Y染色體長臂異染色質區延長對輔助生殖妊娠結局和新生兒健康情況的影響

范麗娟，薛冰，程燕，朱愛珍*

(1.西北婦女兒童醫院輔助生殖中心，西安 710003；2.運城市中心醫院生殖醫學科，運城 044000)

Y染色體是人類最小的染色體，其在男性性別分化和精子發生中起重要作用[1-2]。Y染色體長臂大部分由異染色質組成，容易發生長度變異[3]。Y染色體長臂末端的異染色質區延長(Yqh+)是臨床較常見的男性染色體結構變異，長期以來被認為是一種正常的多態現象，沒有任何的功能和表型[4-5]。然而，也有研究報道Yqh+在不育男性中的發生率約為6.8%，顯著高于生育力正常男性(發生率3.74%)[6]；Yqh+不育男性接受體外受精/卵胞漿內單精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治療后受精率、著床率和臨床妊娠率較染色體正常不育男性更低[7-8]。目前尚無Yqh+患者子代健康情況的報道。因此，我們進行了一項單中心回顧性研究，探討男性染色體Yqh+對IVF/ICSI-ET妊娠結局和新生兒健康情況的影響。

資料與方法

一、研究對象

收集2014年1月至2017年12月就診于西北婦女兒童醫院輔助生殖中心，接受IVF/ICSI-ET助孕治療的患者為研究對象。按照嚴格的納入標準和排除標準，共納入1 705對夫妻。

納入標準：(1)所有周期均為第1次治療周期，女方促排卵方案為GnRH-a降調節方案或拮抗劑方案；(2)夫妻雙方均進行染色體核型檢測，排除夫妻雙方合并其它性染色體或常染色體異常病例；(3)所有患者在進行助孕治療前均經過體格檢查、內分泌相關檢查、遺傳學檢查，男方至少進行兩次精液分析。排除標準：(1)合并存在嚴重的生殖系統疾病及異常者，如男方存在重度精索靜脈曲張、隱睪癥，女方存在嚴重的子宮內膜異位癥等；(2)男方重度少精子癥(精子計數<5×106活動精子/ml)和無精子癥患者均行Y染色體微缺失檢查，具有Y染色體微缺失的男性；(3)供精治療周期以及采用微刺激促排卵、黃體期促排卵和高孕激素狀態下促排卵的周期。

根據人類染色體方法學進行染色體核型檢測，將最終入組病例分為Yqh+組(男方檢測到Yqh+，67例)和對照組(男方未檢測到Yqh+，1 638例)；又根據受精方式不同，分別比較IVF助孕周期和ICSI助孕周期中Yqh+組和對照組患者的一般情況、妊娠結局及新生兒出生情況。

二、研究方法

1.IVF/ICSI-ET：促排卵方案為GnRH-a降調節方案和拮抗劑方案。當2/3以上優勢卵泡直徑發育至17 mm時用重組HCG(默克雪蘭諾，意大利)或人源HCG(珠海麗珠醫藥)扳機。34～36 h后，在陰道B超引導下經陰道穿刺負壓抽吸取卵術，記錄獲卵數。女方取卵當日，男方取精，根據不同精液參數標準，選擇IVF或ICSI人工授精。根據女方年齡、身體條件、獲卵數、性激素水平、子宮內膜厚度和胚胎級別等因素決定在取卵后第3天(或第5天)進行胚胎(或囊胚)移植。黃體支持方案為取卵日開始每日肌肉注射黃體酮(浙江仙琚)60 mg，同時每日口服地屈孕酮(雅培，美國)20 mg。胚胎移植后第14天(或囊胚移植后第12天)測血HCG。胚胎移植后第28天(或囊胚移植后第26天)行盆腔超聲檢測，B超下見孕囊即為臨床妊娠。孕11周停止黃體支持。

2.授精方式選擇：按照世界衛生組織(WHO)《人類精液實驗室檢查及處理》第5版標準，根據患者的精液分析結果選擇不同的助孕方法：當前向運動精子(即a+b級)計數>5×106個/ml時納入IVF治療周期；當前向運動精子計數<5×106個/ml時納入ICSI治療周期。

