吳依然,張 敏,解曉露,張文平
(1.山西醫科大學公共衛生學院,山西 太原 030009;2.首都兒科研究所兒童發育營養組學北京市重點實驗室,北京 100020)
維生素B1、B2、B6(VitB1、VitB2、VitB6)是生物學作用廣泛并與兒童生長發育密切相關的水溶性維生素。VitB1(硫銨素)是體內能量代謝與三大產能營養素代謝的輔酶[1]。VitB2(核黃素)是多種氧化還原酶的輔酶,參與呼吸鏈能量產生,也是葉酸、VitB12和同型半胱氨酸代謝的輔酶[2-3]。VitB6參與氨基酸、糖原和脂肪酸代謝、神經遞質合成,同時也是一碳代謝的輔酶[4-5]。
VitB1、VitB2、VitB6因其水溶特性在體內儲存量很低,良好的營養狀況依賴合理的膳食供應,容易出現亞臨床缺乏[6-7]。早期發現與評估兒童VitB1、VitB2、VitB6營養狀況對及時糾正和預防亞臨床缺乏有重要意義。本研究通過檢測北京和西寧地區兩所醫院140例0~7歲兒童全血中VitB1、VitB2、VitB6水平,分析和比較兩所醫院140例兒童VitB1、VitB2、VitB6的營養狀況,以期為兩地兒童的保健工作提供現實依據。
選取2016年8月在首都兒科研究所、青海省婦女兒童醫院門診就診的0~7歲140例兒童為研究對象,其中北京地區72例,西寧地區68例,排除合并血液系統疾病及臨床診斷為營養元素缺乏的兒童,全部受檢兒童無身體發育異常及畸形。受檢兒童根據年齡大小分為:嬰兒組(0~<1歲)42例,男28例,女14例;幼兒組(1~3歲)60例,男34例,女26例;學齡前組(>3~7歲)38例,男20例,女18例。北京地區醫院兒童男42例(58.33%)、女30例(41.67%),0~<1歲14例(19.44%)、1~3歲38例(52.78%)、>3~7歲20例(27.78%);西寧地區醫院兒童男40例(58.82%)、女28例(41.18%),0~<1歲28例(41.18%)、1~3歲22例(32.35%)、>3~7歲18例(26.47%),兩地區的性別及年齡比較差異均無統計學意義(均P>0.05)。受檢兒童家屬均知曉本研究并簽訂知情同意書,本研究獲首都兒科研究所倫理委員會批準。
1.2.1血標本采集
應用毛細采血管采集指尖末梢全血40μL滴于濾紙片上,室溫通風處陰干后制成干血斑(dried blood spots,DBS),鋁箔真空袋保存后常溫運輸至實驗室。
1.2.2全血VitB1、VitB2、VitB6的檢測及質量控制
應用本課題組前期發表的LC-MS/MS方法對北京與青海省西寧地區140例7歲以下兒童全血干血斑中三種B族維生素(VitB1、VitB2、VitB6)水平進行定量分析[8]。應用SHIMADZU LC-20A液相及API5000型三重四極桿串聯質譜儀,電噴霧離子源正離子模式(ESI+)方法。應用ACE5C85μm,100×4.6mm色譜柱完成三種目標維生素分離,流動相A為0.3%甲酸甲醇,流動相B為0.3%甲酸水溶液,流速為0.8mL/min,進樣量為40μL。洗脫條件為:0.00~0.50min,5%B;0.51~3.00min,75%B;3.01~4.00min,75%B;4.01~4.60min,100%B;4.61~6.50min,100%B;6.51~6.60min,5%B;6.61~8.00min,5%B。三種維生素及其同位素內標定量分析離子對分別為:VitB1,m/z265.2→122.1,VitB1-[13C4],m/z269.3→122.1;VitB2,m/z 377.2→243.1,VitB2-[13C4,15N2],m/z 283.2→249.0;PLP,m/z 248.1→150.1,PLP-d3:m/z 171.1→153.1。方法學確證依照美國食品及藥品管理局(Food and Drug Administration,FDA)[9]與歐盟藥品監管體系(European Medicines Agency,EMA)標準[10],三種B族維生素準確度范圍為92.6%~103.12%,批內與批間精密度范圍為1.47%~8.56%,前處理回收率范圍為81.49%~112.23%。
①觀察全部受檢兒童全血中VitB1、VitB2、VitB6整體水平;②觀察不同年齡段、不同性別的兒童全血中三種B族維生素的含量;③比較北京和西寧兩地兒童全血中三種B族維生素的差異。
采用SPSS 22.0軟件包進行統計學分析,VitB2數據經對數轉換后,符合對數正態分布,因此VitB2數據用幾何均數G表示,兩組資料間的比較采用獨立樣本t檢驗,三組資料間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA);VitB1、VitB6數據經對數轉換后,仍然是偏態分布,因此用中位數M(P25~P75)表示,組間分布對比應用非參數檢驗方法,以P<0.05為差異有統計學意義。
