慢性乙肝患者血漿同型半胱氨酸測定及其與肝纖維化程度的相關性研究*

廣東醫科大學附屬第三醫院（佛山市順德區龍江醫院） （廣東 佛山 528300）

侯有磯 陸中奎 鄧勇瑩

慢性乙肝是臨床感染科較為常見的一類傳染性疾病，可通過血液、母嬰垂直傳播及性接觸等方式進行傳染，患者普遍出現肝細胞炎癥損傷及纖維化等情況，臨床表現為乏力、惡心、畏食等癥狀，嚴重影響其生活質量[1]。研究表明，慢性乙肝患者體內血漿同型半胱氨酸(Hcy)水平較正常值顯著升高，其水平與肝功能障礙有著密切聯系，而肝纖維化指標均可反映患者肝細胞受損程度，若可通過評估以上生化指標進而判斷患者肝纖維化程度，則可避免穿刺活檢對患者機體的創傷[2]。近年來，有關血漿Hcy水平在心腦血管疾病中的臨床意義得到廣泛研究[3]，但有關慢性乙肝患者該指標的意義研究報道鮮少。本研究旨在探究慢性乙肝患者血漿同型半胱氨酸(Hcy)測定及其與肝纖維化程度的相關性，取得一定成果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 研究對象：隨機選取2017年1月～2019年1月于我院接受治療的60例慢性乙肝患者為觀察組，符合《慢性乙型肝炎特殊患者抗病毒治療專家共識》[4]中慢性乙肝診斷標準：血清乙肝表面抗原(HBsAg)陽性時間＞6個月，且乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)呈現陰性，乙肝病毒脫氧核糖核酸(HBV DNA)＞1×105，丙氨酸氨基轉移酶(ALT)水平為正常值的2-10倍，納入標準：①經病理學穿刺活檢或實驗室檢查確診并分期者；②自愿簽署知情同意書者；③臨床各項檢查資料完整者。排除標準：①合并心、腦等器官病變者；②近3個月內曾服用影響Hcy水平的藥物者；③意識及溝通障礙者。隨機選取同期接受體檢的自愿者30例為健康對照組，本研究已獲得醫院倫理會員會批準。觀察組男36例，女24例，年齡35-66歲，平均年齡(47.52±2.17)歲，病程4-15年，平均病程(9.41±2.72)年；健康對照組男19例，女11例，年齡34-65歲，平均年齡(48.21±3.14)歲。兩組對象性別、年齡比較差異不顯著(P均＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 肝纖維化分級方法：通過DU8-M6全數字彩色多普勒超聲診斷儀(徐州市瑞華電子科技發展有限公司)進行肝臟定位掃描，使用16G巴德活組織檢查針進行穿刺活檢，獲得肝細胞1.0cm-1.5cm長的組織，使用10%的甲醛溶液進行固定，隨后石蠟包埋切片，常規HE染色及網織纖維染色，由兩位臨床醫師進行閱片判斷，參考《病毒性肝炎防治方案》[5]中的有關標準，并通過Metavir評分系統將其分為無纖維化組(S0期)、輕纖維化組(S1-S2期)、中度纖維化組(S3期)及重度纖維化組(S4期)。

1.2.2 指標檢測方法：行常規靜脈采血5mL置于抗凝管，以3000r/min離心血樣10min，及時提取血漿,采用酶聯免疫吸附法測定血漿Hcy水平；采用放射免疫法測定透明質酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)水平。

1.3 觀察指標 比較觀察組、健康對照組及觀察組不同肝纖維化程度受試者血漿Hcy及肝纖維化指標[HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C]水平差異；經Spearman等級相關分析慢性乙肝患者肝纖維化程度與血漿Hcy水平、肝纖維化指標(HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C)的相關性。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件分析數據，計量資料用(±s)表示，多組間采用單因素方差分析，統計學有意義的結果進一步采用SNK-q檢驗；相關性采用spearman分析法，以P＜0.05時為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 觀察組患者肝纖維化程度分級情況 應用分級標準將觀察組患者根據肝纖維化程度分為無纖維化組(n=12)、輕纖維化組(n=22)、中度纖維化組(n=18)及重度纖維化組(n=8)。

表1 兩組血漿Hcy、血清肝纖維化指標水平比較（±s）

表1 兩組血漿Hcy、血清肝纖維化指標水平比較（±s）

組別 血漿Hcy(μmol/L) HA(ng/mL) LN(ng/mL) PCⅢ(ng/mL) Ⅳ-C(ng/mL)觀察組（n=60） 20.04±3.26 345.26±41.52 215.34±42.31 175.21±41.06 249.15±53.64健康對照組（n=30） 9.58±2.59 65.23±16.34 110.26±19.24 96.35±21.04 61.04±18.36 t值 15.310 35.510 12.924 9.872 18.625 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血清肝纖維化指標水平比較（±s）

