TNF-α、IL-6及HE4和CA125在EAOC患者中的診斷價(jià)值①

高翠紅 孫文杰 于艷麗 崔嬌姣 周鵬翔 杜潘艷 蒙長(zhǎng)虹

(唐山市婦幼保健院檢驗(yàn)科,唐山 063000)

子宮內(nèi)膜異位癥( endometriosis，EM)是一種婦科常見(jiàn)的慢性炎癥性疾病，是子宮內(nèi)膜組織在子宮腔被覆黏膜以外的身體其他部位種植、存活而引起的一種病變。有研究發(fā)現(xiàn)，EM患者子宮內(nèi)膜組織分泌的炎癥因子白細(xì)胞介素(IL-6) 和腫瘤壞死因子α(TNF-α)等水平均升高[1]。子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性卵巢癌(endometriosis-associated ovarian cancer，EAOC)是指與EM密切相關(guān)，可能從EM惡變而來(lái)的一組特殊的上皮性卵巢腫瘤[2，3]。研究表明，EM作為卵巢癌的誘因與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系，其并發(fā)卵巢癌的患病率是正常人群的4倍以上[4].國(guó)外有報(bào)道稱(chēng)腫瘤標(biāo)志物人附睪蛋白4(HE4)及糖類(lèi)抗原125(CA125)在EAOC人群中升高[5]，EAOC兼有EM和卵巢癌的雙重特征，國(guó)內(nèi)對(duì)EAOC的實(shí)驗(yàn)室診斷研究較少，本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)研究炎癥因子TNF-α、IL-6和腫瘤標(biāo)志物HE4、CA125在EAOC中表達(dá)水平，探討其在EAOC診斷中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1一般資料 所有病例均為2014年7月～2018年9月在唐山市婦幼保健院初診住院的患者，其中EAOC組52例，平均年齡(42.7±7.8)歲；卵巢漿液性癌 32例平均年齡(49.2±13.6)歲；EM組35例，平均年齡(37.1±14.2)歲；卵巢良性腫瘤組30例,平均年齡(29.7±10.5)歲。所有入組病例均經(jīng)術(shù)后病理診斷證實(shí)，其中 EAOC的病理診斷嚴(yán)格遵循國(guó)際診斷金標(biāo)準(zhǔn)(Sampson-Scott診斷標(biāo)準(zhǔn))[6]。所有患者均為首發(fā)病例，術(shù)前均未行放化療，同時(shí)排除轉(zhuǎn)移性卵巢惡性腫瘤及其他系統(tǒng)腫瘤，婦科炎癥和免疫系統(tǒng)疾病。選取同期在我院健康體檢的女性30例為對(duì)照組，平均年齡(31.7±8.8)歲，心、肝、腎和胰腺功能正常，無(wú)其他良惡性腫瘤，近期無(wú)感染，沒(méi)有應(yīng)用免疫制劑及激素類(lèi)藥物。本研究得到唐山市婦幼保健院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有對(duì)象均知情同意。

1.1.2EAOC組織學(xué)分級(jí)和病理分期 EAOC患者按組織學(xué)分級(jí)分為高分化癌28例，低分化癌24例。按FIGO病理分期標(biāo)分為,Ⅰ、Ⅱ期共32例，Ⅲ期、Ⅳ期共20 例。

1.1.3儀器和試劑 DXI800化學(xué)微粒子發(fā)光免疫分析儀和原廠配套試劑盒購(gòu)自美國(guó)貝克曼；ELISA試劑購(gòu)自上海圓創(chuàng)生物技術(shù)有限公司；酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Thermo公司。

1.2方法 所有受試者的血液樣本均為入院第二天清晨空腹采集。采用ELISA法測(cè)定TNF-α、IL-6含量，用微粒子化學(xué)發(fā)光法測(cè)定HE4和CA125含量。以上檢測(cè)需嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和試劑使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，檢測(cè)當(dāng)日儀器狀態(tài)穩(wěn)定，試劑定標(biāo)通過(guò)，質(zhì)控在控。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、溫度、濕度等均符合操作規(guī)程的要求。

