亞低溫聯(lián)合促紅細(xì)胞生成素檢測對缺氧缺血性腦病新生兒血清炎性因子和腦組織損傷標(biāo)志物的影響

楊昭君，朱法榮

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)是患兒在圍生期窒息引起的腦組織部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停，導(dǎo)致的患兒腦部受損，該病易引起患兒出現(xiàn)各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡[1]。據(jù)報(bào)道，全球新生兒HIE發(fā)生率為0.1%～0.3%，占新生兒死亡的22%[2]；我國新生兒HIE發(fā)生率為0.3%～0.6%，高于全球發(fā)病水平，死亡率為15%～20%，而25%～30%存活患兒伴有腦癱、智力低下、癲癇等疾病[3]。因此，有效控制HIE患兒死亡及預(yù)防后遺癥發(fā)生是HIE治療的關(guān)鍵。高壓氧治療和亞低溫治療是臨床常用的兩種物理治療方法，但是高壓氧壓力和時(shí)間等指標(biāo)若控制不當(dāng)，則可能對患兒的視網(wǎng)膜發(fā)育造成損害[4]。亞低溫治療對新生兒HIE是一種安全有效的方法，但仍有40%以上接受亞低溫治療的新生兒發(fā)生中度或重度神經(jīng)功能缺損甚至死亡，尚需更深入的研究來提高亞低溫治療新生兒HIE的臨床療效[5-6]。促紅細(xì)胞生成素(EPO)是一種影響紅細(xì)胞生成的細(xì)胞因子，能夠促進(jìn)血管生成，對腦損傷神經(jīng)具有一定的保護(hù)作用，可促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育，但臨床上關(guān)于亞低溫聯(lián)合EPO對新生兒HIE療效、血清炎性因子及腦組織損傷標(biāo)志物影響的研究較少。本研究觀察亞低溫治療聯(lián)合EPO對新生兒HIE的臨床療效、細(xì)胞因子和腦組織損傷指標(biāo)的影響，為臨床治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年1月—2017年1月收治的新生兒HIE 136例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組(68例)和對照組(68例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒均符合2005年中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)新生兒組修訂的新生兒HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；胎齡≥35周，且出生體重≥2 kg；出生后6 h內(nèi)，存在神經(jīng)性腦病的臨床表現(xiàn)；患兒家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重顱內(nèi)出血或顱骨骨折者；先天性異常或遺傳代謝性疾病者；嚴(yán)重感染性疾病者；母親具有吸毒史者；放棄治療者。兩組患兒的胎齡、性別、出生體重、Apgar評分、臨床分度和分娩方式等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。

1.2 方法 對照組患兒在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，給予亞低溫治療；觀察組給予亞低溫聯(lián)合EPO治療。患兒出生6 h內(nèi)，應(yīng)用德國Allon體溫調(diào)節(jié)系統(tǒng)進(jìn)行亞低溫治療，給患兒放置低溫墊，根據(jù)患兒體溫設(shè)定初始溫度，每10 min測定1次肛溫，使患兒肛溫在1 h內(nèi)達(dá)到(33.5±0.5)℃，維持72 h后自然復(fù)溫，如果6 h后患兒體溫仍未恢復(fù)至36 ℃，則用遠(yuǎn)紅外輻射進(jìn)行復(fù)溫。EPO治療，每次300 U/ kg，2 d 1次，連續(xù)治療6次，首次采用皮下注射，以后改為靜脈注射。

1.3 樣本采集及檢測 在治療前后，分別采集患兒靜脈血5 mL，按照3 000 r/min速度離心10 min，吸取上清液，檢測細(xì)胞因子血清炎性因子白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腦組織損傷指標(biāo)血清S100β蛋白、髓鞘堿性蛋白(MBP)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)水平的變化情況。血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β蛋白水平采用Elisa法，檢測所有指標(biāo)嚴(yán)格按照相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4 療效評定標(biāo)準(zhǔn)[8]根據(jù)患兒治療后癥狀、體征及神經(jīng)評分法(NBNA)評分評定。 顯效：治療后神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及相關(guān)體征完全消失，NBNA評分≥35分；有效：治療后臨床癥狀及體征有所改善，NBNA評分≥30分；無效：治療后臨床癥狀體征未改善或者加重，NBNA評分<30分。

1.5 不良反應(yīng) 觀察兩組患兒治療期間不良反應(yīng)情況。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床療效比較 治療后觀察組臨床療效高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.755，P=0.029)。詳見表1。

表1 兩組臨床療效比較 單位： 例(%)

2.2 兩組血清炎性因子水平比較 治療前，兩組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平較治療前均明顯下降(P<0.05)，而且觀察組血清IL-6、IL-10和TNF-α水平明顯低于對照組(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血清炎性因子水平比較(±s)

