EMR-Lipid-超高效液相色譜-串聯質譜法快速測定豬肉中多種氨基甲酸酯類農藥殘留量

鐘水橋 梁美艷

摘 要：建立EMR-Lipid-液相色譜-串聯質譜法快速測定豬肉中12種氨基甲酸酯類農藥殘留量。樣品經乙腈均質提取，無水乙酸鈉去除水分，采用增強型基質去除凈化管EMR-Lipid凈化后，以超高效液相色譜-串聯質譜法多反應監測掃描模式進行定性定量分析。方法線性相關系數均大于0.998，檢出限為0.5 μg·kg-1，定量限為1.0 μg·kg-1，在1、2、5 μg·kg-13個濃度添加水平下，平均回收率為76.1%～115.1%，相對標準偏差為2.3%～4.6%。該方法靈敏度高、重現性好、回收率穩定且檢測速度快、定量準確，適用于豬肉中多種氨基甲酸酯類農藥殘留量測定。

關鍵詞：超高效液相色譜-串聯質譜法;EMR-Lipid;氨基甲酸酯類;豬肉

Abstract：A new method of determination for 12 carbamate pesticide residues in Pork by UHPLC-MS/MS was developed.The samples were homogeneous extracted with acetonitrile，then anhydrous sodium acetate remove the water， After purification with enhanced matrix removal purification tube EMR-Lipid， the qualitative and quantitative analysis was performed by using UHPLC-MS/MS multiple reaction monitoring scanning mode.The linear correlation coefficients of the methods were all greater than 0.998， the detection limit was 0.5 μg·kg-1， and the limit of quantification was 1.0 μg·kg-1. Average recoveries for 12 targets at spiked levels of 1， 2 and 5 μg·kg-1 ranged from 76.1% to 115.1% with relative standard deviations of 2.3% to 4.6%. This method has high sensitivity， good reproducibility， stable recovery， rapid detection， and accurate quantification， it is suitable for the determination of various carbamate pesticide residues in pork.

Key words：UHPLC-MS/MS; EMR-Lipid; Carbamate pesticides; Pork

氨基甲酸酯類農藥具有低毒、高效、分解快、殘留期短和選擇性強的特點，作為有機氯農藥的替代品，被廣泛使用。玉米、小麥等飼料作物中殘留的氨基甲酸酯類農藥可經過養殖動物攝入并通過食物鏈進入人體。目前國內對氨基甲酸酯類農藥殘留分析的文獻報道有水產品、水果、蔬菜、中藥等[1-4]，但在動物源性食品中氨基甲酸酯類農藥殘留的研究較少[5-6]，因此迫切需要建立一種簡便、快速、準確的方法檢驗動物食品中的氨基甲酸酯類殘留。

EMR-Lipid是一種新型吸附材料，能夠選擇性除去樣品萃取物中的主要脂類且不會造成分析物的損失。本研究通過對樣品前處理條件的優化，即乙腈提取，EMR-Lipid凈化后上LC-MSMS進行分析，此方法極大的提高豬肉中脂類基質和氨基甲酸酯類農藥的有效分離和檢測，從而建立了一種簡便、快速、準確測定動物源性食品中氨基甲酸酯類的分析方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器。液相色譜-質譜聯用儀（LC-1290/QQQ-6490）：安捷倫科技有限公司;分散均質機T18 DS25：德國IKA;離心機Allegra X-15R：BECKMAN;EMR-Lipid（3 mL/300 mg）：安捷倫科技有限公司;無水乙酸鈉：國藥集團化學試劑有限公司;乙腈（HPLC級）：德國Merck公司;

試劑。12種氨基甲酸酯類農藥標準品：涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、速滅威、殘殺威、克百威、甲萘威、異丙威、仲丁威、滅蟲威（純度>95.0%），購自德國Dr.Ehrenstorfer公司。

1.2 標準儲備液的配制

分別稱取12種農藥標準品10.00 mg（精確至0.000 1 g）于12個10 mL容量瓶中，加少量乙腈振蕩溶解后，以乙腈定容，配制成1.0 mg·mL-1的12種農藥單標儲備液，儲存于4 ℃冰箱。

1.3 試驗方法

1.3.1 提取及凈化

稱取5 g試樣，精確至0.01 g，于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈均質5 min，加入2 g無水乙酸鈉，振蕩2 min，8 000 r·min-1離心5 min，取上清液3 mL過EMR-Lipid凈化柱，棄去初濾液，續濾液過0.22 μm有機濾膜，供LC-MS/MS測定。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：ACE Ultracore Super C18柱（2.5 μm，x2.1 mm× 100 cm）。流動相：0.1%甲酸水（A相）和乙腈（B相）。梯度洗脫程序：0～0.5 min，20%B～35%B;0.5～2.0 min，35%B～90%B;2.0～3.5 min，90%B;流速：0.35 mL·min-1。柱溫：35 ℃。進樣量：2.0 μL。

1.3.3 質譜條件

離子源為電噴霧離子源（ESI），正離子模式，多反應監測（MRM）在分析過程中，以離子對信息比較和保留時間進行定性分析;以母離子和響應高的子離子通道進行定量分析，12種氨基甲酸酯類農藥定性定量離子對、碰撞能量（CE）如表1所示。

2 結果與分析

2.1 線性關系與檢出限

取1.2中標準儲備液分別采用空白豬肉提取液作為標準溶液的稀釋液進行稀釋，配制成約1.0～10.0 μg·L-1的混合標準工作溶液。以峰面積（Y）對其質量濃度（z）作標準曲線。結果表明，在相應質量濃度范圍內，12種氨基甲酸酯類農藥的響應值與其質量濃度的線性關系良好（r2>0.998）。各農藥的LOD及LOQ分別為0.5 μg·kg-1和1.0 μg·kg-1。結果見表2。

2.2 回收率與精密度

在新鮮豬肉空白試樣中加入混合標準溶液（設1、2、5 μg·kg-13個濃度梯度），每個濃度設置6個重復，按上述前處理和分析方法，測農藥在豬肉試樣中的添加回收率，結果見表2，12種氨基甲酸酯類農藥在豬肉中的平均回收率為76.1%～115.1%，相對標準偏差為2.3%～4.6%，該方法具有較好的精密度，符合痕量分析的要求。

3 結論

本研究將EMR-Lipid用于豬肉中農藥殘留的前處理凈化，并結合HPLC-MS/MS分析，建立了一種快速、準確測定豬肉中12種氨基甲酸酯類農藥殘留的分析方法。實驗結果表明EMR-Lipid凈化效果良好，有效降低了豬肉中油脂。該方法操作簡便、選擇性好、準確度高，可作為豬肉中多種氨基甲酸酯類農藥殘留的測定方法。

參考文獻：

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[5]邢 宇.基于新型分散固相萃取技術測定動物源食品中的農藥多殘留[D].泰安：山東農業大學，2016.

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