3.染色體核型檢測：抽取外周血淋巴細胞培養后行標準G顯帶分析染色體核型。計數20個細胞中期分裂相，分析5個核型，異常者加倍計數、分析。按照《人類細胞遺傳學國際命名制(ISCN，2009)》進行核型描述及診斷，以Y染色體長臂異染色質區長度增加定義為Yqh+。

4.隨訪：隨訪期限為嬰兒出生后1年。

三、觀察指標及計算方法

主要觀察指標包括妊娠率、活產率和新生兒出生健康情況；次要觀察指標包括正常受精率、卵裂率、胚胎種植率、HCG陽性率、異位妊娠率、流產率、持續妊娠率和新生兒Apgar評分、新生兒性別比例等[9]。

其中HCG陽性率=HCG陽性周期數/移植周期數×100%；IVF正常受精率=第1天(D1)出現2PN卵子數/IVF加精卵子總數×100%；ICSI正常受精率=D1出現2PN卵子數/注射MⅡ卵子總數×100%；卵裂率=卵裂胚胎數/受精卵子數×100%；胚胎種植率=種植胚胎數/移植胚胎數×100%；臨床妊娠率=臨床妊娠周期數/移植周期數×100%；持續妊娠率=妊娠持續到20周以后周期數/臨床妊娠周期數×100%；活產率=活產周期數/新鮮移植周期數×100%；流產率=流產周期數/臨床妊娠周期數×100%；異位妊娠率=異位妊娠周期數/臨床妊娠周期數×100%；出生缺陷率=出生缺陷嬰兒數/活產嬰兒數×100%。

四、統計學分析

統計分析采用SPSS 13.0軟件進行。計量資料比較采用t檢驗，計數資料比較采用卡方檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、納入患者的整體情況

在本研究納入的1 705對夫妻中，男方Yqh+共67例(Yqh+組)，對照組1 638例。Yqh+組中有36例患者(53.73%)依據個人精液分析結果選擇IVF治療周期，31例(46.27%)選擇ICSI治療周期；對照組中877例患者(53.54%)選擇IVF周期，761例(46.46%)選擇ICSI周期。

二、IVF治療周期中Yqh+組和對照組的妊娠結局及新生兒出生情況比較

1.一般資料比較：IVF治療周期中Yqh+組和對照組間的男方年齡、女方年齡、體重指數(BMI)、基礎FSH和LH水平比較無顯著性差異(P>0.05)。IVF治療周期中兩組間扳機日血清E2水平和獲卵數比較無顯著性差異(P>0.05)。Yqh+組和對照組的正常受精率[(59.43±16.84)% vs.(56.74±19.33)%]、卵裂率[(81.49±14.69)% vs.(81.73±2.63)%]比較亦無顯著性差異(P>0.05)(表1)。

表1 IVF治療周期中Yqh+組與對照組一般情況比較[(-±s)，n(%)]

2.新鮮周期妊娠結局比較：IVF治療周期中分別有17例Yqh+組患者和502例對照組患者行新鮮周期移植。兩組患者新鮮周期移植前子宮內膜厚度和血清孕酮(P)水平比較無顯著性差異(P>0.05)。Yqh+組的HCG陽性率(52.94% vs. 63.94%)、胚胎種植率(43.48% vs. 47.90%)、臨床妊娠率(52.94% vs. 60.96%)、持續妊娠率(88.89% vs. 94.12%)均略低于對照組，但無顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組流產率有高于對照組的趨勢(11.11% vs. 5.23%)，但無顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組的異位妊娠率顯著高于對照組(11.11% vs. 1.63%)(P=0.04)。Yqh+組活產率略低于對照組(41.18% vs. 54.18%)，但無顯著性差異(P>0.05)(表2)。

表2 IVF治療Yqh+組與對照組新鮮周期妊娠結局比較[(-±s)，%]

注：與對照組比較，*P<0.05

3.新生兒出生情況比較：IVF治療周期中Yqh+組共出生7例新生兒，對照組出生338例新生兒。兩組患者新生兒Apgar評分和出生缺陷率比較無顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組的男嬰出生率略高于對照組(85.71% vs. 51.78%)，但無顯著性差異(P>0.05)(表3)。

