G6PD活性水平與地中海貧血相關性分析

葉偉強　梁知銳　徐耀祥

【摘要】 目的探討分析葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）活性與地中海貧血（地貧）之間的關系。 方法? ?選取行血紅蛋白電泳檢測結果為陽性的150例患者作為地貧組， 另選取同期接受血紅蛋白電泳檢測結果顯示正常的150例患者作為對照組。兩組均進行血常規、G6PD活性、血紅蛋白電泳檢測。比較地貧組與對照組 G6PD活性， 對照組不同血常規MCV值的G6PD活性。結果? ?地貧組患者根據檢測結果分為血紅蛋白H（HbH）病組（33例）、輕型地貧組（95例）、重型地貧組（22例）。HbH病組、輕型地貧組、重型地貧組的G6PD活性分別為（5207.00±555.75）、（3397.47±686.85）、（5298.60±736.46）， 均高于對照組的（2567.21±615.76）， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。HbH病組與重型地貧組G6PD活性均高于輕型地貧組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）;但HbH病組與重型地貧組G6PD活性比較差異無統計學意義（P>0.05）。對照組患者根據血常規MCV值分為MCV異常組（50例， 血常規MCV值小于正常參考值）和MCV正常組（100例， 血常規MCV值在正常參考值范圍內）。MCV異常組患者經地中海貧血基因檢測確診為地中海貧血患者或地中海貧血基因攜帶者。MCV異常組的G6PD活性（2775.57±584.59）高于MCV正常組的（2119.05±227.20）， 差異有統計學意義（P<0.05）。結論? ?G6PD活性水平可作為輔助診斷地中海貧血及分型的輔助依據。

【關鍵詞】 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶;血紅蛋白電泳;地中海貧血

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.06.043

地中海貧血又稱珠蛋白生成障礙性貧血， 是一種由基因缺陷導致血紅蛋白中至少一種珠蛋白合成缺乏或者不足， 引起的病理狀態， 它是一組常染色體不完全顯性遺傳性疾病。地中海貧血多見于我國長江以南地區， 其中廣東、廣西、四川為高發區。根據廣東地中海貧血流行病學統計， 廣東地區地中海貧血的攜帶率為8.53%， 地中海貧血的攜帶率為2.54%[1]。臨床中， 對地中海貧血患者的篩查判斷主要采用血常規檢查聯合血紅蛋白電泳分型方法進行判斷， 并以基因檢測結果為臨床最終判斷確診的標準方法。其中， G6PD是紅細胞內葡糖糖代謝三大途徑之一磷酸戊糖代謝途徑上的酶， 它主要存在于機體紅細胞內， 并參與葡萄糖分解代謝反應， 在這一代謝變化過程中會產生一種叫還原型輔酶Ⅱ的物質， 該物質對谷胱甘肽的還原態具有保持作用， 從而起到保護紅血球免受氧化物質的威脅的效果。當前， 臨床對G6PD檢測主要用于蠶豆病和藥物性溶血性貧血的診斷， 并且具有較好的作用和效果。但有研究顯示[2]， 在臨床診斷過程中發現地中海貧血患者G6PD活性明顯高于正常人群， 同時由于地中海貧血患者的機體紅細胞壽命約為正常細胞的50%， 因此， 其機體紅細胞更新速度與正常人群相比明顯較快等有著直接的關系。因此， 本文以在本院進行血紅蛋白電泳檢測結果為陽性的150例患者為研究對象， 對其G6PD活性進行檢測分析， 以探討G6PD活性與地中海貧血的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2015年1月～2018年12月在本院進行血紅蛋白電泳檢測結果為陽性的150例患者作為地貧組， 年齡2～50歲， 平均年齡（27.9±8.7）歲。排除標準：血紅蛋白電泳異常、蠶豆病、血液病、缺鐵性貧血及藥物溶血者。另選取同期在本院接受血紅蛋白電泳檢測結果顯示正常的150例患者作為對照組， 年齡2～50歲， 平均年齡（28.1±8.7）歲， 均無地中海貧血與G6PD缺陷家族病史。

