不同月齡林下仿野生栽培金線蓮有效成分含量研究

孫加焱 余紅偉 方錫平

摘要? ? 金線蓮為名貴中藥材，野生資源稀缺，林下仿野生栽培是滿足人們對金線蓮數量和品質需求的較好途徑。本文利用林下仿野生栽培的金線蓮，對不同月齡干燥全草有效成分含量進行了研究。結果表明，6月齡和8月齡干燥全草總黃酮（以蘆丁計）含量分別為9.226 mg/g和9.627 mg/g，后者較前者提高4.35%;多糖（以無水葡萄糖計）含量分別為191.702 mg/g和125.249 mg/g，后者較前者下降34.66%;多酚（以沒食子酸計）含量分別為8.006 mg/g和8.641 mg/g，后期較前者提高7.93%。初步表明，林下仿野生栽培金線蓮全株總黃酮和多酚含量隨月齡延長而提高、多糖含量隨月齡延長而下降。這一結果可為金線蓮的臨床應用提供一定的參考。

關鍵詞? ? 金線蓮;林下仿野生栽培;月齡;總黃酮;多糖;多酚

中圖分類號? ? S567.239? ? ? ? 文獻標識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2020）11-0066-02? ? ? ? ? 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）

金線蓮（Anoectochilus roxburghii）是一種名貴稀有中藥材，素有“南方冬蟲夏草”“藥王”等美譽，以全草入藥，具有清熱、涼血、解毒、祛風除濕等功效[1]。金線蓮喜陰涼潮濕，適宜生長溫度為20～32 ℃，適宜光照約為正常日照的1/3，生長條件比較苛刻，所以人工栽培一般對設施要求嚴苛，生產成本高，且有效成分含量不如野生金線蓮。利用高山林下陰涼濕潤、避光的自然環境和山林中的自然蓄水條件，以林下腐殖質作為培養基質，可實現林下仿野生栽培。有研究表明，林下仿野生種植的金線蓮體外抗氧化活性與野生型金線蓮無顯著差異[2]。林下栽培多處于高山密林中，自然生態條件優異，其安全品質較人工設施栽培更好。林下仿野生栽培金線蓮，既滿足了人們對金線蓮稀有藥材數量和品質的需求，又增加了種植業收入，是發展林下經濟的一種有益模式。本研究對林下仿野生栽培的金線蓮不同月齡干燥全草中總黃酮、多糖、多酚3個重要有效成分指標進行了比較分析。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗材料

試驗材料為林下仿野生栽培的6月齡金線蓮和8月齡金線蓮干燥全草。林下仿野生栽培地點位于浙江省建德市三都鎮羊峨村尖竹山，該山平均海拔810 m，基地位于該山海拔700～720 m的北麓，平均坡度42°，樹木類型以水杉、毛竹為主，夏季平均遮光度66%～73%，生長期每月溫濕度如表1所示。水源為基地上游約50 m處收集的山泉，pH值7.87。利用林下落葉腐殖物和風化土順坡做畦，畦面高12 cm、寬80 cm，土壤pH值4.60。6月齡金線蓮于2018年5月10日定植，8月齡金線蓮于2018年3月10日定植，行株距為10 cm×10 cm。金線蓮種苗由金華市農業科學研究院通過組織培養培育，苗齡3～4葉。2018年11月5日分別隨機收取金線蓮全草、低溫烘干，分別稱取200 g干樣本用于檢測。

1.2? ? 儀器與試劑

試驗所用主要儀器：UV2450紫外分光光度計，由島津公司生產;R-201旋轉蒸發儀，由上海申順生物科技有限公司生產;DK-S26型電熱恒溫水浴鍋，由上海森信試驗儀器有限公司生產;KQ-250B超聲波洗滌機，由昆山市超聲儀器有限公司生產。

主要試劑：沒食子酸、蘆丁標準樣品，由Aladdin公司生產;福林酚試劑，由Wolsen公司生產;其他試劑均為分析純級。

1.3? ? 試驗方法

總黃酮含量（以蘆丁計）用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法測定[3];多糖含量（以無水葡萄糖計）用苯酚-硫酸法測定[4]，多酚含量（以沒食子酸計）用Folin-Ciocalteu法測定[5]。檢測工作在浙江省現代森林培育技術重點實驗室進行，試驗溫度25 ℃，濕度30%～50%。

