豬輪狀病毒的分子流行病學(xué)研究進(jìn)展

王小燕

摘 要：輪狀病毒是世界范圍內(nèi)廣泛流行的中人畜共患病，在當(dāng)前的生豬養(yǎng)殖中，輪狀病毒的感染經(jīng)常導(dǎo)致養(yǎng)殖戶受到巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬輪狀病毒的感染會(huì)引起哺乳仔豬和斷奶仔豬出現(xiàn)急性腸胃炎癥狀，而且目前該病并沒(méi)有特效藥物進(jìn)行治療，致死率較高，加強(qiáng)對(duì)該病毒的分析流行病學(xué)的研究也是提高當(dāng)前臨床治療水平的技術(shù)?；诖?，本文就豬輪狀病毒的分子流行病學(xué)研究緊張進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞：豬輪狀病毒;分子流行病學(xué);研究

引 言

豬輪狀病毒是導(dǎo)致哺乳仔豬和斷奶仔豬出現(xiàn)腸道疾病的重要病原，臨床表現(xiàn)以厭食、嘔吐、水樣腹瀉為主要特征，嚴(yán)重的會(huì)脫水死亡。輪狀病毒基因群、基因型多樣，且不同國(guó)家和地區(qū)流行類(lèi)別不同，掌握輪狀病毒的分子流行情況和動(dòng)態(tài)變化規(guī)律對(duì)預(yù)防和控制該病具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1、豬輪狀病毒的分子結(jié)構(gòu)

1974年英國(guó)首次報(bào)道了豬輪狀病毒，隨后在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)相繼報(bào)道了該病，我國(guó)于1981年在腹瀉仔豬糞便中首次分離到該病毒。豬輪狀病毒為呼腸病毒科、輪狀病毒屬、雙鏈RNA病毒，基因組包含11段雙鏈RNA，編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白和5種非結(jié)構(gòu)蛋白。病毒粒子有3層衣殼，呈20面體對(duì)稱(chēng)。最外層為VP7和VP4，VP7由基因9編碼，這種糖蛋白可以有效中和抗原蛋白，具有穩(wěn)定VP4結(jié)構(gòu)的作用;VP4由基因4編碼，可以在病毒侵入細(xì)胞時(shí)起到重要作用。中間層為VP6，由基因6編碼，具有抗原特異性。最內(nèi)層為VP2、VP1和VP3，其包裹著輪狀病毒的基因組RNA。VP1和VP3具有RNA轉(zhuǎn)錄酶和修飾酶活性[1]。

2、豬輪狀病毒的致病機(jī)制

輪狀病毒有十分特異的細(xì)胞趨向性，其侵入機(jī)體內(nèi)部后只會(huì)感染小腸絨毛頂端的腸上皮細(xì)胞，一般會(huì)導(dǎo)致腸絨毛變短、變稀疏，微絨毛不規(guī)則，從而改變了小腸絨毛上皮細(xì)胞的功能，包括破壞葡萄糖偶聯(lián)的鈉的轉(zhuǎn)運(yùn)功能、降低雙糖酶的活性、增強(qiáng)胸腺嘧啶激酶活性等方面，最終導(dǎo)致患病機(jī)體出現(xiàn)吸收不良性腹瀉癥狀。朱感染輪狀病毒后，其細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度會(huì)增加，從而破壞細(xì)胞骨架，使得細(xì)胞的緊密性受到影響，因此輪狀病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白NSP4就會(huì)滲入到細(xì)胞中，并且誘導(dǎo)產(chǎn)生依賴(lài)年齡和病毒劑量的腹瀉。

3、豬輪狀病毒的基因流行情況

豬輪狀病毒在世界范圍內(nèi)的流行率高達(dá)67.3%，其中規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)的感染率更是達(dá)到了74%。該病毒的感染并沒(méi)有季節(jié)性限制，但有時(shí)空變動(dòng)，某些特定基因型可能會(huì)重復(fù)出現(xiàn)。當(dāng)前已知的豬輪狀病毒有12種G基因型和16種P基因型。G基因型有G1～G6，G8～G12，G26;P基因型有P[1]～P[8]、P[11]、P[13]、P[19]、P[23]、P[26]、P[27]、P[32]和P[34]）與豬相關(guān)。在當(dāng)前面的生豬養(yǎng)殖過(guò)程中，豬輪狀病毒在豬體中的較為普遍流行G基因型一般有與P[5]，P[6]、P[7]和P[13]組合的形式，占所有豬A群輪狀病毒的37.3%