1. 2 方法

1. 2. 1 標本的采集及處理 地貧組和對照組研究對象均于接受檢測前1晚20：00后禁食并停止服用藥物， 于次日凌晨8：00～10：00抽取靜脈血4 ml于含分離膠和促凝劑的黃頭管及2 ml EDTA-K2抗凝的紫頭管， 黃頭管靜置>30 min， 待血液凝固， 4000 r/min離心10 min， 分離血清進行鐵蛋白檢測;紫頭管充分混勻后， 進行血常規、G6PD、血紅蛋白電泳檢測。

1. 2. 2 儀器與試劑 ①血紅蛋白檢測：海倫娜spife3000全自動電泳儀及其配套試劑， 方法為瓊脂糖凝膠電泳。②血常規檢測：希森美康SYSMEX XN-1000全自動血細胞分析儀及其配套試劑。③鐵蛋白檢測：新產業全自動化學發光儀MAGLUMI 2000 Plus及其相關配套試劑， 用于刷選缺鐵性貧血。④G6PD檢測：西門子全自動生化分析儀ADVIA 1800， 試劑由北京華宇億康生物工程技術有限公司提供。

1. 3 觀察指標及判定標準 比較地貧組與對照組 G6PD活性;對照組不同血常規MCV值的G6PD活性。①HbH病：血紅蛋白電泳見HbH區帶， HbH在5%～40%;②輕型地中海貧血：HbA2定量>3.5%;③重型地中海貧血：血紅蛋白電泳HbF>30%;④G6PD參考范圍為1300～3600 U/L;⑤MCV正常參考值為82～100 fl。

1. 4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗;對于符合正態分析的多組資料采用SNK-q檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 地貧組與對照組 G6PD活性比較 地貧組患者根據檢測結果分為HbH病組（33例）、輕型地貧組（95例）、重型地貧組（22例）。HbH病組、輕型地貧組、重型地貧組的G6PD活性分別為（5207.00±555.75）、（3397.47±686.85）、（5298.60±736.46）， 均高于對照組的（2567.21±615.76）， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。HbH病組與重型地貧組G6PD活性均高于輕型地貧組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）;但HbH病組與重型地貧組G6PD活性比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 對照組不同血常規MCV值的G6PD活性比較 對照組患者根據血常規MCV值分為MCV異常組（50例， 血常規MCV值小于正常參考值）和MCV正常組（100例， 血常規MCV值在正常參考值范圍內）。MCV異常組患者經地中海貧血基因檢測確診為地中海貧血患者或地中海貧血基因攜帶者。MCV異常組的G6PD活性（2775.57±584.59）高于MCV正常組的（2119.05±227.20）， 差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

地中海貧血是一種遺傳性的溶血性貧血性疾病， 地中海貧血患者的紅細胞壽命是正常細胞的50%左右， 紅細胞更新速度比正常人快[3]， 地中海貧血患者代償產生較多的新生年輕紅細胞。臨床中， 對輕型地中海貧血患者進行檢查分析顯示， 其臨床癥狀以慢性溶血性貧血表現為主， 對其進行血液學檢查可顯示存在小細胞低色素性貧血， 同時患者的血紅蛋白電泳檢測顯示存在HbA2改變， 其中， 以α地中海貧血病癥患者的血紅蛋白電泳檢測結果降低與β地中海貧血患者的血紅蛋白電泳檢測結果升高變化為主要特征， 并且在醫院的產科門診患者中， 重型地中海貧血患者多表現為Barts水腫胎， 即在患者的妊娠周期達到20周左右時會出現嚴重缺氧導致的全身水腫以及心臟衰竭導致胎兒娩出前死亡發生等情況存在， 還會導致患者出現妊娠期高血壓病癥， 對其產生較大的危害影響;而β重型患者的嚴重貧血情況一般會出現在患者出生后6個月時， 需要通過終生定期輸血與排鐵維持治療等， 對患者的生命安全進行維護性救治， 其中， 骨髓移植是進行β重型地中海貧血患者根治治療的主要方法， 并且多數患兒可能在5歲前出現死亡， 少數繼續生存患者的生存質量均表現極差， 對患者本身以及整個家庭所造成的負擔影響均十分大。另一方面， 由于該疾病為遺傳性疾病， 出現新發突變的幾率幾乎很低， 為減少該疾病對患者及家庭的不利影響， 對妊娠期孕婦開展有效的產前檢查， 對產前檢查顯示存在重型地中海貧血病癥胎兒， 通過終止妊娠方法以避免其危害影響， 從而減少該疾病對患者家庭及社會產生的負擔和影響， 是當前臨床進行該疾病控制的有效方法。