在140例受檢兒童全血中,VitB2水平經lg10對數轉換后符合對數正態分布,全部受檢兒童全血中VitB2水平為5.73ng/mL,其中北京地區醫院72例兒童VitB2水平為7.59ng/mL,西寧地區醫院68例兒童VitB2水平為4.27ng/mL;在總體受檢兒童中,幼兒組兒童全血中VitB2水平顯著高于嬰兒組與學齡前組(P<0.05);在總體受檢兒童全血中VitB2水平在性別間差異無統計學意義(P>0.05),見表1。北京地區醫院受檢男童、女童全血中VitB2水平均分別顯著高于西寧地區醫院受檢男童、女童(均P<0.05),且北京地區醫院嬰兒組、學齡前組兒童全血中VitB2水平均顯著高于同年齡段西寧地區醫院兒童(均P<0.05),見表2。

表1 兩所醫院140例受檢兒童全血中VitB2水平的比較結果[n(%)]Table 1 Comparison of vitamin B2 levels in whole blood of 140 children [n(%)]
注:與幼兒組比較,*P<0.05;嬰兒組與幼兒組相比,t=-2.32,P<0.05;學齡前組與幼兒組相比,t=2.86,P<0.05;嬰兒組與學齡前組相比,t=0.56,P>0.05;G為幾何均數。
2.2.1 VitB1水平及營養狀況
在140例受檢兒童全血中,VitB1水平為2.86(2.07~4.49)ng/mL,其中北京地區醫院72例兒童VitB1水平為2.86(2.36~4.70)ng/mL,西寧地區醫院68例兒童VitB1水平為2.88(1.71~4.08)ng/mL;在總體受檢兒童中,幼兒組VitB1水平顯著高于嬰兒組與學齡前組(P<0.05),見表3。在兩個地區的醫院中,幼兒組全血VitB1水平均顯著高于學齡前組和嬰兒組(均P<0.05),性別間VitB1水平差異均無統計學意義(均P>0.05),見表4。

表2 北京、西寧地區兩所醫院兒童全血中VitB2水平的比較結果(G)Table 2 Comparison of vitamin B2 levels in children’s whole blood in two hospitals of Beijing and Xining city (G)
注:G為幾何均數。
2.2.2 VitB6水平及營養狀況
在140例受檢兒童全血中,VitB6水平為24.88(18.91~36.46)ng/mL,其中北京地區醫院72例兒童VitB6水平為24.83(18.25~31.50)ng/mL,西寧地區醫院68例兒童VitB6水平為25.10(20.3~41.17)ng/mL;在總體受檢兒童中,在不同年齡段及性別間VitB6水平差異均無統計學意義(均P>0.05),見表3。在兩個地區的醫院中,在不同年齡段及性別間兒童全血VitB6水平差異均無統計學意義(均P>0.05),見表4。

表3 兩所醫院140例受檢兒童全血中VitB1和VitB6總體水平的分布[M(P25~P75)]Table 3 The distribution of vitamin B1 and B6 in whole blood of 140 children in two hospitals [M(P25~P75)]
注:與幼兒組比較,▲P<0.05;VitB1:嬰兒組與幼兒組相比,z=-2.63,P<0.05;學齡前組與幼兒組相比,z=2.49,P<0.05;嬰兒組與學齡前組相比,z=3.15,P>0.05。
表4兩所醫院兒童全血中VitB1和VitB6總體水平分布[M(P25~P75)]
Table 4 Comparison of vitamin B1and B6levels in children’s whole blood in two hospitals in Beijing and Xining [M (P25~P75)]

組別VitB1(ng/mL)北京西寧zPVitB6(ng/mL)北京西寧zP年齡 嬰兒2.52(1.89~6.62)2.22(1.29~7.03)-0.88>0.0520.5(14.25~30.84)30.03(19.49~49.86)1.65>0.05 幼兒3.27(2.59~5.54)3.14(2.65~4.74)-0.14>0.0525.75(18.43~32.03)29.17(20.76~37.20)1.04>0.05 學齡前2.57(2.20~2.92)#2.04(1.34~3.15)#-1.26>0.0524.84(21.48~31.49)22.90(19.29~29.53)-0.64>0.05 合計2.86(2.36~4.70)2.88(1.71~4.08)-1.25>0.0524.83(18.25~31.50)25.10(20.3~41.17)1.30>0.05 