tein，ECP）水平，探討濕疹患兒25-（OH）D3、IL-17 及ECP 水平相關性及其與濕疹嚴重程度關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年7 月—2018 年12 月在浙江省金華市中心醫院皮膚科及兒科診斷為濕疹的52 例患兒為濕疹組。根據濕疹面積及嚴重度指數（eczemra area and severity index，EASI）評分法[4]，31～60 分為中度濕疹組，61～90 分為重度濕疹組，各26 例。選取同期健康體檢嬰幼兒52 名作為健康對照組（剔除既往有濕疹、過敏性鼻炎等過敏性疾病史）。本研究取得患兒家長或監護人知情同意，并獲得我院醫學倫理委員會批準，倫理號為（2016）倫審第（80）號。

1.2 納入及排除標準 納入標準：濕疹組患兒均符合《濕疹診療指南》中關于濕疹的診斷標準[1]，依據EASI 評分法均屬于中重度濕疹。排除標準：皮膚受損區有嚴重感染者；治療前3 個月糖皮質激素、抗組胺類或免疫抑制類藥物治療者；伴結締組織系統疾病及先天性免疫缺陷等；同時參與其他臨床治療者。

1.3 觀察指標 抽取所有患兒外周靜脈血6mL，以3000r/min 離心10min（離心半徑13.5cm），分離血清，收集上層液，置-80℃冰箱保存待檢測。采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測血清25-（OH）D3 水平，試劑盒購自英國IDS 公司（批號22S17112704）。采用雙抗體夾心ELISA 法測定血清IL-17 水平，試劑盒購自美國R&D Systems 公司（批號13-CGS-2146）。采用熒光酶聯免疫吸附法測ECP 水平，試劑購自瑞典Pharmacia 公司（批號36D16107302）。嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.4 統計學方法 使用SPSS 20.0 軟件進行統計分析，計量資料用均數±標準差（）表示，組間比較符合正態分布的使用t 檢驗分析，不符合的用Mann-Whitney U 秩和檢驗，計數資料采用卡方檢驗，相關分析采用雙變量相關分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 中度濕疹組男14 例，女12 例，月齡（14.62±5.38）個月，出生胎齡（≥38 周）23 例，出生體質量2.5～4.0kg 25 例，規律補充維生素D 22例，母孕期有缺鈣史5 例。重度濕疹組男11 例，女15例，月齡（14.83±4.86）個月，出生胎齡（≥38 周）25例，出生體質量2.5～4.0kg 24 例，規律補充維生素D 21 例，母孕期有缺鈣史7 例。健康對照組男25 名，女27 名，月齡（14.76±5.24）個月，出生胎齡（≥38 周）49例，出生體質量2.5～4.0kg 49 名，規律補充維生素D 46 名，母孕期有缺鈣史10 名。三組在性別、平均月齡、出生胎齡、出生體質量、規律補充維生素D 及母孕期有缺鈣史例數方面差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較 中、重度濕疹組患兒與健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平經分析差異有統計學意義（P＜0.05）。經兩兩比較，中、重度濕疹組患兒血清25-（OH）D3 水平明顯低于健康對照組，IL-17、ECP 水平高于健康對照組；與中度濕疹組比較，重度濕疹組患兒血清25-（OH）D3 水平更低，IL-17、ECP 水平更高（P＜0.05），見表1。

表1 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較（）

表1 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較（）

注：25-（OH）D3 為25-羥維生素D3；IL-17 為白細胞介素17；ECP 為嗜酸粒細胞陽離子蛋白；與健康對照組比較，aP＜0.05；與中度濕疹組比較，bP＜0.05

2.3 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平與濕疹嚴重程度關系 濕疹患兒血清25-（OH）D3 水平與濕疹嚴重程度呈負相關（r=-0.705，P＜0.01），血清IL-17、ECP 水平與濕疹嚴重程度呈正相關（r=0.884、0.864，P 均＜0.01），見圖1。

2.4 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平相關性分析 濕疹患兒血清25-（OH）D3 與IL-17、ECP 均呈明顯負相關（r=-0.664、-0.578，P 均＜0.01），ECP 與IL-17 呈正相關（r=0.779，P＜0.01），見圖2。