4、豬輪狀病毒實(shí)驗(yàn)室診斷

在腹瀉發(fā)生24h內(nèi)收集動(dòng)物小腸和它的內(nèi)容物或者糞便，可以對(duì)病毒或病毒抗體進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)病毒分離鑒定、RT-PCR技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫技術(shù)等分子生物學(xué)方法可以做出有效的檢測(cè)結(jié)果。

4.1 病毒分離鑒定

通過(guò)對(duì)輪狀病毒的分離與鑒定能夠較為準(zhǔn)確的診斷出其實(shí)際病癥，一般就是對(duì)腹瀉豬糞便離心、染色后圖片鏡檢。通過(guò)鏡檢發(fā)現(xiàn)輪狀病毒粒子存在即為陽(yáng)性。

4.2 免疫熒光技術(shù)

將患病仔豬的空腸或內(nèi)容物制成壓片，之后使用豬輪狀病毒熒光抗體染色進(jìn)行鏡檢，可以發(fā)現(xiàn)腸絨毛上皮的胞漿區(qū)域有熒光。

4.3? RT-PCR技術(shù)

RT-PCR技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中具有操作簡(jiǎn)單，高敏感性、高特異性等優(yōu)點(diǎn)，能夠較為快速的檢測(cè)出豬輪狀病毒，而且隨著分析生物學(xué)技術(shù)的進(jìn)步發(fā)展，RT-PCR技術(shù)得到應(yīng)用也越加成熟。

4.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作較為便捷，重復(fù)性也比較高，通過(guò)檢測(cè)RV的雙抗體夾心ELISA法能夠較好的完成病毒檢測(cè)工作。

4.5 膠體金免疫技術(shù)

膠體金免疫技術(shù)零污染、低價(jià)格、簡(jiǎn)便、快速，而且檢測(cè)輪狀病毒的膠體金試紙條的檢測(cè)結(jié)果也比較的準(zhǔn)確。

5、豬輪狀病毒的防治

5.1 治療

在當(dāng)前臨床中并沒(méi)有針對(duì)輪狀病毒的特效抗病毒藥，通常使用一些抗生素藥物進(jìn)行治療，或者是液體療法。比如飲用葡萄糖甘氨酸溶液，或者靜脈注射5%～10%葡萄糖鹽水和10%碳酸氫鈉溶液。在以上治療方式中，含葡萄糖-甘氨酸的電解質(zhì)溶液能夠減緩輪狀病毒性腹瀉造成的脫水和減重，因此可起到良好的治療效果[2]。

5.2 預(yù)防

5.2.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

生豬養(yǎng)殖中加強(qiáng)思與昂管理能夠有效降低病毒的侵襲，應(yīng)為生豬營(yíng)造一個(gè)良好的豬舍環(huán)境，保證通風(fēng)透光條件，定期做好消毒，減少糞便堆積等。在生豬養(yǎng)殖過(guò)程中，溫度的控制至關(guān)重要，一般當(dāng)室溫為35℃時(shí)，患病仔豬的死亡率顯著下降;同時(shí)還需要保證飼料的營(yíng)養(yǎng)均衡，進(jìn)一步提高豬的機(jī)體免疫力。

5.2.2免疫接種

接種疫苗是防控豬輪狀病毒的重要方式，使用用輪狀病毒油佐劑滅活苗或豬輪狀病毒弱毒雙價(jià)苗對(duì)母豬或仔豬進(jìn)行預(yù)防注射能夠起到較好的免疫效果。接種方式為：妊娠母豬在生產(chǎn)前1個(gè)月接種油佐劑苗，在仔豬7日齡和21日齡時(shí)各接種1次。

結(jié) 語(yǔ)

綜上所述，豬輪狀病毒的流行會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)損失，基于對(duì)其分子流行病學(xué)的分析，相關(guān)動(dòng)物防疫部門(mén)也能夠根據(jù)其流行狀況采取針對(duì)性的防疫措施，養(yǎng)殖戶需要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，并且根據(jù)養(yǎng)殖場(chǎng)的實(shí)際情況做好科學(xué)的免疫接種工作，基層獸醫(yī)站要發(fā)揮好監(jiān)督職能，幫助養(yǎng)殖戶提高疫病防控效果，保證生豬養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1] 王瑞平.淺述豬輪狀病毒病[J].中國(guó)動(dòng)物保健，2020（02）：22-23.

[2] 張新廠.輪狀病毒的感染特點(diǎn)與防治措施[J].中國(guó)畜禽種業(yè)，2019（11）：155-156.