陳飛雄, 張顯波*, 周其椿, 趙 飛, 樊均德,廖澤龍,賀兵,李正友,袁再孝,李建光
(1.貴州省農業科學院 水產研究所, 貴州 貴陽 550025; 2.銅仁學院 生物與農林工程學院, 貴州 銅仁 554300; 3.江口縣農業農村局, 貴州 江口 554300; 4.銅仁市農業農村局, 貴州 銅仁 554300; 5.貴州東億農業發展有限公司, 貴州 江口 554300)
粗須白甲魚(Onychostomabarbata)是貴州省梵凈山周邊山溪河流重要的野生小型淡水名貴經濟魚類,又名麻魚、赤尾魚、標桿魚、石魚、土狗魚、叉包等,屬鯉形目鯉科鲃亞科白甲魚屬,主要分布于烏江、清水江、都柳江、錦江等水系,主要棲息于湍急、底質多礫石的江段。粗須白甲魚肉因質細嫩、味美不腥、營養豐富而聞名。梵凈山地處貴州省東北部江口、印江和松桃三縣交界地帶,是武陵山脈的主峰,同時也是烏江水系和沅江水系的分水嶺,雨量充沛,地下水資源豐富,河流落差較大,上游水流湍急,水面狹窄,多險灘瀑布,水溫較低;下游水流相對較為平緩,水面寬闊,水溫較高,水域生境較為復雜,為粗須白甲魚提供了良好的生活場所。但近年來,由于過度捕撈和人為干預導致環境改變,使粗須白甲魚資源受到嚴重影響,分布范圍逐年縮小,其種群數量日趨減少,在主要分布區水域難覓蹤跡。因此,開展粗須白甲魚人工繁殖試驗,研究其規模化人工繁殖技術,為保護好這一野生資源及其產業化開發奠定基礎。
粗須白甲魚親魚2~3冬齡、體重120 g左右,于2019年從梵凈山周邊山溪中獲得,在貴州東億農業發展有限公司流水養殖池暫養1冬齡,暫養池水流3 m3/h。4月中旬進入繁殖準備期。飼喂人工配合飼料,每天早中晚各1次,每天飼喂量占魚體重的3%。5月初水溫穩定在18℃左右,挑選親魚暫養在不同池中,暫養2 d左右進行催產。
把親魚分為3組進行催產,每組雌魚30尾、雄魚20尾,雌魚每尾催產程序及激素劑量見表1。胸鰭基部注射,劑量為每100 g體重每次0.2 mL,第1次注射后12 h注射第2針。雄魚只注射第2針,劑量為雌魚第2針的一半。

表1 粗須白甲魚雌魚催產程序及激素劑量
1.3.1 精卵獲取 親魚注射第2針后24~72 h,每12 h檢查1次,及時把有發情現象的親魚撈出,放入裝有曝氣水的暫養盆中,用濕潤毛巾包住頭部和背面,裸出后腹部和泄殖孔,擦干泄殖孔周圍和臀鰭的水分,由前向后輕輕擠壓腹部獲得精卵。
1.3.2 授精 采用干法授精,即將雄魚精液直接擠入盛有魚卵的盆中,用羽毛輕輕攪動混勻,再迅速加入水,每2 000枚卵加水2~3 mL,并不斷搖動盆,然后在室溫下靜置至少1 min。最后將受精卵倒入孵化網箱或塑料盆中。
采用桶式孵化法,孵化36 h左右正常受精卵發育至原腸胚期,及時檢出未受精卵或死胚(呈現不同透明的乳白色),計算受精率。水溫18℃下孵化96 h左右,胚胎破膜產出,計算孵化率。孵化36 h、48 h、72 h、84 h和96 h隨機取胚胎至少300枚進行觀察,計算孵化率。
受精率=[(總卵數-白卵數)/總卵數]×100%
總孵化率=[正常出膜仔魚數/(出膜卵數+總白卵數)]×100%
2.1.1 雌魚 從表2看出,3組雌魚的催產率差異較大,以第1組即二次同時注射絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素釋放激素A2(LHRH-A2)和地歐酮(DOM)的催產效果較好,總催產率達60.0%;以第2組即二次同時注射HCG和LHRH-A2的催產效果次之,為43.3%;第3組即單獨注射LHRH-A2的催產效果最差,為36.7%。3組中的最佳效應時間皆為48 h,催產率分別達42.3%、25.0%和21.5%。

表2 不同組粗須白甲魚不同催產時間雌魚的催產效果
2.1.2 雄魚 3組催產雄魚均能獲得較好的精液。未催產的雄魚也能獲得大量精液,但未催產處理的雄魚精液粘滯性高,部分個體的精液不易液化。
經統計,粗須白甲魚人工授精的平均受精率為62.7%。發育至原腸胚的受精卵在孵化桶中的孵化率較高,36~48 h的受精卵孵化率為93.0%,48~72 h為94.3%,72~84 h達95.8%,96 h的總孵化率為84.0%。
研究結果表明,粗須白甲魚可進行全人工繁殖,經人工催產、干法授精、孵化等,其催產率達60.0%,受精率達62.7%,孵化率達84.0%。
野生粗須白甲魚未達到性成熟的雌雄魚較難區分,經1個冬季人工馴養,進入繁殖前期(一般4月初)雄魚表現出典型的第二性征,上下頜吻端各有一橫列齒狀追星;繁殖季節輕輕擠壓腹部,泄殖孔會有乳白色精液流出。性腺發育良好的雌魚腹部明顯突出于體側,表明可用于人工繁殖。但是棲息地差異或不同年齡個體的性腺發育程度可能有差別。本研究粗須白甲魚的催產率僅42.3%,相對較低。因此,人工繁殖前有必要強化培育親魚,促使其性腺發育。粗須白甲魚卵受精率平均為62.7%,相對較低。原因可能是粗須白甲魚卵發育具有不同步性,催產后排出的卵成熟度不一致,部分卵不具備受精能力;親魚繁殖前雌雄混合培育模式影響卵巢的發育差異;也有可能是精液質量的問題,今后有待深入研究。