2.3 兩組腦組織損傷指標(biāo)比較 治療前，兩組血清NSE、MBP和S100β水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組血清NSE、MBP和S100β水平較治療前均明顯下降(P<0.05)，而且觀察組血清NSE、MBP和S100β水平明顯低于對照組(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組腦組織損傷指標(biāo)比較(±s)

2.4 兩組不良反應(yīng) 兩組患兒治療期間未見明顯的不良反應(yīng)。

3 討 論

HIE發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，具體機(jī)制尚不明確，但有研究認(rèn)為該病的發(fā)生與急性炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，并且受到多種細(xì)胞因子、神經(jīng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響，引起患兒腦組織病理性損害[9]。當(dāng)缺血性損傷發(fā)生時(shí)，機(jī)體釋放多種細(xì)胞因子和趨化因子，引起炎癥反應(yīng)，造成炎性因子向腦損傷部位遷移，進(jìn)一步加劇神經(jīng)元細(xì)胞損傷。

在HIE早期或急性期，血清IL-10水平會(huì)升高。IL-10作為抗炎性因子，能抑制小膠質(zhì)細(xì)胞和白細(xì)胞分泌TNF-α等細(xì)胞因子，并能抑制白細(xì)胞聚集和趨化因子產(chǎn)生，降低缺血后大腦遲發(fā)性損傷[10]。腦損傷早期TNF-α水平迅速上升，引起血腦屏障損傷或開放，誘發(fā)IL-6等細(xì)胞因子釋放，加速炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致腦細(xì)胞凋亡，從而加重腦損傷[11]。NSE是一種糖酵解酶，存在于神經(jīng)元、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)患兒發(fā)生缺氧缺血性腦損傷時(shí)，引起腦部能量明顯降低和各種不良神經(jīng)反應(yīng)，導(dǎo)致神經(jīng)元壞死及神經(jīng)末梢崩解，細(xì)胞質(zhì)中NSE進(jìn)入血液和腦脊液中，使得NSE大量釋放[12-13]。MBP作為一種堿性蛋白主要存在于少突神經(jīng)膠質(zhì)和髓鞘組織，正常情況下血清含量很少，當(dāng)腦組織缺氧缺血累及髓鞘時(shí)，引起髓鞘堿性蛋白釋放入腦脊液中；血腦屏障破壞或通透性發(fā)生改變，引起血清MBP水平大幅升高[14]。S100β蛋白由兩個(gè)β單位組成的二聚體，主要存在星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)膜細(xì)胞中，由于血-腦屏障的作用，血液中S100β蛋白水平極低，當(dāng)腦組織受到損傷時(shí)，血-腦屏障被破壞，腦脊液中S100β蛋白進(jìn)入血液循環(huán)，致使血液中S100β蛋白水平上升[15-16]。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療后觀察組臨床有效率明顯高于對照組(88.24% 與73.53%，P<0.05)；兩組血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β水平明顯低于治療前(P<0.05)；觀察組血清IL-6、IL-10、TNF-α、NSE、MBP和S100β水平明顯低于對照組(P<0.05)，說明亞低溫聯(lián)合促紅細(xì)胞生成素通過抑制HIE患兒的炎癥反應(yīng)，降低腦組織損傷，提高臨床療效。這是由于患兒體溫每降低1 ℃，腦部代謝率便可降低6.7%，當(dāng)患兒體溫降到33 ℃左右時(shí)，腦細(xì)胞耗氧量便可降低約33.33%，從而有效地減少機(jī)體腦細(xì)胞能量耗損，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少氧自由基生成，減輕腦組織缺氧缺血狀態(tài)，延緩神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生，并抑制IL-6、IL-10、TNF-α等炎性因子的釋放，緩解炎性損傷，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的功能[17]。EPO作為一種糖蛋白，可通過受損的血-腦屏障改善神經(jīng)元的損傷，并通過刺激腦血流自主調(diào)節(jié)作用，增加腦內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶的活性來抑制腦神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激的損害，從而減少腦組織炎癥細(xì)胞的聚集，發(fā)揮抗炎癥反應(yīng)；同時(shí)還可抑制谷氨酸介導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用，抑制炎癥反應(yīng)降低水腫性腦損傷；EPO能直接調(diào)節(jié)神經(jīng)元祖細(xì)胞和干細(xì)胞的增殖與分化，促進(jìn)神經(jīng)祖細(xì)胞的產(chǎn)生，增加神經(jīng)前體細(xì)胞生成，發(fā)揮對神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞再生和修復(fù)的作用[18-20]。

綜上所述，亞低溫聯(lián)合EPO治療HIE患兒的效果優(yōu)于亞低溫單獨(dú)應(yīng)用。但本研究仍存在一定的局限性，研究樣本量較少，未觀察治療后不同時(shí)間點(diǎn)HIE患兒細(xì)胞因子和腦組織損傷標(biāo)志物的變化情況及腦脊液中的水平。因此，尚需在以后的研究中進(jìn)一步完善。