2? ? 結果與分析

2.1? ? 不同月齡金線蓮總黃酮含量

從圖1可以看出，林下仿野生栽培金線蓮6月齡干燥全草總黃酮含量為9.226 mg/g，8月齡干燥全草總黃酮含量達到9.627 mg/g，較6月齡提高了4.35%。表明隨著月齡延長，金線蓮全草總黃酮含量增加。這可能是由于隨著月齡延長，次生代謝物質積累增多。

2.2? ? 不同月齡金線蓮多糖含量

林下仿野生栽培金線蓮6月齡和8月齡干燥全草多糖含量分別為191.702 mg/g和125.249 mg/g（圖2），8月齡干燥全草多糖含量較6月齡下降了34.66%。表明隨著月齡延長，多糖含量下降幅度較大。造成這種變化趨勢的原因可能是，作為初級代謝物的多糖在金線蓮生長過程中參與其他物質的代謝，部分多糖被轉化為黃酮、多酚等其他次生代謝物質。

2.3? ? 不同月齡金線蓮多酚含量

從圖3可以看出，林下仿野生栽培金線蓮干燥全草多酚含量隨月齡延長而增多，6月齡全草多酚含量為8.006 mg/g，到8月齡時增加至8.641 mg/g，提高幅度達到7.93%。多酚含量的增長趨勢可能也與多糖代謝和次生代謝物質積累增多有關。

3? ? 結論與討論

總黃酮、多糖、多酚等有效成分含量是金線蓮營養價值和藥用價值的重要指標[6-7]。一般認為，人工栽培金線蓮與野生型金線蓮相比，有效成分含量較低。本研究中在海拔為700～720 m的建德市高山地區林下仿野生栽培金線蓮，結果表明，6月齡至8月齡干燥全草有效成分總黃酮含量為9.226～9.627 mg/g、多糖含量為125.249～191.702 mg/g、多酚含量8.006～8.641 mg/g，與野生金線蓮有效成分含量（總黃酮5.337～7.090 mg/g，多糖67.0～191.8 mg/g[8]）相當或較優，優于基質栽培有效成分含量（總黃酮5.9～8.9 mg/g，多糖61.8～78.9 mg/g，多酚5.2～7.3 mg/g[9]），表明在高山區林下仿野生栽培的金線蓮營養價值和藥用價值較高。研究還初步認為，隨著月齡延長，初生代謝物多糖的含量有下降趨勢，次生代謝物總黃酮、多酚的含量有上升趨勢，這一結論可為不同臨床目的應用金線蓮的月齡標準提供一定的參考。

4? ? 參考文獻

[1] 王國強.全國中草藥匯編[M].北京：人民衛生出版社，2014.

[2] 闞永軍，趙立，楊彬君，等.野生和林下種植金線蓮的體外抗氧化活性研究[J].中國民族民間醫藥，2017，26（6）：15-17.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫藥科技出版社，2015.

[4] 張錦雀，吳曉珊，朱善嵐，等.金線蓮多糖苯酚-硫酸法測定條件的優化[J].中國醫學院雜志，2010，30（2）：113-116.

[5] 鄧燕莉，羅金波，黃甜，等.酸性染料比色法定量檢測荷葉總生物堿[J].食品與機械，2011，27（4）：90-93.

[6] 施滿容，龔林光，陸志平，等.閩東野生金線蓮有效成分含量的比較[J].福建農業學報，2016，31（9）：950-956.

[7] 許恩婷，許夢潔，邵清松，等.金線蓮不同器官及萃取部位的抗氧化活性研究[J].中國食品學報，2019，19（1）：28-33.

[8] 顧慧芬，莊意麗，梅其春.野生與組培金線蓮有效成分的比較及RAPD分析[J].中成藥，2011，33（8）：1364-1367.

[9] 朱建軍，黃雨佳，金建紅，等.不同栽培基質對金線蓮3種基原植物生長及其活性成分含量的影響[J].中國中藥雜志，2019，44（12）：2467-2471.

基金項目? ?杭州市科技發展計劃項目（2019YSFP07）。

作者簡介? ?孫加焱（1977-），男，山東武城人，碩士，高級農藝師，從事作物栽培學研究與農業技術推廣工作。

收稿日期? ?2020-03-07