表2 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血清肝纖維化指標水平比較（±s）

注：與無纖維化組比較，a P＜0.05；與輕度纖維化組比較，b P＜0.05，與中度纖維化組比較，c P＜0.05

組別 n 血漿Hcy（μmol/L） HA（ng/mL） LN（ng/mL） PCⅢ（ng/mL） Ⅳ-C（ng/mL）無纖維化組 12 12.14±2.06 256.38±26.34 152.34±26.31 121.36±32.49 176.39±46.25輕度纖維化組 22 15.26±3.01 a 305.24±36.59 186.34±31.06 a a 150.26±35.29 ab 221.02±43.01 ab中度纖維化組 18 21.04±3.42 ab 342.15±40.16 ab 210.04±40.16 ab 186.24±42.16 ab 260.14±48.51 ab重度纖維化組 8 24.01±2.19 abc 384.16±53.29 245.26±53.28abc 220.15±53.68abc abc 306.24±52.23abc F值 40.553 21.266 11.860 12.721 14.982 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 觀察組及健康對照組血漿Hcy、血清肝纖維

化指標水平比較 觀察組患者血漿Hcy、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平均明顯高于健康對照組(P＜0.05)，見表1。

2.3 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血

清肝纖維化指標水平比較 經檢測，觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平組間比較有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.4 相關性分析 經Spearman等級相關分析，慢性乙肝患者血漿Hcy水平及HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平與肝纖維化程度具有正相關性(P＜0.05)，見表3。

表3 慢性乙肝患者肝纖維化程度與血漿Hcy、血清肝纖維化指標水平的相關性分析

3 討 論

現階段主要采用病理學穿刺活檢的方式進行肝纖維化程度判斷，但考慮到該項技術是一項有創檢查，不易被患者接受，因此，利用生化指標進行評估成為現臨床研究熱點[6]。

動物學研究表明，血漿Hcy的代謝與肝臟密不可分，且該指標水平顯著上升同樣會促進超氧化合物含量的增加，導致酶基因突變等，加重肝臟細胞損 傷[7]。本研究結果顯示，慢性乙肝患者體內血漿Hcy水平確顯著高于健康對照組，與以往報道結果一 致[8]，且隨著肝纖維化程度的加重，其血漿Hcy水平明顯升高。分析原因，可能是因為血漿Hcy是一類含硫氨基酸，不屬于組成人體蛋白質的20中氨基酸，人體內無法直接合成，是蛋氨酸或半胱氨酸代謝過程中的產物之一，主要通過葉酸循環途徑，在蛋氨酸合成酶的催化下，由甲基四氫葉酸及維生素B12作為輔助因子的條件下生成，或通過β2胱硫醚合成酶催化，在肝臟內代謝產生，又或者將甜菜堿作用甲基供體，在轉移酶的作用下轉化為蛋氨酸，且轉化過程僅限于肝細胞內，其含量受肝細胞損傷影響[9]。

結果顯示隨著肝纖維化程度的加重，其HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平同樣顯著上升，分析原因，可能是因為正常生理情況下，肝臟中細胞外基質主要位于肝包膜、肝臟細胞表面等部位，其主要成分包括HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C等，總量屬于平衡狀態，而一旦肝臟細胞收到損害時，內皮細胞及星狀細胞被激活，在細胞因子的作用下分泌膠原纖維，自身轉化為成纖維細胞，且伴隨著基質合成沉積，進而導致肝纖維化，若不及時治療，則隨著病情的惡化，即可發展為肝硬化[10]。且慢性乙肝患者血漿Hcy水平與HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平具有顯著正相關性，均隨著肝纖維化程度的加重而升高，提示，慢性乙肝患者病情由輕度到重度發展，其肝損害程度越發加重，導致蛋氨酸代謝改變，肝細胞外基質合成降解失衡，引起血漿Hcy水平與肝纖維化指標變化，但有關兩者相互作用機制，臨床尚未給出明確解釋。

綜上所述，慢性乙肝患者體內血漿Hcy水平明顯高于健康對照組，且隨著肝纖維化程度的加重，其血漿Hcy水平與肝纖維化指標均顯著上升，呈現顯著正相關，聯合檢查可反映慢性乙肝患者肝細胞受損程度。