3 討論

濕疹是一種內外因素共同作用的遲發型超敏反應，其發病與皮膚屏障功能障礙、免疫異常、炎癥介質等多因素有關[5]。近年研究發現，25-（OH）D3 與嬰幼兒濕疹關系密切[6-7]。維生素D 作為免疫系統的重要調節因子越來越被認可。維生素D 可阻礙B 淋巴細胞增殖，誘導活化的B 淋巴細胞凋亡，抑制漿細胞的分化及免疫球蛋白的分泌[8]。25-（OH）D3 還可增強巨噬細胞吞噬趨化能力，增強單核細胞、中性粒細胞的抗菌肽活性，殺傷多種病原體。Camargo 等[9]研究發現，補充維生素D 可改善兒童特應性皮炎癥狀。本研究發現，濕疹患兒血清25-（OH）D3 水平明顯低于健康對照組（P<0.05），且與濕疹嚴重程度負相關（P<0.05），與李垣君等[10]報道一致，提示25-（OH）D3 水平不足與濕疹的發病及其嚴重程度有一定相關性。

近年研究認為，除Thl/Th2 失衡學說外，可能還存在新的細胞亞群，如Th17 細胞、Treg 細胞等[11]。Th17 細胞可分泌IL-17、IL-22 等多種細胞因子，其中IL-17 是Th17 細胞的主要效應分子。IL-17 在多種炎癥性疾病、自身免疫性及變態反應性疾病患者體內高表達，證實其可誘導多種促炎介質分泌并參與炎癥級聯反應。本研究結果顯示，濕疹患兒血清IL-17 明顯高于健康對照組，且與濕疹嚴重程度明顯相關，與沈斌、麥衛華等[2，12]報道一致。然而，IL-17 參與濕疹發病的機制尚不明確，有研究表明，IL-17 通過受體介導的多種信號途徑誘導細胞產生IL-8、IL-6 等，趨化并激活中性粒細胞，促進炎癥細胞產生強大促炎活性，參與各種炎癥反應及免疫性疾病的發生[13]。IL-17 還可刺激皮膚的角質形成細胞分泌多種炎癥因子，誘導釋放趨化因子，并能增強角質T 細胞的毒性和粘附性，進而放大T 細胞的炎癥反應。

圖1 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 與濕疹EASI 評分相關性分析

圖2 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 之間相關性分析

在濕疹發病過程中，嗜酸性粒細胞被活化后，釋放ECP，抑制T 細胞增殖，促進肥大細胞釋放組胺，破壞嗜酸粒細胞及角質形成細胞。ECP 能反映機體被致敏后嗜酸性粒細胞在炎癥過程中活化程度和脫顆粒釋放毒性介質的能力，可作為濕疹炎性反應活動的評價指標。本研究發現，濕疹患兒血清ECP 水平明顯高于對照組（P<0.05），與IL-17、濕疹嚴重程度呈正相關（P<0.05），由此推斷ECP 與IL-17 共同趨化嗜酸性粒細胞在組織中浸潤，且ECP 能較好的反映濕疹的嚴重程度。

此外，本研究還發現，中重度濕疹嬰幼兒血清25-（OH）D3 水平與ECP、IL-17 水平呈明顯負相關（P<0.05），說明25-（OH）D3 水平不足與Th17 細胞介導的免疫反應有一定相關性。然而25-（OH）D3、IL-17 共同參與濕疹發病的具體機制尚不明確，有研究表明，25-（OH）D3 可影響活化T 細胞分化，抑制CD4+細胞分泌IL-17，抑制IL-17 細胞反應[14-15]。本研究樣本量少，由于兒科及皮膚科住院患兒屬于輕度濕疹人數相對少，病情相對輕，依從性不高，故選取中重度濕疹嬰幼兒為研究對象，有一定局限性。因此，中重度濕疹嬰幼兒25-（OH）D3 與Th17 細胞介導的免疫反應之間相關性機制有待更深入的研究。

綜上所述，25-（OH）D3、IL-17、ECP 共同參與嬰幼兒中重度濕疹的發病，且與濕疹的嚴重程度有關。此外，25-（OH）D3、IL-17 及ECP 之間存在一定相關性。