2 結(jié)果

2.1各組病例的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)比較 由表1可知，EAOC組和漿液性卵巢癌組CA125、HE4及 IL-6和TNF-α均高于EM組、良性腫瘤組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；EAOC組CA125和HE4均高于漿液性卵巢癌組，IL-6和TNF-α均低于漿液性卵巢癌組;EM組與良性腫瘤組，除IL-6略有升高外，其他指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2EAOC組病例不同組織學(xué)分級(jí)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 不同分級(jí)的EAOC組病例中，低分化組CA125、HE4及IL-6和TNF-α表達(dá)水平較高分化組升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表1 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)在各組間的比較

表2 各指標(biāo)在不同分級(jí)的EAOC組病例的比較

表3 各指標(biāo)在不同臨床分期的EAOC組病例的比較

表4 HE4及IL-6診斷EAOC的ROC曲線分析

圖1 HE4及IL-6診斷EAOC的ROC曲線Fig.1 ROC curve of HE4 and IL-6 for EAOC diagnosis

2.3EAOC組病例不同病理分期的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 EAOC組病例中，CA125、HE4及IL-6和TNF-α的表達(dá)水平均隨臨床分期的增加而增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

2.4炎癥因子與腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)性分析 經(jīng)Spearman 等級(jí)相關(guān)分析統(tǒng)計(jì)，證實(shí)EAOC患者HE4與CA125和IL-6均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為(r=0.415,P<0.05;r= 0.362,P<0.05)，HE4和TNF-α無(wú)相關(guān)性。

2.5炎癥因子與腫瘤標(biāo)志物在EAOC中的診斷價(jià)值 通過(guò)ROC曲線評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)HE4、CA125、IL-6和TNF-α在EAOC中的診斷價(jià)值，AUC在0.5以下，說(shuō)明該指標(biāo)診斷價(jià)值很小，在0.5～0.7之間表示有較低的準(zhǔn)確性，在0.7～0.9之間表示有較高的準(zhǔn)確性。本研究中CA125、TNF-α的AUC分別為0.615和0.571，診斷價(jià)值較低，而HE4及IL-6的AUC分別0.778和0.762，有較高的準(zhǔn)確性，將二者聯(lián)合檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其AUC為0.905，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異性分別為89.7%和95.2%，高于單項(xiàng)檢測(cè)。見(jiàn)圖1和表4。

