蝦青素對人體抗氧化功能的實驗研究

諸曉波　吳健　虞利東　祝雷強　王如偉

摘? 要：目的? 研究蝦青素對人體抗氧化能力的作用。方法? 采用自身對照和組間對照法，選取120例受試者，試食者60例，對照組60例。試食者服用蝦青素軟膠囊（折合成蝦青素9mg/d），連續服用90d，對照者服用安慰劑，試食前后分別檢測安全性指標和功效指標。結果? 試食前兩組間過氧化脂質（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活力無顯著差異，具有可比性;試食組試食前后自身配對比較MDA、GSH-Px、SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.01）;試食后試食組與對照組組間比較MDA、GSH-Px、SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。結論? 該研究表明日服用9mg蝦青素能明顯提高人體抗氧化功能，且對服用者身體健康無影響，為蝦青素的開發應用提供理論基礎。

關鍵詞：蝦青素? 抗氧化? 過氧化脂質? 谷胱甘肽過氧化物酶? 超氧化物歧化酶

中圖分類號：R151 ? ?文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2020）04（c）-0206-04

Abstract： To study the antioxidant ability of Astaxanthin soft capsule. Taking 120 subjects divided into two groups at random with self-control and inter- control methods. The subjects in the test group took Astaxanthin soft capsules （with Astaxanthin 9mg/d）， the other group took placebo. Safety index and efficacy index were detected before and after trial. The activities of lipid peroxide （MDA）， glutathione peroxidase （GSH-Px） and superoxide dismutase （SOD） were not significantly different between the two groups before the trial. There was a significant difference between the test group before and after the trail（P<0.01）. There was also a significant difference between the test group and control group after the trail （P<0.05或P<0.01）. It meant taking 9 mg Astaxanthin/d can significantly improve the bodys antioxidant ability and no side-effects.

Key Words： Astaxanthin; Antioxidation; MDA; GSH-Px; SOD

蝦青素Astaxanthin又名蝦黃素、龍蝦殼色素，是一種類胡蘿卜素，最早在蝦體內被發現，是自然界中最強的抗氧化劑，其抗氧化能力是維生素E的550倍，被稱為“超級抗氧化劑”，在食品、醫藥、日化等領域具有重要作用。蝦青素不僅具有很強的抗氧化活性，還是自然界中最有潛力的抗氧化色素[1]，在抗炎[2]、心血管[3]、神經保護[4]等方便具有顯著的功效。雨生紅球藻是已知生物中蝦青素積累量最高的物種[5]，根據衛生部2010年第17號公告，雨生紅球藻被批準為新食品原料，正式可用于保健食品中，開啟蝦青素應用的新大門。

蝦青素的抗氧化功能評價集中在體外[6-7]和動物試驗[8-9]，極少有人體試驗。為明確蝦青素用量對人體抗氧化能力的影響，該研究采用蝦青素軟膠囊，聯合山東中醫藥大學第二附屬醫院按國家食品藥品監督管理局（國食藥監保化[2012]107號）附件1要求進行人體抗氧試食試驗，探索蝦青素具體用量達到抗氧化效果，為蝦青素相關產品的研制提供理論基礎。

1? 資料與方法

1.1 試劑與材料

蝦青素軟膠囊（由康恩貝研究院實驗室提供，批號190220，0.5g/粒，每粒含蝦青素2.25mg）;安慰劑（由康恩貝研究院實驗室提供，批號190220，不含蝦青素）。

1.2 主要儀器

全自動血液分析儀XT-1800i（日本希森美康）;尿液分析儀Uritest-500B（桂林優利特）;全自動生化分析儀7600-110（日立）;X光機XR/D（美國GE）;ECG-1350P（日本光電）;B超PREIRUS（二郎神，日立）;便常規LJ-2000 Olympus CHC 212（日立）。

1.3 服用方法

120例受試者，隨機分為兩組，試食者60例，對照組60例，連續服用90d，試食者服用蝦青素軟膠囊，每日2次，每次2粒;對照組服用同等劑量的安慰劑，連續服用90d。

1.4 受試者服用前情況比較

試驗前對受試者進行心率、血壓、血象、大小便、肝腎功能、胸透、心電圖、B超等檢查。

1.5 安全性指標

各項指標試驗前和試驗后分別檢測。一般狀況：受試者在試食期間的精神、睡眠、飲食、大小便、心率、血壓、體重;血、尿、便常規檢查;生化指標檢查：血清總蛋白、血清白蛋白、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、總膽固醇、甘油三酯;胸透、心電圖、腹部B超檢查;血液常規檢查。

1.6 功效性指標

過氧化脂質（MDA）含量的變化及下降百分率;超氧化物歧化酶（SOD）的變化及升高百分率;谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的變化及升高百分率。

1.7 數據處理

自身對照采用配對t檢驗，兩種均數比較采用成組t檢驗，后者進行方差齊性檢驗，對非正太分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態方差齊后，用轉換的數據進行t檢驗;若轉換數據仍不能滿足正態方差齊要求，改用t，檢驗或秩和檢驗;但變異系數太大（如CV>50%）的資料用秩和檢驗。在試驗前組間比較差異無顯著性的前提下，進行試驗后組間比較。

