邁瑞CL-6000I化學發(fā)光免疫分析儀檢測系統(tǒng)性能驗證

謝菊紅 何沛 郭炫

[摘要] 目的 驗證邁瑞CL-6000I化學發(fā)光分析儀檢測系統(tǒng)的性能。方法 參照國家臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）等相關文件對邁瑞CL-6000I化學發(fā)光免疫分析儀檢測系統(tǒng)檢測甲狀腺激素：三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）5個項目的精密度、準確度、線性范圍、生物參考區(qū)間進行驗證。結果 檢測的5個項目批內精密度變異系數CV%在1.837%～4.07%，批間精密度變異系數CV%在2.634%～7.49%，準確度比對偏倚范圍為6.289%～9.62%，線性范圍斜率在0.981 2～1.013，r2在0.951 7～0.999 2，均滿足相關文件的要求;參與生物參考區(qū)間驗證的樣本檢測結果均在廠家標注的范圍內。結論 邁瑞CL-6000I化學發(fā)光分析儀檢測系統(tǒng)精密度、準確度、線性范圍、生物參考區(qū)間驗證通過。滿足臨床診斷與預后監(jiān)測的需要。

[關鍵詞] 化學發(fā)光;性能驗證;甲狀腺激素

[中圖分類號] R446 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2020）03（a）-0001-03

[Abstract] Objective To verify the performance of Mindray CL-6000I chemiluminescence analyzer detection system. Methods According to the National Clinical Laboratory Standardization Committee（NCCLS） and other relevant documents， the Mindray CL-6000I chemiluminescence immunoassay detection system was used to detect thyroid hormones： triiodothyronine （T3）， tetraiodothyronine （T4）， Free triiodothyronine （FT3）， free tetraiodothyronine （FT4）， and thyroid stimulating hormone （TSH） were tested for precision， accuracy， linear range， and biological reference interval. Results The precision variation coefficient CV% of the five items tested was 1.837%-4.07%， the precision variation coefficient CV% between batches was 2.634%-7.49%， the accuracy comparison bias range was 6.289%-9.62%， and the linear range slope was 0.981 2-1.013， r2 of 0.951 7-0.999 2， all met the requirements of relevant documents; the test results of the samples participating in the biological reference interval verification were within the range marked by the manufacturer. Conclusion Mindray CL-6000I chemiluminescence analyzer detection system precision， accuracy， linear range and biological reference interval have been verified， which meets the needs of clinical diagnosis and prognosis monitoring.

[Key words] Chemiluminescence; Performance verification; Thyroid hormone

在臨床工作中，準確可靠的檢測結果是疾病診斷治療必不可少的依據，也是健康檢查的一部分，是檢驗科工作的核心和基本要求。為了保證檢驗質量，臨床實驗室應在正式投入使用前對檢驗儀器及檢驗方法進行性能驗證。各項指標在生產廠家所標注的范圍或有關文件要求范圍內即為驗證合格，才能應用于臨床工作[1-2]。該實驗室對CL-6000I（中國）化學發(fā)光分析儀檢測甲狀腺激素：三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）進行了性能驗證。驗證內容包括精密度、準確度、線性范圍、生物參考區(qū)間[3]，現報道如下。

1 ?材料與方法

1.1 ?實驗樣本

選取2018年5—7月西安交通大學第一附屬醫(yī)院長安區(qū)醫(yī)院就診和健康體檢者不同濃度的新鮮血清樣本。空腹靜脈采血后，靜置待其凝固后3 500 r/min，離心10 min。分離血清，密封-20℃冷凍備用[4]。要求血清外觀清亮，無溶血無黃疸，無脂肪血等。依據NCCLSEP5-A2文件對儀器進行性能驗證。

1.2 ?儀器與試劑

邁瑞CL-6000I化學發(fā)光免疫分析儀，試劑、校準品、質控品和耗材均為儀器配套產品。實驗過程中所有試劑耗材未更換批號。試劑批號：T3 2018040121，T4 2018040121，FT3 2018040121，FT4 2018060111，TSH 2018040121;校準品批號：T3 2018030100，T4 2018060100， FT3 2018060100，FT4 2018050100，TSH 2018060100，邁瑞復合質控品低值批號2018060101，復合質控品高值批號2018020101，發(fā)光底物液，清洗液，反應杯均在有效期內。

1.3 ?驗證方法

1.3.1 精密度驗證 ?依據NCCLS EP5-A2文件對待驗證儀器進行精密度驗證，選取三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離四碘甲狀腺原氨酸（FT4）、促甲狀腺素（TSH）高、低濃度兩個水平的患者血清樣本在1 d內連續(xù)檢測20次。計算其均值（x±s），變異系數（CV%），驗證其批內精密度[5];利用高值、低值兩個水平的室內質控品連續(xù)20 d的質控結果，統(tǒng)計其均值（x±s）和變異系數（CV%），驗證其批間精密度[6-7]。檢測的批內精密度CV%應該≤1/4CLIA88′TEa 允許的總誤差（6.25），批間精密度CV%應該≤1/3 CLIA88′TEa（8.25），該檢測系統(tǒng)精密度即為驗證通過[5-6]。

