重癥腦出血病人血清HSP70、HSP90水平與應激性潰瘍的關系

范路梅，魏 紅，謝小紅

腦出血是指非外力導致的血管破裂出血，其發生主要與腦血管病變有關，應激性潰瘍是重癥腦出血的主要并發癥之一，增加了重癥腦出血病人的死亡率[1]，應激性潰瘍有血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、血細胞比容(hematocrit，HCT)下降以及便隱血陽性等典型癥狀，但三者均為非特異性指標，因此，尋求簡便易行、特異性高的生化指標診斷是否發生應激性潰瘍確有必要。熱休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)是重要的應激蛋白，幾乎在所有生物應激細胞中高水平表達，有研究表明其與應激性潰瘍的發生密切相關[2]。熱休克蛋白90(heat shock protein 90，HSP90)是一類結構保守、功能廣泛的蛋白質[3]，其與應激性潰瘍關系的研究較少。本研究通過分析重癥腦出血病人血清HSP70、HSP90表達情況及其與應激性潰瘍的關系，探討血清HSP70、HSP90水平對重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的診斷價值，以期為重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的判斷提供理論基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年9月—2018年6月收治的141例重癥腦出血病人作為病例組，根據是否發生應激性潰瘍分為應激性潰瘍組與非應激性潰瘍組。應激性潰瘍組58例，男27例，女31例；年齡45～74(61.38±9.27)歲。納入標準：符合重癥腦出血診斷標準[4]；符合應激性潰瘍診斷標準[5]。排除標準：急性糜爛性胃炎、消化性胃炎、食管靜脈曲張破裂出血、肝硬化病人；合并肺、腎等多器官病變病人。非應激性潰瘍組83例，男42例，女41例；年齡44～78(63.29±8.77)歲。另選取同期體檢健康者60名作為對照組，其中男38名，女22名；年齡45～77(62.49±9.06)歲。3組性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 病例組于入院24 h內、體檢健康者于晨起空腹抽取靜脈血5 mL，-4 ℃、3 000 r/min離心20 min，取上清液，貼標簽，保存于-80 ℃冰箱中待用，避免反復凍融。

1.2.2 血清HSP70、HSP90水平及Hb、HCT、轉鐵蛋白(transferrin，TRF)水平檢測 采用酶聯免疫法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測血清HSP70、HSP90、TRF水平，試劑盒分別為HSP70試劑盒(上海基免生物科技有限公司)、HSP90檢測試劑盒(鎮江博研生物科技有限公司)、TRF測定試劑盒(武漢中太生物技術有限公司)，嚴格按照操作說明書進行。并進行血常規Hb、HCT水平檢測。

2 結 果

2.1 3組HSP70、HSP90水平比較 3組HSP70、HSP90水平比較差異有統計學意義(P<0.05)；與對照組相比，非應激性潰瘍組HSP70降低(P<0.05)，HSP90差異無統計學意義(P>0.05)。應激性潰瘍組HSP70、HSP90水平較對照組與非應激性潰瘍組升高(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組HSP70、HSP90水平比較 (±s)

P<0.05。

2.2 3組應激性潰瘍檢測指標比較 3組Hb、HCT、TRF水平比較差異有統計學意義(P<0.05)；與對照組相比，非應激性潰瘍組Hb水平顯著升高(P<0.05)，HCT、TRF水平差異無統計學意義(P>0.05)；應激性潰瘍組Hb、HCT水平降低(P<0.05)，TRF水平升高(P<0.05)；與非應激性潰瘍組比較，應激性潰瘍組Hb、HCT水平降低(P<0.05)，TRF水平升高(P<0.05)。詳見表2。

表2 3組Hb、HCT、TRF水平比較 (±s)

2.3 HSP70、HSP90水平與應激性潰瘍指標的相關性 Pearson相關分析顯示，血清HSP70水平與Hb、HCT水平呈負相關(P<0.05)，與TRF水平呈正相關(P<0.05)。HSP90水平與Hb、HCT水平呈負相關(P<0.05)，與TRF水平呈正相關(P<0.05)。詳見表3。

表3 HSP70、HSP90水平與應激性潰瘍指標的相關性分析

2.4 HSP70、HSP90水平對重癥腦出血病人應激性潰瘍的預測作用 ROC曲線顯示，HSP70水平預測重癥腦出血病人應激性潰瘍曲線下面積為0.876，截斷值為2.00 ng/mL，敏感度為82.8%，特異性為94.0%。HSP90水平預測重癥腦出血病人應激性潰瘍的曲線下面積為0.800，截斷值為131.43pg/mL，敏感度為75.9%，特異性為88.0%。詳見圖1。

圖1 HSP70、HSP90水平對應激性潰瘍診斷作用的ROC曲線

2.5 Logistic回歸分析影響重癥腦出血病人應激性潰瘍發生的因素 多因素Logistic回歸分析顯示，Hb、HCT、TRF水平是病人發生應激性潰瘍的無關因素，高水平HSP70、HSP90是影響重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的危險因素。詳見表4。