表3 IVF治療周期Yqh+組與對照組新生兒出生情況比較[(-±s)，%]

三、ICSI治療周期中兩組妊娠結局和新生兒出生情況比較

1.一般資料比較：ICSI治療周期中Yqh+組和對照組間的男方年齡、女方年齡、BMI、基礎FSH和LH水平比較均無顯著性差異(P>0.05)。ICSI治療周期中兩組患者扳機日血清E2水平、獲卵數、正常受精率和卵裂率比較均無顯著性差異(P>0.05)(表4)。

2.新鮮周期妊娠結局比較：ICSI治療周期中分別有19例Yqh+組患者和460例對照組患者行新鮮周期移植。兩組患者新鮮周期移植前內膜厚度和血清P水平比較無顯著性差異(P>0.05)；與對照組比較，Yqh+組的HCG陽性率、胚胎種植率、臨床妊娠率、持續妊娠率、流產率、異位妊娠率、活產率均無顯著性差異(P>0.05)(表5)。

表4 ICSI治療周期Yqh+組與對照組一般情況比較[(-±s)，n(%)]

表5 ICSI治療周期Yqh+組與對照組妊娠結局比較[(-±s)，%]

3.新生兒出生情況比較：ICSI治療周期中Yqh+組共出生15例新生兒，對照組出生329例新生兒。兩組患者新生兒Apgar評分和出生缺陷率比較無顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組男嬰出生率略高于對照組(66.67% vs. 52.58%)，但尚無顯著性差異(P>0.05)(表6)。

表6 ICSI治療周期Yqh+組與對照組新生兒出生情況比較[(-±s)，%]

討 論

Yqh+的臨床意義一直存在爭議。1987年Hsu等[10]首先報道了Yqh+是一種正常的染色體多態性，因為異染色質區不能編碼蛋白[11-12]。但近年來越來越多研究發現男性染色體Yqh+可能與生育力下降有關[13-15]。2015年Li等[15]發現Yqh+男性無精子癥和少精子癥發病率高于非Yqh+男性。Xiao等[8]發現Yqh+者行IVF-ET助孕治療其受精率、著床率、臨床妊娠率顯著低于非Yqh+者。活產率和新生兒健康情況也是IVF助孕治療最關鍵的質控指標，但目前尚無Yqh+對IVF/ICSI-ET活產率和新生兒健康情況影響的研究。

本研究回顧性分析Yqh+組和對照組IVF/ICSI-ET助孕治療新鮮周期的妊娠結局和新生兒健康情況。在前述觀察指標中，Yqh+組和對照組的HCG陽性率、臨床妊娠率、活產率和新生兒出生健康情況等觀察指標比較均無顯著性差異(P>0.05)；僅在IVF治療周期中，Yqh+組異位妊娠率顯著高于對照組(P<0.05)，但這可能與納入樣本例數較少有關，尚需后續研究進一步研究探討。

值得注意的是，在IVF治療周期中，Yqh+組HCG陽性率、種植率、臨床妊娠率、持續妊娠率和活產率均略低于對照組。而在ICSI治療周期中，這種現象并未出現。這與Xiao等[8]的研究結果相似。Xiao等[8]曾報道在IVF治療周期中，Yqh+者種植率和臨床妊娠率均顯著低于非Yqh+者，而在ICSI治療周期中，Yqh+者種植率和臨床妊娠率與非Yqh+者比較無顯著性差異。因此Xiao等[8]認為Yqh+可能對男性生育能力有一定的影響；對于IVF治療結局不良的Yqh+不育者，采用ICSI方式人工授精可能會改善其助孕治療結局。

本研究結果顯示，在IVF治療周期和ICSI治療周期中，Yqh+組與對照組的新生兒出生健康情況比較無顯著性差異。本研究首次報道了Yqh+者的子代健康情況，結果顯示Yqh+可能對子代健康狀況無明顯影響。

綜上所述，Yqh+可能對IVF/ICSI-ET妊娠結局和新生兒健康情況無明顯影響。Yqh+是否增加IVF新鮮移植周期中異位妊娠的風險，尚需要更大樣本量和更具特異性的研究加以探討和驗證。