1.8 抗氧化作用判定

各功效觀察指標試驗前后自身比較和試食后組間比較均有統計學意義，方可判定該指標陽性。過氧化脂質含量、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽過氧化物酶三項試驗中任二項試驗結果陽性，可判定具有抗氧化功能。

2? 結果

2.1 受試者服用前情況比較

該研究共納入120例受試者，受試者服用前情況比較見表1。

試食前兩組受試者的年齡、性別、MDA含量、SOD、 GSH-Px活力比較，差別均無顯著性意義（P>0.05），均衡性較好，具有可比性。

2.2 對過氧化脂質（MDA）含量的影響

由表2可知，試食組試食前后自身配對比較MDA含量差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較MDA含量差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較MDA含量差異具有顯著性意義（P< 0.01）;試食后試食組MDA含量下降百分率（8.52±14.78）%顯著高于對照組（-1.05±12.18）%（P<0.01）。過氧化脂質含量試驗結果呈陽性。

2.3 對谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力的影響

由表3可知，試食組試食前后自身配對比較GSH-Px活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較GSH-Px活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較GSH-Px活力差異具有顯著性意義（P<0.05）;試食后試食組GSH-Px活力升高百分率（3.39±6.58）%顯著高于對照組0.34±2.71（P<0.01）。谷胱甘肽過氧化物酶試驗結果呈陽性。

2.4 對超氧化物歧化酶（SOD）活力的影響

由表4可知，試食組試食前后自身配對比較SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較SOD活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;試食后試食組SOD活力升高百分率（10.26±17.06）%顯著高于對照組0.36±2.76（P<0.01）。超氧化物歧化酶試驗結果呈陽性。

2.5 安全性檢查

試食后受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、心率、血壓未見異常。胸透、心電圖、腹B超檢查（肝、膽、脾、雙腎）檢查均未見異常。心率、血壓、血常規及生化指標見表 。

由表5可知，除血壓略高于正常值外，雖然與對照組比較，部分指標的差異存在顯著性意義（P<0.05或P<0.01），但均在醫院正常參考范圍內，差異無生物學意義。

2.6 尿及便常規

受試期間，受試者的尿常規和便常規檢查均未見異常改變。

3? 結語

該試驗共120例受試者，分為試食組60例，對照組60例，試食組按要求服用蝦青素軟膠囊，對照組服用安慰劑，90d后獲得有效病例120例。試驗結果表明，試食前兩組間MDA含量、GSH-Px及SOD活力無顯著差異，具有可比性;試食組試食前后自身配對比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。根據判定原則，以上人體試食結果表明，蝦青素軟膠囊具有抗氧化的功能。

在試食蝦青素軟膠囊前后，受試者血、尿、大便常規及肝腎功能各項檢測指標均在正常范圍內。胸透、腹部B超、心電圖均未見異常，說明服用蝦青素軟膠囊對試食者身體健康無不良影響。該試驗中蝦青素人體服用量為9mg/d，表明在此劑量下蝦青素對人體具有抗氧化功能且安全無毒。該試驗未設計低中高劑量組，對蝦青素的起效最低劑量未進行探索，后續可進行劑量的考察。

參考文獻

[1] 付力丹，劉頔，趙曉燕，等.蝦青素微膠囊化及其穩定性的研究進展[J].食品研究與開發，2016，37（23）：197-201.

[2] 王學娟，趙延蕾，王倩瑞，等.蝦青素酯對飼喂高脂高果糖飼料誘導的小鼠慢性炎癥的影響[J].食品工業科技，2015，36（4）：352-356.

[3] 夏栩如，曲雪峰，王茵，等.蝦青素預防心血管疾病作用的研究進展[J].食品安全質量檢測學報，2018，9（9）：1989-1997.

[4] 謝悠揚，陳佳雯，李美珠等.蝦青素的神經保護作用研究進展[J].醫學綜述，2016（3）：440-443.

[5] 高桂玲，成家楊，馬炯.雨生紅球藻和蝦青素的研究[J].水產學報，2014（2）：297-304.

[6] 袁磊，劉曉庚，唐瑜.不同類胡蘿卜素清除自由基能力的比較[J].包裝與食品機械，2015，33（2）：7-11.

[7] 劉曉星.蝦青素與5種天然抗氧化劑的抗氧化活性比較研究[D].河北工程大學，2018.

[8] 劉慶春.蝦青素對2型糖尿病大鼠海馬抗氧化能力的影響[J].中醫臨床研究，2017，9（22）：31-32.

[9] 陳燕，樊柏林，田潔，等.蝦青素人參茶葉對老齡小鼠的抗氧化作用[J].公共衛生與預防醫學，2016，27（2）：34-37.

作者簡介：諸曉波（1993，1—），女，漢族，浙江衢州人，碩士研究生，主要從事保健食品及功能性食品開發。

通訊作者：王如偉（1967，12—），男，漢族，浙江杭州人，博士，博士生導師，教授級高級工程師，主要從事中藥新藥開發工作，E-mail：wangrw@conbagroup.com。