梅毒檢驗(yàn)中酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清法的比較

張偉

（江蘇省邳州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 邳州 221300）

梅毒是一種感染性強(qiáng)、危害性大的慢性傳染疾病，是由梅毒螺旋體感染引起，經(jīng)由性傳播、母嬰傳播等途徑傳播，感染后可出現(xiàn)全身性組織、器官功能性損傷[1]。因?yàn)槊范緜魅舅俣确浅？欤野l(fā)病率呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)，臨床主張?jiān)绨l(fā)現(xiàn)、早治療。在梅毒治療中，快速、準(zhǔn)確、有效的檢驗(yàn)方法發(fā)揮著十分重要的作用，而梅毒螺旋體明膠顆粒凝集法是現(xiàn)今公認(rèn)診斷梅毒的重要方法，但其試劑盒價(jià)格較高，無(wú)法在臨床中普及應(yīng)用[2]。為此，有關(guān)學(xué)者提出采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）、甲苯胺紅不加熱血清法（TRUST法），本文為了比較二者檢驗(yàn)的臨床價(jià)值，現(xiàn)選取2017年5月-2019年5月在我院進(jìn)行梅毒檢驗(yàn)的140例梅毒感染患者為研究對(duì)象。分析報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年5月-2019年5月在我院進(jìn)行梅毒檢驗(yàn)的140例梅毒感染患者為研究對(duì)象，根據(jù)檢測(cè)方法不同分為甲組（n=70）與乙組（n=70），同時(shí)選取40例健康體驗(yàn)梅毒檢測(cè)陰性者為參照。甲組患者中，女性40例，男性30例；年齡最小為26歲，最大為51歲，平均為（38.62±4.62）歲。乙組患者中，女性38例，男性32例；年齡最小為25歲，最大為51歲，平均為（38.18±4.53）歲。兩組患者一般資料差異不顯著（P＞0.05）。本研究得到了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，所有患者自愿簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 檢驗(yàn)儀器 伯樂(lè)酶標(biāo)儀、KJ-201BD型水平旋轉(zhuǎn)搖床（江蘇康健醫(yī)療用品有限公司）、洗板機(jī)、振蕩器。ELISA試劑盒（上海科華生物工程股份有限公司）、TRUST試劑盒（深圳寶安康生物有限公司）。上述兩種試劑均在有效期使用。

1.2.2 檢驗(yàn)方法 采集患者清晨空腹靜脈血3-5 mL，將采集樣本放入試管中，靜置30 min然后給予離心處理，轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)/min，時(shí)間為10 min，分離血清靜置于低溫冰箱中待測(cè)。在檢驗(yàn)之前，需提前取出血液樣本，靜置到室溫。

甲組患者采用ELISA法進(jìn)行檢驗(yàn)，即將100 μL血液樣本加入樣板孔中，分別設(shè)置對(duì)照組、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照，于37oC恒溫箱中孵育1 h，之后在陰性對(duì)照孔、陽(yáng)性對(duì)照孔、樣本孔分別加入100 μL酶標(biāo)記物，充分混勻，于37oC恒溫箱中孵育30 min，洗板后向樣板孔中加入100 μL底物緩沖液，充分混勻，于37oC恒溫箱中孵育30 min，然后向樣板孔中加入50 μL終止液，充分混勻，利用酶免儀讀數(shù)。

乙組患者采用TRUST法進(jìn)行檢驗(yàn)，即將50 μL血液樣本加入卡片圈中，搖勻抗原液，經(jīng)由試劑盒孔內(nèi)加入1滴抗原液，之后將卡片置于水平旋轉(zhuǎn)搖床上進(jìn)行振蕩，速度為100轉(zhuǎn)/min，時(shí)間為8 min，于3 min內(nèi)亮光下觀(guān)察。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 對(duì)兩組檢驗(yàn)準(zhǔn)確性、靈敏性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 在專(zhuān)業(yè)軟件SPSS 20.0中輸入本研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組患者檢驗(yàn)準(zhǔn)確性 甲組患者檢驗(yàn)準(zhǔn)確性為95.71%，乙組患者檢驗(yàn)準(zhǔn)確性為85.71%，甲組顯著高于乙組（χ2=4.67，P＜0.05）。

表1 比較兩組患者檢驗(yàn)靈敏性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值

2.2 比較兩組患者檢驗(yàn)靈敏性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值 甲組患者檢驗(yàn)靈敏性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為95.71%、97.50%、92.86%、98.53%，乙組患者檢驗(yàn)靈敏性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為85.71%、92.50%、78.72%、95.24%，甲組檢驗(yàn)靈敏性、陰性預(yù)測(cè)值均高于乙組，數(shù)據(jù)比較差異顯著（P＜0.05），而兩組檢驗(yàn)特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值數(shù)據(jù)對(duì)比差異不顯著（P＞0.05），詳見(jiàn)表1所示。

3 討論

梅毒感染的病原體主要為梅毒螺旋體，其侵入機(jī)體之后就會(huì)形成抗菌體非特異性抗體。在臨床中，非特異性抗體的檢驗(yàn)難度較大，多是在晚期檢出，且誤診率與漏診率較高[3]。所以，臨床應(yīng)積極探索更加快速、準(zhǔn)確、有效的檢驗(yàn)方法，以此為梅毒的早診斷、早治療提供可靠保障。

目前，TRUST法、ELISA法是檢測(cè)梅毒的主要方法。前者操作簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉，但易受到主觀(guān)因素的干擾[4]。后者主要就是利用雙抗原夾心法原理檢測(cè)血清特異性抗體，能夠最大限度的削弱主觀(guān)因素干擾，診斷準(zhǔn)確性更高。由此可以看出，在梅毒檢測(cè)中，可用TRUST法進(jìn)行初步篩查，之后用ELISA法予以進(jìn)一步確診[5]。本研究結(jié)果顯示：甲組檢驗(yàn)準(zhǔn)確性、靈敏性、陰性預(yù)測(cè)值均高于乙組，數(shù)據(jù)比較差異顯著（P＜0.05），而兩組檢驗(yàn)特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值數(shù)據(jù)對(duì)比差異不顯著（P＞0.05）。此研究結(jié)果與有關(guān)報(bào)道[6-7]的研究結(jié)果十分接近，由此說(shuō)明，ELISA法檢測(cè)梅毒的準(zhǔn)確性更高，有助于進(jìn)一步提高梅毒篩查率，減少漏診與誤診，臨床應(yīng)用價(jià)值非常高。

綜上所述，在梅毒檢驗(yàn)中，ELISA法的準(zhǔn)確性、靈敏性更高，適用于大樣本梅毒篩查，值得臨床進(jìn)一步研究與推廣應(yīng)用。