TREM-1在大鼠腦出血后血腫周圍腦組織中的表達研究〔1〕

段紅玲，孫新剛，張咪咪，侯雅芝

(1.山西醫科大學，山西 太原 030001；2.山西醫科大學第二醫院，山西 太原 030001；3.山西省心血管病醫院，山西太原 030024)

腦組織炎癥反應是影響自發性腦出血(ICH)患者預后不佳的重要機制[1]。髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)是介導炎癥發生與放大的關鍵介質[2]，但與ICH后腦組織炎癥反應的關系尚無研究。本研究擬觀察TREM-1在大鼠ICH后血腫周圍腦組織中的表達及其與腦組織炎癥反應形成的關系，報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

選取健康雄性SD大鼠36 只，由山西醫科大學動物實驗中心提供，體質量250～300 g。采用隨機數字表法將大鼠分為假手術組和ICH后1d，2d，3 d，5 d，7 d組，每組6 只。

1.2 動物模型制作

參照文獻[3]方法，將100 μL自體新鮮股動脈血注入大鼠尾狀核，制作大鼠ICH模型，ICH組大鼠分別于術后相應時間點處死。假手術組采用相同手術過程但不注血，于術后3 d處死。

1.3 TREM-1及炎癥因子表達檢測

取出-70 ℃冰箱中保存的標本，按說明書依次進行提取總RNA，合成第1、第2鏈，電泳分析等步驟。凝膠圖像分析系統檢測灰度，分別以TREM-1，IL-1β，TNF-α與β-actin的比值表示其相對水平。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 大鼠腦組織中的TREM-1表達水平

RT-PCR法檢測顯示，與假手術組相比，ICH組血腫周圍腦組織中TREM-1的相對水平在造模后第1天即升高(t=9.378，P<0.001)，并于造模后第3 天時達到高峰(t=9.248，P<0.001)，此后呈下降趨勢，至第7天時最低，但仍明顯高于假手術組，差異有統計學意義(t=7.327，P<0.001)(見圖1)。

2.2 大鼠腦組織中炎癥因子的表達水平

依據實驗設計方案，在TREM-1表達最高時間點即造模后3 d時采用RT-PCR檢測IL-1β及TNF-α，結果顯示與假手術組相比，IL-1β(82.60±1.92 VS 16.61±1.08，t=22.330，P<0.001)及TNF-α(1.45±0.24 VS 0.62±0.16，t=6.564，P<0.001)均明顯升高。

2.3 大鼠腦組織中TREM-1與炎癥因子表達水平的相關性分析

ICH后3 d，TREM-1與IL-1β(r=0.604 5，P=0.007 9)及TNF-α(r=0.646 9，P=0.003 7)呈正相關(見圖2～圖3)。

3 討 論

自發性ICH是一種神經系統急危重癥，具有高發病率及致殘率的特點[1]。研究結果表明[4]，ICH后血腫周圍腦組織炎癥反應的形成可能與其不良預后密切相關，積極探討其形成機制并予以干預，臨床意義重大。TREM-1表達于髓系細胞表面，近年來在炎癥反應中的作用受到關注。最初有關TREM-1的研究主要是針對急性微生物感染[2，5]，但后續研究發現TREM-1在急性非微生物感染、慢性感染性病變及自身免疫疾病的發病過程中均起重要作用[6-8]，并與腫瘤及動脈粥樣硬化等多種病變的炎性發病機制密切相關[9-10]。因此，TREM-1廣泛參與多種疾病微環境的炎性進程，并與疾病的發生、轉歸及預后密切相關。本研究結果顯示，TREM-1在ICH后血腫周圍腦組織中表達增高，并與炎癥因子的表達有關，提示TREM-1可能亦與ICH后腦組織炎癥反應的形成密切相關。

近年來有多種炎癥因子被證實參與了ICH后腦組織炎癥反應的形成[11-12]，但針對這些炎癥因子實施干預后其效果并不理想。本研究結果提示TREM-1與ICH后腦組織炎癥反應形成有關，而TREM-1是介導多種炎癥反應發生與放大的關鍵介質，這就有望為臨床改善ICH的不良預后提供藥物作用新靶點。