ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質量調查

周 靜 呂素梅

(洛陽市中心血站 洛陽 471000)

臨床輸血在進行患者救治時最常用的治療措施，尤其是在對患者實施搶救的過程中發揮著十分重要作用[1]。冷沉淀是一種臨床應用范圍越來越廣泛的一種血液制品，就是血漿經過加工處理后得到的液體部分。冷沉淀和血漿相比，前者的濃度更高，輸血療效更好。因此，醫護人員需在輸血前對采集的合格血液采用科學高效的制備方法制備冷沉淀凝血因子，以便在輸血過程中保證輸血的有效性，不僅有助于提高患者手術成功率，而且能加速患者預后的恢復[2]。既往冷沉淀的制備主要采取離心法，而當前使用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀越來越廣泛被應用，二者均能取得較好的制備效果，但是針對二者制備冷沉淀凝血因子的質量以及制備效率對比的研究較少[3]。基于此，本研究探討ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質量調查，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 血漿來源

制備冷沉淀的血漿全部來自本中心血站2018年5月～2019年5月采集的合格血液，全血400ml，均在10h內采集，在4℃條件下進行離心處理(4068g，10min)，分離后制備成新鮮冰凍血漿，速凍成固態，置入-20℃冷庫，備用。

1.2 儀器設備

山東中保康醫療器具有限公司生產的ZBK-LCD-A1型冷沉淀凝血因子制備儀；美國Thermo公司生產的HERAEUS-6000i大容量低溫離心機；美國CytoTherm公司生產的低溫水浴融化箱；Lmb全自動全血成分分離機Sepamatic-SL(Ⅲ)；日本希森美康公司生產的CA-500全自動血凝儀。

1.3 檢測試劑

Ⅷ因子試劑盒(廠家日本希森美康公司，批號547632A)；纖維蛋白原試劑盒(廠家日本希森美康公司，批號547271A)。

1.4 方法

1.4.1觀察組采用虹吸法制備冷沉淀

每批次制備90袋新鮮冰凍血漿，每臺冷沉淀凝血因子制備儀可制備30袋冷沉淀，嚴格按照設備操作說明書進行制備操作。設定水浴溫度為4℃，冷沉淀凝血因子制備儀開機達到設定溫度后開始制備，將新鮮冰凍血漿袋與連接的轉移袋一同放到公共秤，稱重后將新鮮冰凍血漿袋放到水浴槽制備位中，將轉移袋放到其下方的下稱重盒中，電腦屏幕顯示該制備位稱重數據。30個制備位全部放置血袋后，將血袋導管放置在蠕動泵中并固定于該路管卡上，保持管卡以下導管足夠松弛，以免影響稱重。30袋新鮮冰凍血漿全部放置完畢后，單擊“制備”，制備開始(其余60袋新鮮冰凍血漿按上述方法放置到另兩臺冷沉淀凝血因子制備儀中開始制備)，水浴槽中新鮮冰凍血漿邊融化邊借助蠕動泵形成虹吸，當新鮮冰凍血漿袋中的冷沉淀凝血因子到達到設定容量時，夾管閥自動夾閉導管，制備儀通過聲音報警和其頂部報警燈閃爍提示制備完成。工作人員提取血袋后在公共秤復核容量，利用制備儀自帶的熱合頭熱合管路，制備結束。

1.4.2對照組采用離心法制備冷沉淀

每批次制備70袋新鮮冰凍血漿，將新鮮冰凍血漿置于4℃低溫水浴融化箱中，約80min幾乎完全融化時，配平離心，使用HERAEUS-6000i大容量低溫離心機進行離心，離心后將血漿袋置于成分分離機，選擇冷沉淀制備程序，分離機自動完成血漿分離、稱重、熱合。

1.4.3檢測方法

取出兩組制備完成保存時間≥3d且呈冷凍狀態下的冷沉淀，置于37℃溫度下的解凍箱中解凍，析出融化后的血袋中呈淡黃色澄清液體。完全實現融化后將血袋混勻，將血袋中的冷沉淀擠進與血袋連接的導管內，熱合后斷開導管。于1h內嚴格按照CA-500全自動血凝儀的操作步驟以及試劑說明書予以檢測。

