鐵皮石斛組培快繁技術(shù)研究進(jìn)展

王朝雯

摘要? ? 鐵皮石斛是瀕危藥材之一，本文通過查閱鐵皮石斛相關(guān)文獻(xiàn)，對其組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，以期為鐵皮石斛組培快繁技術(shù)研究提供參考。

關(guān)鍵詞? ? 鐵皮石斛;組織培養(yǎng);快繁技術(shù)

中圖分類號? ? S567.239? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2020）11-0068-01? ? ?開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）

鐵皮石斛為多年生草本植物，可有效提升人體免疫力，具有延緩衰老、增強(qiáng)血管擴(kuò)張的效果。由于鐵皮石斛種子小且沒有胚乳，只有在真菌環(huán)境下才有萌發(fā)的可能，因而栽培難度較大[1]。組織培養(yǎng)是快速繁殖鐵皮石斛的主要方式，目前國內(nèi)外專家進(jìn)行了大量研究，并取得了較為顯著的成果。

1? ? 外植體的選取

外植體除種子外，還有無菌幼苗莖段。饒寶蓉等[2]通過分析發(fā)現(xiàn)，以種子作為外植體較莖段外植體其無菌系的建立效率較高，種子誘導(dǎo)感染率更低。同時，種子外植體的長勢更加整齊。總體來說，選取種子作為外植體較為理想。

2? ? 初代培養(yǎng)基選擇

培養(yǎng)基選擇是組培的關(guān)鍵，不同的物種、品種以及外植體材料所采用的培養(yǎng)基也應(yīng)有所區(qū)別。同時，處于不同培養(yǎng)階段、基于不同目的而進(jìn)行的培養(yǎng)，應(yīng)從培養(yǎng)基上進(jìn)行區(qū)分。

2.1? ? 基本培養(yǎng)基

誘導(dǎo)培養(yǎng)基是常見的初代培養(yǎng)基，也可采用分化培養(yǎng)基作為初代培養(yǎng)基。鐵皮石斛有多種培養(yǎng)基，可根據(jù)外植體的不同而選擇適合的培養(yǎng)基。林江波等[3]采用SRR檢驗(yàn)方法對各處理因子進(jìn)行檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，從原球莖誘導(dǎo)率方面分析，MS培養(yǎng)基與1/2MS培養(yǎng)基并沒有明顯差異，而二者與VW培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率差異較為明顯。楊立昌等[4]對鐵皮石斛的愈傷組織情況進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與MS培養(yǎng)基相比，1/2MS培養(yǎng)基的出芽率更高，表明在激素濃度適合的情況下，培養(yǎng)基的鹽含量較低對不定芽的分化更加適合。

2.2? ? 激素及添加物

有利于鐵皮石斛愈傷組織的培養(yǎng)基種類較多，NAA與IBA等激素的應(yīng)用較為常見;此外，還有6-BA等激素。合理進(jìn)行生長素與細(xì)胞分裂素的比例調(diào)配最為關(guān)鍵，細(xì)胞分裂素可以有效誘導(dǎo)不定芽的萌發(fā)，生長素與細(xì)胞分裂素的合理調(diào)配有利于愈傷組織的形成。以天然有機(jī)物作為添加物可以使鐵皮石斛的外植體吸收豐富的微量元素，為其生長提供必要的激素與活性物質(zhì)，有利于原球莖的快速增殖與分化。王福喜[5]對培養(yǎng)基進(jìn)行改良發(fā)現(xiàn)，改良型MS培養(yǎng)基的增殖率有明顯增長。蔣向輝等[6]以幼葉為外植體進(jìn)行芽分化和根誘導(dǎo)試驗(yàn)，采用赤霉素作為處理激素，結(jié)果表明，鐵皮石斛的成苗率顯著提升，成苗效果最佳的濃度為1.5 mg/L。

3? ? 繼代培養(yǎng)基選擇

原球莖增殖在組培中極為重要，誘導(dǎo)鐵皮石斛產(chǎn)生原球莖，有利于后續(xù)原球莖分化，也是壯苗生根的重要條件。植物生長調(diào)節(jié)劑的添加會對植物細(xì)胞分裂產(chǎn)生影響，有利于鐵皮石斛器官形成和次生產(chǎn)物的快速合成。由于鐵皮石斛品種或增殖方式存在差異，最終得出的分析結(jié)果也有所不同。

3.1? ? 原球莖增殖與分化

唐桂香等[7]通過分析發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中加入適量的6-BA與NAA激素對鐵皮石斛的原球莖具有明顯的誘導(dǎo)增殖效果，以1/2MS為基本培養(yǎng)基，6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L最有利于原球莖增殖。

3.2? ? 芽增殖

楊平飛等[8]通過大量試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在合理配置生長素與細(xì)胞分裂素的條件下，二者比值會對鐵皮石斛幼芽萌發(fā)效果產(chǎn)生影響，比值越低，幼芽生長狀況越好。同時，將適量的活性碳加入到培養(yǎng)基中，可以有效促進(jìn)植物組織的酚類物質(zhì)排出，有利于促進(jìn)鐵皮石斛器官形成，對其形態(tài)的改變有積極的促進(jìn)作用，活性碳的添加濃度范圍以0.5～10.0 g/L為佳。

4? ? 展望

鑒于鐵皮石斛培養(yǎng)階段、品種、外植體等差異會對研究成果產(chǎn)生直接影響，在鐵皮石斛組培過程中，應(yīng)根據(jù)品種、外植體及培養(yǎng)階段的不同科學(xué)選擇培養(yǎng)基，有效提升鐵皮石斛快速繁育效果。我國鐵皮石斛組織培養(yǎng)技術(shù)已趨于成熟，但在育種和藥用等方面還需加強(qiáng)研究，一是利用誘變、雜交和轉(zhuǎn)基因等現(xiàn)代生物育種技術(shù)，結(jié)合植物組織培養(yǎng)技術(shù)，快速培育抗蟲抗病性強(qiáng)、藥用價值高的優(yōu)良品種;二是加強(qiáng)探索組培過程中藥用活性成分的積累規(guī)律和不同培養(yǎng)添加物及培養(yǎng)條件對藥用活性成分的影響。

5? ? 參考文獻(xiàn)

[1] 李志賢，林永珍，葉思群，等.鐵皮石斛組培苗移栽與仿野生樹栽研究[J].綠色科技，2017（11）：231-232.

[2] 饒寶蓉，陳泳和，江文清，等.鐵皮石斛不同外植體組培快繁技術(shù)比較[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017（4）：138-141.

[3] 林江波，王偉英，李海明，等.鐵皮石斛莖段原球莖的誘導(dǎo)、分化與植株再生[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，31（10）：1075-1079.

[4] 楊立昌，乙引，張宇斌，等.鐵皮石斛快速繁殖體系研究[J].北方園藝，2010（22）：136-138.

[5] 王福喜.鐵皮石斛組織培養(yǎng)研究[J].陰山學(xué)刊（自然科學(xué)），2011（1）：31-34.

[6] 蔣向輝，佘朝文，王善粉.不同激素濃度對鐵皮石斛高效快繁體系的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：76-78.

[7] 唐桂香，黃福燈，周偉軍，等.鐵皮石斛的種胚萌發(fā)及其離體繁殖研究[J].中國中藥雜志，2005（20）：4.

[8] 楊平飛，吳明開，宋智琴，等.不同激素配比對鐵皮石斛組培叢生芽增殖的影響[J].北方園藝，2016（6）：106-108.

收稿日期? ?2020-03-10