兒童血清抗中性粒細胞胞漿抗體在相關性腎炎早期診斷中的臨床意義

李清強

抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）會引起自身免疫性疾病。文獻報道，ANCA 相關性小血管炎（AASV）是一組包括韋格納肉芽腫、顯微鏡下多血管炎及特發性、壞死性、新月體性腎小球腎炎等疾病的綜合征[1]，在西方國家是最常見的自身免疫性疾病之一[2]。腎臟為本病常見和致死性受累部位，ANCA 陽性的腎炎被稱為ANCA 相關性腎炎，也稱為原發性急進性腎小球腎炎，病情多進展迅速，如不及時治療，往往造成不可逆的腎小球損害而導致終末期腎衰竭[3]。我國對此類的ANCA 相關性腎炎報道不多，近幾年來北京大學第一醫院腎臟內科新診斷出400 多例，說明該病在我國也不少見[1，2]。ANCA 已逐漸受到重視，為了探討兒童腎病中ANCA 相關性腎炎檢出率以及ANCA 測定在ANCA 相關性腎炎早期診斷的意義，本研究對296 例腎病兒童進行ANCA 檢測并與腎病相關的生化檢測情況進行初步分析和探討。

1 材料與方法

1.1 樣品選擇樣品來源于2018年1月～2019年12月門診與住院的腎病兒童血清296 例，均具有腎病的一種或多種臨床癥狀或臨床已明確診斷為各種腎病。在該院體檢正常的兒童血清樣品50 例作為正常對照組，經ANCA 檢測陰性的樣品中隨機選取50例作為陰性對照組。296 例血清樣品經ELTSA 法測定ANCA 為陽性的37 例為ANCA 陽性組。

1.2 材料采用美國Zeus Scientific，Inc 公司生產的ANCA 酶免試劑盒。上海科華KHBst-360 自動多功能酶標儀。日本日立7170A 全自動生化分析儀。生化檢測試劑是：Cr 試劑（日本第一化學株式會社）、Urea（中生北控生物科技股份有限公司）。

1.3 方法空腹抽血2ml，2 000rpm 離心5min 分離血清。ANCA 測定應用ELISA 法。原理：患者血清中含有的特異的抗體與反應板上包被的MPO 和PR-3混合抗原結合，加入酶結合物后與結合在固相上的抗體結合，經過孵育、洗滌洗去未結合的抗體及酶標結合物，加入底物后顯色深淺與標本中抗體的濃度成比例。操作及結果判定嚴格按試劑盒說明書進行。生化指標（Cr、Urea）用酶法檢測，操作嚴格按日立7170A 全自動生化分析儀操作規程進行。

1.4 統計學方法統計分析用SPSS 10.0 統計軟件。檢測結果用均數±標準差（±s）表示，組間比較用兩獨立樣本t檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

296 例腎病患兒臨床表現為腎病初期癥狀者186 例，其中血尿154 例，ANCA 陽性20 例（12.99%），浮腫32 例，陽性4 例（12.50%）。臨床診斷為腎炎42 例，ANCA 陽性9 例（21.43%），腎病綜合征68 例，陽性4 例（5.88%）。

ANCA 陽性組與ANCA 陰性組以及與正常對照在腎病生化指標（Cr、Urea）方面比較均無統計學差異（P均＞0.05）。

表1 ANCA 陽性與陰性及正常對照各組之間 血清Cr、Urea 水平比較

3 討論

抗中性粒細胞胞漿抗體（Antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是一簇能與人中性白細胞胞質成分反應，并與臨床一些炎性疾病密切相關的多樣化的自身抗體。最早是在壞死性或新月型腎小球腎炎患者的血液中發現的，是近10 多年來發展起來的一種診斷原發性小血管炎的重要檢測項目[3，4]。ANCA 相關性小血管炎（ANCA associated systemic vasculitis，AASV）是西方國家最常見的自身免疫性疾病之一[5]，是一組可累及全身各臟器的疾病，也是繼發因素所致快速進行性腎小球腎炎的常見原因[2]。本組結果顯示ANCA 在腎病患兒中檢出率達12.50%，可見兒童AASV 累及腎臟病變的可能性較大，應引起重視。而且有文獻報道該病采用腎穿刺活檢證實有一定的困難，尋求一種早期診斷的指標顯得尤為重要[3]。目前臨床已將ANCA 相關性腎炎歸入原發性系統性血管炎的腎損害范疇，血清中存在抗中性粒細胞胞漿抗體正是本病最具特征的佐證[6]。本組研究中，ANCA 陽性組、ANCA 陰性組及正常對照組中血清的Cr、Urea 差異均無統計學意義，說明依靠血清生化指標是無法鑒別更無法診斷出ANCA 相關性腎炎，但能依靠ANCA 檢測作出鑒別并對進一步的診斷起重要作用。從本實驗結果表1可知ANCA 陽性組Cr 水平為（73.23±139.71）μmol/L，Urea 水平為（6.82±11.91）mmol/L（SD 值較大，這是由于該組有2 例腎衰的患者樣品，其血清Cr 和Urea 含量較高而引致這種情況的出現）。這種情況反過來又更證明了Cr、Urea 不能反映ANCA陽性與陰性之間的差異，因為腎衰已不是腎病早期，腎衰患者標本可不計算在內，那么陰陽兩組間的比較將更無差異。

本組研究還發現ANCA 陽性組37 例中臨床診斷為腎衰的有兩例，其發病率為5.4%（2/37），這與文獻報道老年患者高達91.1%相差甚遠，其原因可能是兒童腎臟的代償能力較好，這提示我們ANCA相關性腎炎的疾病進程與預后兒童與成人可有所不同，他們之間的區別尚有待進一步的研究。

對于ANCA 相關疾病的發病機理尚未完全清楚，在一些體內外實驗研究中發現，ANCA 是通過激活毛細血管中中性粒細胞、單核細胞，引起溶酶菌釋放，導致大面積血管或組織損害；或ANCA 引發T 細胞介導的細胞免疫協同造成組織損傷（如造成腎小球腎炎、小血管炎等）的結果[3]。

因此，檢測血清中ANCA 對ANCA 相關性腎炎的早期診斷、治療與療效分析都有重要的臨床意義，特別是兒童患兒。兒童AASV 累及腎臟病變的可能性較高，即腎病患兒中有一部分為ANCA 相關性腎炎，血清中存在抗中性粒細胞胞漿抗體是本病最具特征的佐證，其發病機制、治療及預后等有它自己的特點，應引起重視。

依靠血清生化指標無法鑒別或診斷出ANCA相關性腎炎，只能依靠ANCA 檢測；在腎病早期血清中已可檢測出ANCA，所以血清ANCA 檢測在ANCA 相關性腎炎的早期診斷中具有重要意義。