H6.177.321.442.34 P<0.05<0.05>0.05>0.05性別 男3.00(2.20~6.04)2.93(2.20~6.04)-1.11>0.0524.75(18.00~29.76)30.37(21.17~42.29)1.68>0.05 女2.76(2.40~3.37)2.75(1.84~3.52)-0.72>0.0524.84(20.91~33.92)23.95(19.35~32.36)-0.05>0.05 合計2.86(2.36~4.70)2.88(1.71~4.08)-1.25>0.0524.83(18.25~31.50)25.10(20.3~41.17) 1.30>0.05 z-1.21-0.520.47-0.69 P>0.05>0.05>0.05>0.05
注:與幼兒組比較,#P<0.05;北京地區醫院兒童VitB1:嬰兒組與幼兒組相比(z=-1.57,P>0.05),學齡前組與幼兒組相比(z=2.31,P<0.05),嬰兒組與學齡前組相比(z=0.42,P>0.05);西寧地區醫院兒童VitB1:嬰兒組與幼兒組相比(z=-1.83,P>0.05),學齡前組與幼兒組相比(z=2.64,P<0.05),嬰兒組與學齡前組相比(z=1.06,P>0.05)。
VitB1、VitB2、VitB6均為水溶性維生素,在人體內含量雖然很低,但對機體正常生理功能的維持起著至關重要的作用。兒童因生長發育迅速,對各種營養素需求大,較容易出現B族維生素的缺乏[6,11]。文獻報道兒童B族維生素缺乏可引起神經系統、心血管系統、消化系統及內分泌系統等多個系統功能異常為主要表現的全身性疾病,影響兒童健康[12-13]。國內葉志成[14]研究上海地區兒童B族維生素水平顯示,兒童中存在VitB1、VitB2、VitB6缺乏,且VitB2缺乏率較高。張穎[15]調查托幼機構兒童膳食營養狀況反映出兒童膳食攝入的VitB2量偏低。本次研究結果顯示0~<1歲、1~3歲及3~7歲兒童全血中VitB1水平分別為2.36(1.66~5.83)ng/mL[7.00(4.92~17.29)nmol/L]、3.15(2.62~5.41)ng/mL[9.34(7.77~16.05)nmol/L]、2.49(1.97~2.98)ng/mL[7.39(5.84~8.84)nmol/L],均低于Wyatt等[16]報道的美國相同(0~1歲,66~81nmol/L)或相近年齡段[(1~15歲,(67±21)nmol/L]兒童全血中VitB1的水平。西寧地區醫院兒童VitB2的含量低于北京地區醫院兒童。
本研究結果表明,兒童全血中VitB1水平與兒童年齡有關,兒童全血中VitB2水平與地域、年齡等因素有關,性別對兒童三種B族維生素水平無明顯影響。本研究通過分析不同地域、年齡段及性別兒童全血中三種B族維生素水平結果顯示:①北京、西寧地區兩所醫院幼兒組兒童全血中VitB1水平均高于學齡前組兒童,分析可能的原因包括:一方面,嬰兒全血中硫銨隨月齡增加而降低,推測該變化與神經系統發育速度相關,兒童神經系統快速發育時期對VitB1需求量大,兒童神經系統發育具有先快后慢的特點,因此幼兒全血中硫銨含量高于學齡前期兒童,可能與神經系統發育速度不同相關。另一方面,幼兒期家長對兒童的營養狀況較為重視,而3歲入托后,家長對營養狀況的關注度降低,且常見偏食現象,從而導致全血中VitB1水平下降。②北京地區醫院兒童全血中VitB2水平顯著高于同年齡段西寧地區醫院兒童。根據國家統計局網站數據顯示,2016年北京地區人均GDP顯著高于西寧地區。分析北京地區醫院兒童全血中VitB2水平高于西寧地區醫院兒童的可能原因為北京地區經濟狀況良好,兒童攝入富含VitB2的新鮮蔬果及肉蛋奶類的比例高于西寧地區兒童。③男女童全血中VitB1、VitB2、VitB6含量較為接近(P>0.05),表明性別對兒童三種B族維生素水平無明顯影響。
《中國0~6歲兒童營養發展報告(2012)》[17]中指出,將兒童營養改善提升為國家戰略,提高兒童健康水平,保護和促進兒童全面發展。兒童時期是智力和體格發展的關鍵期,兒童時期的營養對其一生健康都將具有重要影響。本研究結果顯示140例兒童全血中VitB1的含量低于有關報道的美國同年齡段兒童,西寧地區醫院兒童VitB2水平低于北京地區醫院兒童。我國是發展中國家,與發達國家兒童相比,兒童營養狀況有待提升,因此,我國兒童尤其是經濟落后地區的兒童應注意增補富含B族維生素的食物。同時有關部門應積極采取相關干預措施,大力宣傳科學育兒知識,加強營養,指導家長科學喂養,做到膳食合理、營養平衡,保證兒童身體健康成長。此外,兒童應定期體檢并進行維生素檢測,以便對B族維生素缺乏早期發現、早期預防、早期治療,保證兒童身體健康成長。