沉降式宮頸液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)常見問題研究

高亞娟 白潔 李佳 王建

【摘要】本文通過對臨床中液基細(xì)胞學(xué)制片方法的總結(jié)匯總，分析常見制片過程中出現(xiàn)的問題，以及有可能造成該問題的原因及解決方法。以此希望能夠更好的服務(wù)于臨床患者。

【關(guān)鍵詞】液基細(xì)胞學(xué)技術(shù);宮頸篩查;沉降式

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于乳腺癌，居女性惡性腫瘤的第二位【1】。近年來隨著社會的發(fā)展，宮頸癌的發(fā)生率呈顯著上升和年輕化趨勢，因此癌前篩查顯得尤為重要。宮頸液基細(xì)胞學(xué)是基于對正常脫落的宮頸細(xì)胞進(jìn)行分析診斷的一種診斷方法，其能夠利用相關(guān)試劑有效去除標(biāo)本中的非診斷所需成分，進(jìn)而做出準(zhǔn)確的判斷。宮頸液基細(xì)胞學(xué)在提高宮頸病變診斷率方面發(fā)揮了重要作用。本文根據(jù)臨床觀察總結(jié)，現(xiàn)對沉降式宮頸液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)過程中經(jīng)常出現(xiàn)的問題進(jìn)行總結(jié)分析。

1.材料與方法

1.1材料??

使用北京世紀(jì)眾諾醫(yī)療器材有限公司提供的樣本保存液、緩沖液、巴氏染液等試劑耗材。

1.2方法

在離心管里加入4ml密度分離液→將核對好的標(biāo)本分別轉(zhuǎn)移至對應(yīng)的離心管→離心（200轉(zhuǎn)離心2分鐘15秒）→打開真空泵，壓力調(diào)節(jié)至8±1in/Hg吸取上層廢液→離心（800轉(zhuǎn)離心10分鐘）→迅速將管架倒置180度傾出上清液，震蕩20秒左右→上全自動制片機(jī)→巴氏染色→環(huán)保透明劑（5min左右）→封片

2.結(jié)果

制片質(zhì)量較好，染色鮮艷，不同層次細(xì)胞顯色分明，細(xì)胞分布均勻，核質(zhì)對比清晰，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，能夠有效的提供診斷信息。

3.討論

3.1細(xì)胞數(shù)量過少的問題：

3.1.1由于病人出血或者炎癥等原因造成血性樣本或黏液等雜質(zhì)過多，無法獲取足夠的細(xì)胞數(shù)，處理時可將離心管內(nèi)的細(xì)胞全部倒入制片艙制片，必要時應(yīng)重新取材。

3.1.2細(xì)胞沉降時間不夠，細(xì)胞不能充分沉降粘附在玻片上，適當(dāng)增加沉降時間。

3.1.3玻片對于細(xì)胞的吸附性降低，更換玻片。同時控制玻片所處環(huán)境的濕度，使?jié)穸炔坏么笥?0%。

3.2血液、黏液過多的標(biāo)本制片效果不佳：

3.2.1將標(biāo)本小瓶充分混勻后，吸出5ml液體，置于另一潔凈容器內(nèi)，向容器內(nèi)加入5ml細(xì)胞保存液，充分混勻后，按照正常程序制片染色。

3.2.2向標(biāo)本小瓶內(nèi)加入1-2%冰乙酸溶液數(shù)滴，震蕩混勻5分鐘后，按正常程序制片染色。

3.2.3使用生理鹽水將標(biāo)本進(jìn)行倍比稀釋后，按照正常轉(zhuǎn)移流程制片染色。

3.3染色異常：

3.3.1緩沖液的酸堿度不正確，應(yīng)調(diào)至PH7.5-8.5之間左右。緩沖液主要用于調(diào)節(jié)玻片染色環(huán)境的pH值。染色環(huán)境PH值過低，即環(huán)境過酸，細(xì)胞質(zhì)著色能力增強(qiáng)，會造成胞質(zhì)深染。染色環(huán)境PH值過高即環(huán)境過堿，則會胞核深染的現(xiàn)象【2】。

3.3.2檢查無水乙醇/異丙醇液使用時效，定期更換。

3.3.3染色過深或過淺：根據(jù)玻片顯示的胞質(zhì)和胞核的染色效果，適當(dāng)調(diào)整蘇木素或者EA/OG的染色時間。

3.3.4溫度會對染色造成影響。低于15攝氏度影響蘇木素染色，高于30攝氏度影響EA染色效果。

3.4細(xì)胞集散與邊緣：

3.4.1樣本細(xì)胞量過少，處理方式同3.1所列

3.4.2制片艙沒有扣上，在扣制片艙的時候盡量扣緊。

3.5鏡下細(xì)胞呈團(tuán)問題：

3.5.1取材時力度過大。該原因引起的成團(tuán)細(xì)胞一般排列整齊、層次分明，細(xì)胞團(tuán)有極性。實(shí)驗(yàn)過程中可增加振蕩時間，并與臨床醫(yī)生就取材問題進(jìn)行溝通。

3.5.2轉(zhuǎn)移量過多。該原因引起的成團(tuán)細(xì)胞，一般雜亂無章，無排列規(guī)則。實(shí)驗(yàn)過程中增加振蕩時間、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)移量。

隨著液基細(xì)胞學(xué)的發(fā)展，該技術(shù)的應(yīng)用在臨床中的重要性日益凸顯，尤其在女性宮頸癌篩查方面。良好的制片質(zhì)量是正確診斷的基礎(chǔ)之一，希望通過此篇文章能夠更好的服務(wù)于病理醫(yī)生、更好的服務(wù)于患者。

【參考文獻(xiàn)】

[1]? Bai H，Sung C J，Steinhoff M M. ThinPrep Pap Test pro-motes detection of glandular lesions of the endocervix[J]. Di-agn Cytopathol，2000，23（1）：19-22

[2]? 梁英杰，凌啟波，張威.臨床病理學(xué)技術(shù)[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：334-4