表4 多因素Logistic回歸分析

3 討 論

應激性潰瘍是泛指休克、創傷、手術后或嚴重全身性感染時發生的急性胃炎，是一種急性胃黏膜病變，是重癥腦出血病人嚴重并發癥之一[6]。隨著重癥監護的加強、抗感染藥物的更新，提高了重癥腦出血病人的生存率，應激性潰瘍的發病率隨之升高。目前，有關腦出血合并應激性潰瘍的發病機制已有較多研究，但發病機制尚未完全明確。有研究表明腦出血誘導的一系列神經體液變化打破了胃黏膜穩態，致使胃局部出現出血[7]。

HSP70是重要的應激蛋白，幾乎在所有生物應激細胞中高水平表達，熱應激、氧自由基、缺血缺氧、嚴重創傷均可誘導HSP70產生[8-9]。Leu等[10]研究表明，應激性潰瘍病人外周血細胞中HSP70 mRNA水平、HSP70蛋白陽性率表達顯著高于非應激性潰瘍病人及對照組。本研究表明，應激性潰瘍病人胃黏膜上皮細胞HSP70 mRNA表達顯著升高，可減少胃黏膜細胞的損傷，進而保護胃黏膜，并推測應激狀態下胃黏膜HSP70增加的可能機制為：各種因素刺激下胃黏膜細胞蛋白質構型改變，激發細胞應激反應，激活并編碼HSP70，HSP70可促進細胞內蛋白質合成、折疊，減少對黏膜細胞的損傷，從而保護胃黏膜[11]。有研究顯示，HSP70家族可以修復損傷的前核糖體、防止溶酶體破壞、穩定細胞膜，從而維持細胞正常的形態和功能，對抗有害因素[12]。本研究中，重癥腦出血病人合并應激性潰瘍病人血清HSP70水平高于非應激性潰瘍病人及體檢健康者，推測HSP70在重癥腦出血病人應激性潰瘍發生過程中起一定作用。臨床表明應激性潰瘍病人血常規檢查中Hb、HCT下降，便隱血呈陽性，TRF不受飲食、藥物等因素影響，敏感度高，微量出血即可檢出[13]。本研究中應激性潰瘍病人Hb、HCT水平低于非應激性潰瘍病人及體檢健康者，TRF水平則高于非應激性潰瘍病人及體檢健康者。同時Pearson相關性分析顯示，HSP70水平與Hb、HCT水平呈負相關，與TRF水平呈正相關，進一步表明HSP70與應激性潰瘍的發生密切相關。HSP70預測重癥腦出血病人應激性潰瘍發生的曲線下面積為0.876，特異性、敏感度高，可作為重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的診斷指標，截斷值為2.00 ng/mL，表明當血清濃度HSP70高于2.00 ng/mL時，重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的風險高。多因素Logistic回歸分析顯示，HSP70水平是重癥腦出血病人并發應激性潰瘍的影響因素，提示重癥腦出血病人血清HSP70水平高則發生應激性潰瘍的風險高，推測可通過檢測血清HSP70水平評估病人發生應激性潰瘍的風險，以便及時采取治療。

HSP90是一類結構保守、功能廣泛的蛋白質，目前認為其基本功能為分子伴侶功能[14]，通過幫助氨基酸鏈折疊成正確的三維結構，清除受損而無法正確折疊的氨基酸鏈，護送蛋白分子尋找目標分子以免受到其他分子的干擾發揮作用。在受到各種刺激誘導時，HSP90表達增加，以抵制外界刺激對細胞的損傷。HSP90與蘇氨酸蛋白激酶及上游的3-磷脂酰肌醇依賴性蛋白1激酶相結合，在抗細胞凋亡作用中扮演重要角色[15-17]。有研究表明，HSP90蛋白在心血管系統應激反應時發揮保護性作用[18]。本研究中，應激性潰瘍病人血清HSP90水平高于非應激性潰瘍病人，推測HSP90可能在應激性潰瘍中發揮重要作用。本研究發現HSP90水平與Hb、HCT水平呈負相關，與TRF呈正相關，進一步表明HSP90與重癥腦出血病人應激性潰瘍的發生密切相關。HSP90預測重癥腦出血病人應激性潰瘍發生的曲線下面積為0.800，截斷值為131.43 pg/mL，表明當血清濃度HSP90高于131.43 pg/mL時，重癥腦出血病人發生應激性潰瘍的風險高。多因素Logistic回歸分析顯示，HSP90是重癥腦出血病人合并應激性潰瘍的影響因素，因此，重癥腦出血病人血清HSP90水平高，則發生應激性潰瘍的風險高，應對這些病人進行適當干預，加強監測，以改善病人病情。

綜上所述，重癥腦出血合并應激性潰瘍病人血清HSP70、HSP90水平升高，檢測血清HSP70、HSP90水平對早期診斷重癥腦出血病人發生應激性潰瘍具有一定價值。