雛菊葉龍膽酮對腦缺血損傷的保護(hù)作用及機(jī)制探討

薛文泉

（鄭州市第一人民醫(yī)院，河南 鄭州，450000）

隨著人們生活水平的不斷提高，生活習(xí)慣的逐漸不良化，腦血管疾病的發(fā)生率也隨之上升，且具有較高的致殘率和致死率[1]。腦缺血是心血管系統(tǒng)常見的疾病之一，主要是指腦動脈痙攣、堵塞、狹窄導(dǎo)致的腦組織缺血缺氧。繼而導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞損傷。有關(guān)腦缺血的發(fā)病機(jī)理已經(jīng)深入研究，目前尚未明確，并且之間尚未發(fā)現(xiàn)治療腦缺血有效的藥物[2]。雛菊葉龍膽酮是一種提取于龍膽科獐牙菜屬植物（藏菌陳）中的一類化合物，其具有廣泛的藥理活性，迄今為止對于雛菊葉龍膽酮的研究還較少，大多數(shù)研究僅限于降血糖以及抗病毒和保肝方面，但已經(jīng)有研究者表示其在腦血管領(lǐng)域也具有一定的作用[3]。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗動物、藥品和試劑 實驗動物：健康的大、小鼠。藥品：將雛菊葉龍膽酮純品采用生理鹽水配置成實驗所需的濃度；尼莫地平、SOD、MDA試劑盒、谷氨酸、γ-氨基丁酸抗血清、SABC試劑盒；儀器：SXP-1手術(shù)顯微鏡、721-分光光度計、LXJ-I1型離心機(jī)、GL20全自動高速冷凍離心機(jī)、XW-80漩渦混合器。

1.2 實驗方法 通過小鼠斷頭法制備所需的安全性腦缺血模型，于雙耳連線處端頭。選取健康小鼠75只，均為雄性，體重在18—24g不等，平均（20.89±5.46）g。并隨機(jī)將其分成5組，每組15只，對照組、模型組以及高、中、低劑量組。給藥方法：所有小鼠均采用灌胃方式給藥，對照組：尼莫西平200mg·Kg-1，模型組：等量生理鹽水，受試組：雛菊葉龍膽酮50mg·Kg-1、75mg·Kg-1、100mg·Kg-1，在手術(shù)前兩天給藥，2次/日，手術(shù)當(dāng)天給藥30min后開始手術(shù)。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察小鼠斷頭后張口喘息時間以及腦指數(shù)，腦SOD活力，腦MDA含量，腦興奮性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA濃度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS18.0對本次研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理；計量資料用（±s）表示，并用t檢驗；P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 雛菊葉龍膽酮對小鼠斷頭后張口喘息時間的影響效果 與模型組比，雛菊葉龍膽酮50mg·Kg-1、75mg·Kg-1、100mg·Kg-1組對小鼠站口喘息延長時間為7.78%、13.34%、10.73%，并且統(tǒng)計學(xué)分析均具有顯著性差異（P＜0.05）。與尼莫西平組比較，雛菊葉龍膽酮50mg·Kg-1、100mg·Kg-1組統(tǒng)計學(xué)無顯著性差異（P＞0,05），僅 75mg·Kg-1組存在差異（P＜0.05），見表 1：

表1 各組小鼠斷頭后張口喘息時間的影響效果

2.2 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后腦指數(shù)、腦SOD活力，腦MDA含量，腦興奮性氨基酸Glu以及抑制性氨基酸GABA濃度影響較模型組而言，尼莫地平組以及雛菊葉龍膽酮50mg·Kg-1、75mg·Kg-1、100mg·Kg-1組上述指標(biāo)均有所改善，且具有顯著性差異（P＜0.05），較尼莫地平組而言，雛菊葉龍膽酮75mg·Kg-1組改善效果更加顯著（P＜0.05），詳見表2—表6：

表2 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后腦指數(shù)影響

表3 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后腦SOD活力影響

表4 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后腦興奮性氨基酸Glu影響

表5 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后腦MDA含量影響

表6 雛菊葉龍膽酮對大鼠腦缺血后抑制性氨基酸GABA濃度影響

3 討論

雛菊葉龍膽酮是獐牙菜屬植物中提取的一中酚性化合物，其藥理活性較廣。研究表示，其能夠興奮中樞神經(jīng)也能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，還具有抑制血管緊張肽活性，同時還具有降糖、抗炎以及抗病毒和保肝等作用，其還具有是雅興腦缺血再灌注保護(hù)作用[4]。獐牙菜屬植物資源豐富，并且雛菊葉龍膽酮含量較高，穩(wěn)定性較高，因此具有較高的開發(fā)前景[5]。通過本次研究能夠明顯看出，雛菊葉龍膽酮對腦缺血神經(jīng)系統(tǒng)具有一定而保護(hù)作用，以下是有關(guān)其作用機(jī)制的討論內(nèi)容：

近幾年來有關(guān)腦缺血損傷后神經(jīng)元的損傷機(jī)制的研究層出不窮，并已經(jīng)取得可觀的成績，有研究表示，腦缺血損傷可能是由于細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎性反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)鈣超載和興奮性氨基酸導(dǎo)致的CMDA受體被激活，或許還與自由基損害、細(xì)胞凋亡等有關(guān)[6]。在腦缺血的病理生理過程中細(xì)胞粘附因子具有重要的作用，持續(xù)性局部腦缺血細(xì)胞粘附因子在腦組織微血管內(nèi)皮細(xì)胞以及神經(jīng)元的細(xì)胞表達(dá)，在24h后達(dá)高峰。并且隨著細(xì)胞粘附因子的增加其功能也增強(qiáng)，繼而都愛孩子白細(xì)胞牢固的粘附在血管內(nèi)皮表面。一方面阻塞微循環(huán)通道，另一方面促進(jìn)炎性因子以及毒性自由基的釋放，繼而加重神經(jīng)組織損傷[7]。本次實驗提示，雛菊葉龍膽酮保護(hù)作用可能是通過阻斷血管內(nèi)皮細(xì)胞以及白細(xì)胞的粘附，繼而抑制中性粒細(xì)胞浸潤，進(jìn)一步減少缺血腦組織的炎癥反應(yīng)；還可能是由于雛菊葉龍膽酮具有較強(qiáng)的抗氧化作用，可以阻斷炎性細(xì)胞對內(nèi)皮細(xì)胞的刺激，繼而抑制內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生粘附因子，并且還能維持線粒體正常呼吸作用，并糾正膜離子轉(zhuǎn)運[8]。

通過本次研究可以初步得出，雛菊葉龍膽酮具有一定的腦組織保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能是通過抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。本次研究所選擇樣本容量較小，因此還需要選擇更大的樣本容量進(jìn)行研究，為以后腦缺血損傷臨床藥物治療提供參考。