3 討論

EM在組織上屬于婦科良性病變，但其具有侵襲、轉(zhuǎn)移、惡變成相關(guān)惡性腫瘤的特征[7]，卵巢是常見(jiàn)的侵襲部位。卵巢子宮內(nèi)膜異位癥，尤其是EM相關(guān)卵巢癌嚴(yán)重危害女性的健康，近年來(lái)，EM惡變成EAOC的問(wèn)題日益成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。有報(bào)道稱(chēng)EM和EAOC的發(fā)生、發(fā)展與炎性血管生成緊密相關(guān)，炎癥的存在是腫瘤發(fā)病原因之一，炎癥因子的代謝紊亂影響了炎癥和腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。IL-6和TNF-α是機(jī)體內(nèi)有代表性的炎癥因子，IL-6 是淋巴細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞及某些腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，調(diào)節(jié)機(jī)體損傷和炎癥反應(yīng)的炎癥因子。機(jī)體發(fā)生炎癥時(shí)，血清中IL-6含量會(huì)迅速升高[8]。在腫瘤發(fā)生損傷、壞死或者炎癥時(shí)，IL-6水平也會(huì)升高。因此，IL-6可以作為早期診斷腫瘤炎癥反應(yīng)的一個(gè)重要指標(biāo)。TNF-α作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，損傷內(nèi)皮細(xì)胞或?qū)е卵芄δ芪蓙y，使血管損傷和血栓形成，并可使腫瘤組織的局部血流阻斷而發(fā)生出血、缺氧壞死。TNF-α還可以促進(jìn)腫瘤間質(zhì)的生長(zhǎng)及腫瘤血管的形成，為腫瘤細(xì)胞的增殖提供良好的環(huán)境。TNF-α對(duì)卵巢惡性腫瘤免疫功能的調(diào)節(jié)作用，可促進(jìn)T細(xì)胞及其它殺傷細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷。本研究結(jié)果表明，IL-6、TNF-α與EAOC的病程、病情相關(guān)，EAOC組高于漿液性卵巢癌組，癌癥組高于EM組，病情越嚴(yán)重，IL-6、TNF-α水平越高，炎癥反應(yīng)程度越高。EM是由于細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子聚集形成的局部炎癥反應(yīng)，炎癥導(dǎo)致血管生成，細(xì)胞增殖，進(jìn)而導(dǎo)致侵襲和轉(zhuǎn)移[9]。同時(shí)炎癥促進(jìn)了子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)和侵襲，子宮內(nèi)膜從異位轉(zhuǎn)變成腫瘤狀態(tài)[10]。有研究發(fā)現(xiàn)，EM中的炎癥反應(yīng)是由補(bǔ)體系統(tǒng)介導(dǎo)產(chǎn)生的，并在EAOC中保持活性狀態(tài)，而在漿液性卵巢癌中則無(wú)此現(xiàn)象，推測(cè)EAOC的主要病變特點(diǎn)為炎癥改變[11]。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致[12]，這些結(jié)果提示EAOC患者疾病過(guò)程中存在炎癥反應(yīng)，臨床分期越高，炎癥反應(yīng)程度越高，腫瘤越容易發(fā)生轉(zhuǎn)移。CA125和HE4是預(yù)測(cè)卵巢癌的有效指標(biāo)，可用于卵巢腫瘤患者的療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估，EM中也可見(jiàn)二者的升高。臨床上通常通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)CA125和HE4來(lái)提高卵巢癌診斷的靈敏度和特異性[13]。CA125和HE4在EM和卵巢良性腫瘤中也有表達(dá)[14，15],有研究證實(shí)，EAOC與漿液性卵巢癌相比，發(fā)病期和病變期早，病理分級(jí)處于高分化的較多，且CA125和HE4在EAOC中較漿液性卵巢癌水平低，一般分別小于200 U/ml或200 pmol/L[16]。本研究中Ⅰ、Ⅱ期EAOC有25例，占71.43%，高分化21例，占60%。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，癌癥組CA125和HE4水平高于EM組和對(duì)照組，且與腫瘤的分期和分級(jí)相關(guān)，發(fā)病越早，分化越高，CA125和HE4水平越低。研究證實(shí)，漿液性卵巢癌發(fā)生腹水的比例較大，腹水中CA125和HE4含量是血清中的8倍，處于早期的EAOC患者未產(chǎn)生腹水，可能是血清中CA125和HE4水平低于漿液性卵巢癌的原因之一[17]。ROC曲線顯示，HE4及IL-6對(duì)早期診斷EAOC具有較高的診斷價(jià)值，二者聯(lián)合檢測(cè)價(jià)值最高，研究結(jié)果顯示聯(lián)合檢測(cè)HE4及IL-6的敏感度和特異性均明顯高于單一檢測(cè)，表明血清聯(lián)合檢測(cè)HE4及IL-6可以減少EAOC的漏診，提高診斷的敏感度和特異性，具有重要應(yīng)用價(jià)值。綜上所述，炎癥因子TNF-α、IL-6和腫瘤標(biāo)志物HE4、CA125在EAOC中均有表達(dá)，聯(lián)合檢測(cè)HE4和IL-6對(duì)EAOC的早期發(fā)現(xiàn)有較高的靈敏度和特異性，并可以和漿液性卵巢癌相鑒別，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。