本研究結果顯示， HbH病組、輕型地貧組、重型地貧組的G6PD活性分別為（5207.00±555.75）、（3397.47±686.85）、（5298.60±736.46）， 均高于對照組的（2567.21±615.76）， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。G6PD是細胞年齡依賴性酶[4]， 年輕的紅細胞G6PD的活性高于衰老的紅細胞， G6PD活性與體內年輕紅細胞增多成正相關關系。其中， 地中海貧血患者的G6PD活性水平與正常的健康人員相比明顯增高， 是由于患者機體反應中基因出現點突變或存在較大片段的缺失， 從而造成珠蛋白鏈合成出現減少或缺失變化， 造成機體紅細胞中的α與鏈比例分布不平衡， 出現紅細胞形態異常且容易發生溶血等， 故地中海貧血患者G6PD的活性高于健康人群。

國內有些作者認為， 重型地中海貧血的G6PD活性高于HbH病[5]。本研究發現， 但HbH病組與重型地貧組G6PD活性比較差異無統計學意義（P>0.05）。與陳炎添等[6]的報道較一致。可能是由于本研究中收集的HbH病患者中存在HbH-CS和缺失型HbH相比， HbH-CS的G6PD活性水平較缺失型HbH高[7]。HbH病組與重型地貧組G6PD活性均高于輕型地貧組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）， 是由于重型地中海貧血與HbH病溶血性貧血加重， 導致機體代償性產生年輕的紅細胞多于輕型地中海貧血。

陳冬等[8]報道， 輕型β地中海貧血、重型β地中海貧血、HBH病的G6PD活性分別為對照組2～3倍。明顯高于本次研究觀察到的G6PD活性， 且三型地中海貧血的G6PD活性升高幅度趨勢基本一致。導致該現象的原因不明， 可能是由于抽樣方法、檢測方法的差異， 或是地域不同， 人群的基因分布不同， 需要進一步的研究才能明確。

由于血紅蛋白電泳方法學在地中海貧血檢測中存在局限性， 對靜止型地中海貧血、標準型地中海貧血無法檢出， 檢測中血紅蛋白電泳多表現為正常或者HbA2降低， 而當地中海貧血復合地中海貧血患者HbA2水平可在正常范圍內， 因此單從血紅蛋白電泳檢測結果上看， 容易導致地中海貧血復合地中海貧血患者漏診[7]。表2中對50例血紅蛋白電泳正常而血常規異常人群進行地中海貧血基因檢測， 確診為地中海貧血患者， 表明基因檢測是標準型地中海貧血或地中海貧血復合地中海貧血診斷的有效方法。結果顯示血常規異常組G6PD活性高于血常規正常組， 說明對于血紅蛋白電泳不能檢測出的地中海貧血類型， 可通過血常規和G6PD活性聯合檢測， 對地中海貧血患者診斷準確率有提升作用。血紅蛋白電泳聯合血常規和G6PD活性斷方法對缺乏地中海貧血基因檢測的基層醫院而言， 對地中海貧血患者進行初步篩查具有有效性與可行性。由于靜止型地中海貧血緩和平常無癥狀， 且血象無特殊表現， 因此本文沒有對靜止型地中海貧血G6PD的活性與正常人G6PD的活性進行對比研究。

綜上所述， G6PD 活性的升高可以提示地中海貧血， G6PD可作為地中海貧血的輔助診斷指標， 對地中海貧血高發區人群進行該指標檢測， 可以有效的預防地中海貧血的發生， 對于優生優育有重要的意義。

參考文獻

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