張 華,鄧言歡,史 娟,陳 貴,李 姍
(1.黔南州檢驗檢測院,貴州 都勻 558000;2.黔南州中醫醫院,貴州 都勻 558000)
巖五加為葡萄科植物崖爬藤Tetrastigmaobtectum(Wall.)Planch.的全草,收載于2013年版《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》。崖爬藤主要分布于貴州、云南、四川、湖北、湖南、江西、廣西、廣東等省區,具有祛風除濕、活血通絡、解毒消腫的功效,主治風濕痹痛、跌打損傷、流注痰核、癰瘡腫痛、毒蛇咬傷[1]。關于該植物化學成分的報道較少,文獻報道崖爬藤的95%乙醇提取物中分離得到11個化合物,分別為吲哚類生物堿及黃酮苷類成分,并且有7個新化合物[2];與其同屬的三葉崖爬藤報道相對較多,其含有綠原酸、異葒草苷-2′-O-鼠李糖苷及異葒草苷等成分[3]。本研究通過對收集的巖五加樣品進行分析,制定了巖五加藥材的質量標準,為巖五加藥材的質量評價提供研究基礎和科學依據。
徠卡DM500顯微鏡(德國徠卡儀器有限公司);101-1AB電熱鼓風干燥箱(天津泰斯特儀器有限公司);BSA224S電子天平(賽多利斯科學儀器有限公司);SX-4-10型箱式電阻爐(天津泰斯特儀器有限公司);IKA A11 basic研磨機(德國艾卡儀器設備有限公司)。
水合氯醛、間苯三酚、濃鹽酸、稀甘油、蒸餾水、乙醇均為分析純。10批次巖五加藥材樣品均經貴州省食品藥品檢驗所中藥標本館館長李揚鑒定為葡萄科植物崖爬藤Tetrastigmaobtectum(Wall.)Planch.的全草,憑證標本存放于黔南州檢驗檢測院食品藥品檢驗所中藥室。樣品來源見表1。

表1 供試樣品來源
通過對采集的10個藥材樣品去除雜質后曬干,對藥材樣品的大小、形狀、顏色、質地、斷面等特征進行對比觀察和描述,并對具有代表性的藥材進行拍照。發現不同產地的藥材除了在大小方面稍有差異,其他特征相對比較穩定。該藥材的性狀鑒別特征歸納總結如下:本品為木質或草質藤本,莖呈圓柱形,灰棕色至棕褐色,質脆,易折斷,斷面粗糙,可見明顯的形成層環紋,小枝稍有棱,無毛或被疏柔毛。葉為掌狀5小葉,小葉菱狀橢圓形或橢圓披針形,兩面均無毛,總葉柄長1~11 cm,小葉柄極短或幾無柄,無毛或被疏柔毛。氣微,味辛。見圖1。
本品橫切面和粉末性狀的顯微鑒別所用樣本來至于貴州不同地區野外采集的10個藥材樣品。切片和制作標本,研究其共性總結歸納得出該藥材粉末顯微鑒別特征:通過對10個藥材樣品的粉末進行觀察和測量,其顯微鑒別特征總結如下:本品粉末黃綠色或棕黃色。淀粉粒極多,多為單粒淀粉,圓形、橢圓形或類圓形,臍點點狀、短縫狀或人字狀,復粒少見;黏液細胞類圓形或方形,有的含草酸鈣針晶束;針晶成束或散在;導管為具緣紋孔導管。見圖2。

圖2 巖五加粉末顯微特征
按照《中華人民共和國藥典》2015年版四部通則0832水分測定法第二法進行測定。樣品測定結果為9.2%~12.6%,平均值為11.2%,暫定水分含量不高于13.0%。
按照《中華人民共和國藥典》2015年版四部通則2302總灰分測定法進行測定。樣品測定結果為8.7%~14.3%,平均值為11.8%,暫定總灰分含量不得超過14.0%。
分別用10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、100%乙醇作溶劑,熱浸法測定1批巖五加浸出物含量,結果10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇作溶劑的樣品溶液無法濾過,其余測定結果見表2。根據測定結果,用稀乙醇作溶劑,按《中國藥典》2015年版通則2201熱浸法,測定了10批樣品,測定結果見表3。根據測定結果,暫定浸出物標準不得少于15.0%。


樣品來源50%乙醇浸出物60%乙醇浸出物70%乙醇浸出物80%乙醇浸出物90%乙醇浸出物100%乙醇浸出物羅甸縣沫陽鎮18.418.116.115.514.07.4

表3 巖五加水分、總灰分、浸出物測定結果 (%)
據《四川中藥志》[4]記載,走游草為葡萄科崖爬藤屬植物崖爬藤的全草,文獻記載為“本植物喜溫暖,陰濕,通常生于山區纏繞于高大的樹木上,或附著于墻崖上”“草藥醫于四季采集入藥。辨別其特征:以本品形略似爬山虎而小;藤粗如火柴梗,節間較長,藤葉紫紅色,葉略肉質,根少”。以上特征與《中國植物志》[5]及《貴州植物志》[6]中收載的崖爬藤一致。《貴州草藥》[7]亦收載崖爬藤作為藥材,文獻記載其“別名:走游草(各地均稱),毛五加(清鎮),小走游草、巖五加(貴陽)”“藥用部分:全草。四季均可采集。”由此可見,《四川中藥志》收載的走游草、《貴州草藥》收載的崖爬藤及《昆明民間常用草藥》[8]中收載的鈍葉小五爪龍均為該植物的全草,另外《重慶草藥》[9]《中華本草》[1]和《貴州中草藥名錄》[10]中收載的走游草均為該植物的全草或根。經過上述考證,巖五加作為葡萄科植物崖爬藤的干燥全草,有足夠的本草支撐,可以作為藥用。
巖五加與常用藥材三葉青(葡萄科植物三葉崖爬藤 Tetrastigma hemsleyanum Diels&Gilg的干燥全草)性狀的主要區別在于:巖五加葉為掌狀5小葉,小葉菱狀橢圓形或橢圓披針形,兩面均無毛,小葉柄極短或幾無柄,無毛或被疏柔毛;三葉青葉互生,展開后呈三出掌狀復葉,無毛,葉緣具刺狀疏齒。二者在顯微鑒別上的差別主要體現在:巖五加的部分嫩枝有非腺毛,而三葉青沒有非腺毛。另外,在樣品采集的過程中,發現崖爬藤有兩個相近品種,無毛崖爬藤和毛葉崖爬藤,二者與崖爬藤最大的區別在于:無毛崖爬藤全株無毛;毛葉崖爬藤小枝、葉柄、葉片和花梗下面被疏柔毛。
根據文獻調研三葉崖爬藤等相近品種所含成分,課題組曾以綠原酸(110753-201415中國食品藥品檢定研究院)作為對照品對其進行薄層鑒別。在篩選好的試驗條件下,供試品色譜中在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點,分離度好,斑點顯色清晰,但因為綠原酸專屬性不強,未列入標準正文。
本文建立的質量標準具有較好的專屬性,能明顯地區別于同屬的其他常見的相近植物,可應用于巖五加藥材的質量控制。