細(xì)胞塊切片與常規(guī)細(xì)胞涂片免疫組化染色在胸腔積液病診斷中的價值

王雙珠，王 敏

常規(guī)細(xì)胞涂片檢測胸腔積液病敏感度相對較低(50%～78%)，不能清晰鑒別漿膜腔原發(fā)性間皮性腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌，可能與兩者細(xì)胞形態(tài)十分相似有關(guān)[1]。準(zhǔn)確區(qū)分轉(zhuǎn)移性癌與間皮性腫瘤可有助于臨床醫(yī)師選擇精準(zhǔn)、有效的治療方式[2]，近年細(xì)胞塊切片免疫組化染色法越來越受到重視，其在鑒別間皮性腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌的敏感度較高，獲得臨床醫(yī)師的青睞[3]。本文著重探討胸腔積液病的細(xì)胞塊切片與常規(guī)細(xì)胞涂片免疫組化染色的臨床運用價值，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集2017年1月～2018年5月浙江省臺州醫(yī)院診治患有胸腔積液病的患者72例，隨機分為實驗組(36例)與對照組(36例)，其中實驗組男性18例，女性18例，患者年齡15～75歲，平均(41.38±4.29)歲；對照組男性19例，女性17例，年齡16～77歲，平均(42.07±5.22)歲。入選患者均已簽署知情同意書，比較實驗組與對照組患者的臨床資料(性別、年齡等)，差異無顯著性。

1.2 方法

1.2.1 制作 對照組在治療過程中采用常規(guī)細(xì)胞涂片法進(jìn)行檢測，實驗組則采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法進(jìn)行檢測，患者均于早上空腹?fàn)顟B(tài)下取50 mL胸腔積液，將其分裝于5個試管中，對其展開離心處理，離心轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，時間為15 min。離心工作完成后，采用移液槍吸出上清液，從沉渣取部分液體給予細(xì)胞涂片學(xué)檢查，剩下的沉渣則加入戊二醛(2.5 mL)，使其固定后再以3 000 r/min離心5 min，二次離心后運用移液槍吸出上清液，取出沉渣，包于濾紙中，在給予常規(guī)脫水后實施石蠟包埋切片，所有細(xì)胞塊切片與細(xì)胞涂片分別給予免疫組化染色和HE染色。

1.2.2 HE染色 由兩位經(jīng)驗豐富的高級職稱病理醫(yī)師進(jìn)行觀察，依照標(biāo)本中細(xì)胞的黏除性、形態(tài)、核不典型性進(jìn)行判斷，若有反應(yīng)性增生間皮細(xì)胞出現(xiàn)，無不典型性且細(xì)胞彌散性佳判斷為良性，其細(xì)胞呈團(tuán)狀，核有強烈的不典型性以及細(xì)胞形態(tài)極為不溫和評定為惡性，若細(xì)胞呈彌散狀，核為中度或重度不典型判斷為不確定[4]。

1.2.3 免疫組化染色 采用免疫組化SP法染色，抗體CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1與DAB顯色試劑，均購自福州邁新公司；具體操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) TTF-1、WT-1陽性為細(xì)胞核呈棕黃色，CD15陽性為細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜呈棕黃色，CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、BerEP陽性為細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色，Calretinin陽性為細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核均呈棕黃色[5]。

2 結(jié)果

比較兩組陽性檢測率，實驗組陽性檢測率為100.00%(36/36)；對照組陽性檢測率為75.00%(27/36)，兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

對比實驗組與對照組病理診斷，結(jié)果顯示：分型診斷惡性胸腔積液采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色檢測的符合率較高，經(jīng)組合性抗體檢測轉(zhuǎn)移性肺腺癌中CEA、CK7、TTF-1、CD15、BerEP、MOC-31均呈高表達(dá)，惡性間皮瘤中desmin、Calretinin、CK5/6及WT-1均呈高表達(dá)，常規(guī)細(xì)胞涂片檢測明顯低于細(xì)胞塊切片免疫組化染色，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，表1)。

表1 實驗組與對照組病理診斷結(jié)果分析

3 討論

臨床治療中，醫(yī)師要想精準(zhǔn)的為患者制定治療方案，必須清晰的區(qū)分轉(zhuǎn)移性癌與間皮性腫瘤的性質(zhì)[6]。免疫組化染色法操作簡單可行，定位陽性物質(zhì)較準(zhǔn)確，有較強的特異性。此外，細(xì)胞塊的運用還能有效填補細(xì)胞涂片檢測法的單一性缺點，其可以讓細(xì)胞標(biāo)本得到較好保存，并可連續(xù)切片展開多項檢查[7]。

本實驗中對照組患者在治療過程中采用常規(guī)細(xì)胞涂片法進(jìn)行檢測，實驗組患者則采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法進(jìn)行檢測，抗體包括CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1等，鑒別胰腺癌與間皮性腫瘤。結(jié)果表明，細(xì)胞塊切片免疫組化染色法具有特異性，同時敏感性也優(yōu)于常規(guī)細(xì)胞涂片法。這是因為細(xì)胞塊能夠均勻分布，可以將脫落細(xì)胞的具體形態(tài)結(jié)構(gòu)完整保存下來，在鑒別診斷中可以明顯分辨出細(xì)胞的形態(tài)特征。然而，常規(guī)細(xì)胞涂片由于細(xì)胞分布不均勻，易使細(xì)胞產(chǎn)生重疊，使細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)顯現(xiàn)不清晰，不利于鑒別胸腔積液病[8]。細(xì)胞涂片易產(chǎn)生數(shù)據(jù)差異以及厚薄不勻的現(xiàn)象，產(chǎn)生高背景著色形成假陽性，易導(dǎo)致誤診。此外，細(xì)胞涂片因陽性細(xì)胞未有具體化的對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，在判斷時也會相應(yīng)的增加其難度。與細(xì)胞涂片檢測法相比，細(xì)胞切片免疫組化染色法的優(yōu)點很明顯，如防止假陽性出現(xiàn)、細(xì)胞分布十分均勻、陽性表達(dá)觀察度較高等[9]。

綜上所述，運用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法能夠有效預(yù)防誤、漏診，對判斷漿膜腔積液的細(xì)胞性質(zhì)與類型效果顯著。總之，在適當(dāng)?shù)目贵w組合下，細(xì)胞塊切片聯(lián)合免疫組化染色檢測胸腔積液對診斷間皮瘤以及肺腺癌等腫瘤的效果值得肯定，具有臨床推廣價值。