全自動染色封片機的中性樹膠與室溫的關系

席 雷，楊春青

秋冬季節天氣多變，病理切片的染色和制片水平極易受天氣影響出現各種問題[1-2]。切片質量不僅與染色時間有關，而且與室溫有密切關系。室溫可直接影響封片所用中性樹膠的黏稠度。日常工作中，常常由于染色封片人員的疏忽，造成同一批切片的封片質量不佳，出現空泡和溢膠現象。其實這種現象可以在每年換季時提前準備，選擇設立封片機冬令和夏令模式而避免。本文將針對全自動染色封片機的中性樹膠黏稠度變化及相關調節進行探討，現介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料載玻片(7105)，蓋玻片。

1.2 儀器及試劑徠卡全自動封片機(CV5030)，溫度計，中性樹膠，二甲苯。

1.3 方法打開全自動封片機，長按滴膠按鈕，即可進入調整模式[3-6]；然后對滴膠數值進行增減。隨季節變化選擇性設置封片機的冬令或夏令模式。

2 結果

當正確設置封片機冬令和夏令模式后，病理切片中細胞質和細胞核紅藍對比清晰，染色均勻；封片中無空泡現象和溢膠現象，并且其外觀整潔，不粘手(圖1)。

3 討論

當冬季室溫下降，中性樹膠變得黏滯不易流動，使用全自動封片機封固時，易出現較大的氣泡，影響病理醫師的閱片感受，甚至干擾診斷。當夏季室溫上升，中性樹膠變稀，流動性變大，在全自動封片機封片過程中易出現溢膠現象；若切片人員的手觸摸切片，常常手指沾滿樹膠，同樣給病理醫師、貼標簽人員和歸檔人員造成困擾。

圖1 封片中無空泡現象和溢膠現象，并且其外觀整潔，不粘手

由于封片中使用的中性樹膠一般以二甲苯作為溶劑，使中性樹膠擴散到整張蓋玻片區域。當二甲苯揮發后，中性樹膠發揮透明和粘貼固定的作用，使切片易于觀察和保存。在手動封片中，由于容易調節滴膠黏稠度，所以不存在滴膠黏稠度的問題。但在全自動染色封片機中，常因為滴膠黏稠度變化，造成空泡和溢膠現象。其常用的避免空泡和溢膠的方法有2種[7-9]：(1)增加或傾倒封片缸中的二甲苯，通過改變二甲苯的液面高度來控制封片中的中性樹膠黏稠度；(2)直接在中性樹膠中添加不同比例的二甲苯。但第一種方法很難精確控制，無法根據預兆來采取措施避免錯誤的發生，一般是在出現問題后才補救；而第二種方法只有當二甲苯揮發后，中性樹膠黏稠度才會改變，同樣難以控制。當我們選擇性設置封片機的冬令或夏令模式時，中性樹膠的黏稠度變得適中，并未產生氣泡或溢膠現象，給工作帶來了方便。作者總結出一個新的避免方法：讓負責染色封片的技術員及時地設立封片機的冬令和夏令模式，并且每天留心天氣預報，同時在染色封片機的房間墻上懸掛溫度計，根據室溫的變化情況改變封片機和中性樹膠的滴膠數值。對于有條件的單位，應在全自動染色封片機的房間內安裝暖氣或空調設施，使溫度穩定在10～20 ℃。若出現不合格的切片，應及時重新封片。作者根據經驗總結封片機的調試方法：最高室溫20 ℃以上或最低室溫10 ℃以上，滴膠數值設置為1；最高室溫10～20 ℃或最低室溫5～10 ℃，滴膠數值設置為2；最高室溫10 ℃以下或最低室溫5 ℃以下，滴膠數值設置為3或4(這是南京地區得出的經驗，其它地區應適當調整其參數)。