1.3.2 準確度驗證 ?T3、T4、FT3、FT4、TSH每個項目收集低于生物參考區(qū)間、生物參考區(qū)間內和高于生物參考區(qū)間的血清樣本各7份，經待驗證儀器邁瑞CL-6000I檢測3次，計算平均值為A值。與已通過ISO15189認證的西安交通大學第二附屬醫(yī)院檢驗科檢測結果進行比對[5-6，8-9]，每個樣本檢測3次，計算其平均值B。計算公式：相對偏倚=[（A-B）/B]×100.00%，平均偏倚=21次相對偏倚絕對值的和的平均數。判斷標準為平均偏倚≤1/2CLIA88′TEa（12.50）即為準確度驗證通過[5-6，9]。

1.3.3 線性范圍 ?參照EP6-A2文件選取T3、T4、TSH 低值高值血清各1份[4]。將高值H和低值L按照5H、4H+1L3H+2L、2H+3L、1H+4L、5L的比例配成6份同體積不同濃度的樣本。以預期值Y為縱坐標，每份樣本連續(xù)檢測3次。計算其平均值X作為橫坐標，將所有結果數據繪制于X-Y坐標圖中，計算回歸方程Y=aX+b，斜率 a在0.97～1.03，并且r2≥0.95，即可判斷為驗證通過[5，10]。

1.3.4 生物參考區(qū)間驗證 ?參照行業(yè)標準[11]進行生物參考區(qū)間的小樣本驗證，收集男性和女性健康體檢者各10名（年齡在18～60歲之間）血清樣本及時檢測，計算出比率R，R=檢驗結果在廠家提供的生物參考區(qū)間內的樣本數/20，若R≥90%，即為驗證通過。

1.4 ?統(tǒng)計方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件進行數據處理。計量資料采用（x±s）表示，相關性檢驗采用線性分析和回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 ?結果

2.1 ?精密度驗證結果

T3、T4、FT3、FT4、TSH共5個項目，批內精密度CV%在1.837%～4.07%，見表1。批間精密度CV%在2.634%～7.49%，見表2。精密度驗證符合要求。

2.2 ?準確度驗證

5個項目共21份樣本，準確度比對結果平均偏倚范圍為6.289%～9.62%。實驗結果見表3。驗證通過。

2.3 ?線性范圍

T3斜率為1.002、T4斜率為0.9812、TSH斜率為1.013。T3 r2為0.999 2、T4r2為0.951 7、TSHr2為0.985 8。驗證結果見表4。驗證通過。

2.4 ?生物參考區(qū)間驗證

參與該次驗證的20份樣本檢測數據見表5，結果均在廠家提供的生物參考區(qū)間內。驗證結果見表6。驗證通過。

3 ?討論

精密度是在相同條件下對同一樣本多次重復檢測所得結果的一致性程度，反映檢測系統(tǒng)的隨機誤差，用變異系數CV%來表示。是實驗方法、儀器、試劑等性能的重要指標，也是進行性能驗證的基礎，該次實驗T3、T4、FT3、 FT4、TSH的批內精密度CV%為1.837～4.07%，均<1/4 CLIA′88TEa（6.25%）。批間精密度CV%為2.634～7.49%，<1/3 CLIA88′TEa（8.25%）。該次參與驗證的5個項目，精密度驗證全部合格。

準確度是檢測結果與其“真值”之間的差異大小，用“偏倚”表示，反映檢測系統(tǒng)的系統(tǒng)誤差[6-9]，該次參與驗證的5個項目其平均偏倚范圍為6.289%～9.62%，<1/2 CLIA′88TEa（%）（12.5），準確度驗證合格。在實際工作中，重復檢測樣本的幾率很小，因此分析系統(tǒng)的準確度非常關鍵。精密度和準確度是對檢測系統(tǒng)最基本的性能驗證。因為FT3和FT4稀釋過后的反應不成線性[4]，因此，沒有進行二者的線性實驗。

進行性能驗證，必須保證足夠的在有效期內的同一批號試劑和耗材，實驗過程中忌更換批號，盡量減少可能引起的誤差。每一瓶新啟用試劑均應先做校準和質控，質控在控的情況下才能進行工作，所有操作均應按儀器及試劑說明操作。參與實驗的樣本采集者不應服用藥物，特別是內分泌系統(tǒng)疾病患者和孕婦應排除。由于孕婦樣本收集要求更嚴格[12]，短時間內無法收集到足夠的合格樣本，此次未進行孕婦生物參考區(qū)間的驗證，此工作后續(xù)進行。通過該次實驗，邁瑞CL-6000I化學發(fā)光分析儀檢測系統(tǒng)在精密度、準確度、線性范圍、參考區(qū)間四個方面達到相應要求，可用于臨床工作。

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（收稿日期：2019-12-03）