1.4.4質量標準

參考中華人民共和國GB18469-2012《全血及成分血質量標準》中標準：200ml新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀Ⅷ因子含量≥80IU、纖維蛋白原≥150mg。

1.5 評價指標

(1)冷沉淀凝血因子的質量比較：對兩組虹吸法以及離心法下制備的冷沉淀進行抽檢，比較其冷沉淀凝血因子的質量。(2)制備效率比較：比較離心法和虹吸法制備冷沉的工作效率(簡稱“效率”)，制備每袋冷沉淀所有的時間=(每批次人工數×每批次所用時間)/每批次制備的總袋數，時間用min計算，用“時間min/袋·人次”表示，每人每制備一袋冷沉淀所用時間越少，效率越高。

1.6 統計學方法

2 結果

2.1 冷沉淀凝血因子的質量比較

觀察組纖維蛋白原、Ⅷ因子含量均較對照組高，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

組別Ⅷ因子(IU/袋)纖維蛋白原(mg/袋)對照組(n=48)101.68±5.78167.42±5.12觀察組(n=48)123.34±6.02205.42±5.98t17.98133.442P0.0000.000

2.2 制備效率比較

用冷沉淀凝血因子制備儀采用虹吸法制備冷沉淀，制備數量增加，制備時間縮短，效率明顯高于離心制備冷沉淀，見表2。

表2 兩種冷沉淀制備方法效率比較

制備方式袋數人員時間(min)效率(時間min/袋·人次)虹吸法9021202.67離心法7021404

3 討論

冷沉淀是把合格的新鮮冰凍血漿放在1℃～6℃的溫度下，待加熱到37℃，血漿中完全融化后，于1h內分離出沉淀下來的不溶解白色沉淀物。冷沉淀具備高濃度、高純度、低容量等優勢，被廣泛應用于凝血功能障礙或創傷性出血的臨床治療中[4]。

冷沉淀中最為主要的有效成分為Ⅷ因子以及纖維蛋白原等，均是穩定性較差的凝血因子。其中的Ⅷ因子穩定性極差，其體外的半衰期在12～24h范圍內。冷沉淀中的Ⅷ因子含有量與制備時間的長度呈負相關，制備時間越長，含量越低而下降。當在2℃～6℃的制備溫度下，Ⅷ因子能夠獲取最高的回收率，當溫度超過8℃時可出現自我融解。制備時的溫度、制備所耗費的時間以及制備鎖選擇的方案都影響對冷沉淀質量，因此要采取合適的制備方案來控制融化溫度，縮短制備時長，以此來提升冷沉淀凝血因子質量[5]。本研究中，觀察組Ⅷ因子含量、纖維蛋白原含量均高于對照組，且平均制備時間短于對照組，表明ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質量更高，制備效率更好。分析其原因主要是運用離心法制備冷沉淀，新鮮的冰凍血漿要在4℃的冰箱中緩慢融化至一定程度后方可進行離心處理，離心過程中溫度會上升，且制備過程也要在室溫下完成，會造成Ⅷ因子以及纖維蛋白原的衰減[6～7]。而采用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀利用虹吸法制備冷沉淀，都是在一個密閉性較高的低溫的制備環境中，冷沉淀的制備幾乎不受外界環境的影響；同時通過特有的微電腦控制系統，可將水浴溫度穩定且精準維持在4℃～6℃，此時制備的冷沉淀中Ⅷ因子以及纖維蛋白原衰減最少[8～9]。水浴槽中新鮮冰凍血漿邊融化邊借助蠕動泵形成虹吸，當新鮮冰凍血漿袋中的冷沉淀凝血因子到達到設定容量時，夾管閥自動夾閉導管，制備儀通過聲音報警和其頂部報警燈閃爍提示制備完成，精準控制冷沉淀容量在40～50mL，有效避免冷沉淀容量出現偏差。整個制備的過程能夠做到自動化控制，最大程度上降低人為因素的影響，大大提高了工作效率[10]。

綜上所述，采用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備的冷沉淀凝血因子的質量更高，每袋冷沉淀的制備用時更短，制備效率更好。