病理切片在闌尾寄生蟲感染診斷中的應用

曾賽凡，楊代興，陳余朋，張 聲

闌尾寄生蟲病感染的術前診斷比較困難，有時在組織病理檢查中可在腸腔內觀察到蟲體，但檢出率較低[1]。本實驗通過術后大體標本病理切片后行常規HE染色、特殊染色及免疫組化染色對闌尾腫瘤和寄生蟲感染進行鑒別，現介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2018年6月福建醫科大學附屬第一醫院病理科診斷的1例闌尾黏液囊腺瘤，送檢手術切除的腸管一段，切開可見腸腔及闌尾內有大量黏液。

1.2 方法 病理大組織取材后經10%中性福爾馬林固定24 h。大組織塊脫水透明浸蠟包埋后4～6 μm厚切片，行HE染色，選取鏡下黏液成分多的切片行AB-PAS、Gimesa特殊染色，免疫組化標記CAM5、CDX-2、CK14、EMA，以鑒別腫瘤成分，免疫組化染色采用EnVision兩步法，DAB顯色，鏡下觀察，具體操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行，抗體及工作液均購自福州邁新公司。

2 結果

HE染色：鏡下見炎癥細胞及黏液樣物，多量黏液及紅染片狀角質蛋白樣物形成類似花朵樣結構(圖1)；Gimesa染色：花朵樣結構明顯，致密且有規律性的排列，絮狀物呈放射狀(圖2)；AB-PAS染色：花朵中央呈現紅藍相間的顯色，外圍似花瓣呈現略嗜堿性淡紫色(圖3)；CAM5、CDX-2、CK14、EMA的免疫組化染色：黏液部分均未見陽性，呈現一致性的類似非特異性的背景著色(圖4)。綜合多種染色結果結合臨床病史及肉眼取材所見行病理診斷：闌尾組織呈慢性炎癥改變，闌尾腔擴大，腔內見多量黏液，Gimesa染色、AB-PAS染色及CAM5、CDX-2、CK、EMA免疫組化染色顯示類似花朵樣結構均與闌尾腺體上皮細胞的結構完全不同，結合臨床手術所見闌尾腫脹黏連，切面富含黏液。考慮闌尾寄生蟲病伴慢性闌尾炎及闌尾黏液囊腫形成。

①②③④

圖1 多量黏液及紅染片狀角質蛋白樣物形成大量類似花朵樣結構，HE 圖2 花朵樣結構明顯且有規律性的排列，絮狀物呈放射狀，Gimesa染色 圖3 花朵中央呈現紅藍相間，外圍似花瓣呈現略嗜堿性淡紫色，AB-PAS染色 圖4 免疫組化黏液樣物非特異性著色：黏液部分均未見陽性，呈現一致性的類似非特異性的背景著色，EnVision兩步法

3 討論

考慮有寄生蟲感染的標本切片時厚薄相結合，建議行大組織切片包含腸腔和黏液樣物一整塊取材，可以觀察黏液對腸腔的侵犯以及腸腔結構的改變。黏液放置水中展片容易產生皺褶，所以溫度控制在40 ℃可以讓切片溫和平整的展開。烤片之前放置空氣中讓玻片上的水分揮發以使切片牢固黏附，染色時單獨染色以免黏液脫落污染其他切片。初步考慮寄生蟲感染的病例需第一時間復查標本肉眼所見，借助解剖顯微鏡等剝離送檢標本，檢查有無細小的蟲體或蟲卵，必要時還可取出該蠟塊，對比切片，切下蟲體所在的部位，溶蠟后取出殘留的蟲體[2]。本例中的闌尾寄生蟲未見到明顯的蟲體和蟲卵結構，無法確認寄生蟲的類別。闌尾寄生蟲一般停留在盲腸內，從腸壁內的血液、上皮及有機物中吸取營養[3]，所以本例的首發癥狀是回盲部形成腫物。但免疫組化標記上皮細胞和腫瘤細胞在黏液樣物部位均無表達，HE染色鏡下見有核細胞少，大部分是均質黏液樣，闌尾黏膜上皮完整，形態正常。所以可以明確回盲部腫物并非腫瘤。從HE、Gimesa到AB-PAS染色，黏液樣部位呈現規則性的放射狀排列，而且花朵樣結構越發明顯，所以高度懷疑闌尾寄生蟲感染，腺腔細胞形態和黏液物部位形成了鮮明對比，疑似寄生蟲部分非人體正常結構，外圍有一圈細胞，中間類似分泌物呈黏液樣，該結構在免疫組化中未見任何表達，形成非特異性著色排列。有可能是寄生蟲產生大量的黏液樣分泌物引起了囊腫，此類的闌尾黏液囊腫為單純的黏液分泌潴留，不存在產生黏液腺上皮細胞向囊內乳頭樣或腺樣增生。腸道寄生蟲引起慢性闌尾炎，在慢性闌尾炎的基礎上黏液分泌亢進，導致闌尾黏液囊腫。隨著寄生蟲的持續存在刺激，腸道黏液分泌不斷增加，囊腫擴大，甚至囊壁破裂引起腹膜腔臟器黏連，形成巨大炎性包塊，即腫瘤樣變性，行腸管切除術解除占位，患者術后1年隨訪狀態良好，無復發跡象。

通過病理切片和多種染色的聯合運用，對罕見的闌尾寄生蟲病可起到鑒別作用。但對于組織結構中寄生蟲的類別區分還需積累要多病例，尤其對于蟲體或蟲卵形態學結構不明顯的病例可行分子標記技術精確區分寄生蟲的種類[4]。