腫瘤標志物GSTP1、CYFRA21-1及SCC-Ag對非小細胞肺癌的預后評估價值

劉亞杰，馬曉波

（華北理工大學附屬醫院 1.檢驗科，2.病案科，河北 唐山 063000）

肺癌的發病率及病死率均較高，其中非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）約占85%[1]。近年來NSCLC 的診療方法不斷提高，但由于缺少典型臨床表現，相當一部分NSCLC 患者就診時已經是晚期，5年生存率僅為15%左右，預后不佳[2]。低劑量螺旋CT 是目前主要的肺癌檢查手段，但由于輻射原因部分患者對該類檢查存在抵觸[3]。近年來的研究發現了多種NSCLC 的腫瘤標志物，例如GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 等對NSCLC 具有一定的診斷價值[4-6]。但這些標志物與NSCLC 患者預后的關系尚不十分清楚，因此本研究旨在探討腫瘤標志物GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 對NSCLC 的預后評估價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月—2018年6月華北理工大學附屬醫院收治的600 例NSCLC 患者作為實驗組。其中，男性397 例，女性203 例；年齡34～87 歲，平均（63.52±12.61）歲；病理類型：腺癌441 例，鱗癌107 例，腺鱗癌37 例，大細胞癌15 例；臨床分期：Ⅰ期36 例，Ⅱ期127 例，Ⅲ期224 例，Ⅳ期213 例。所有患者經病理檢查確診為原發性NSCLC，且有治療前的腫瘤標志物檢測數據。另根據臨床特征匹配同期200 例本院健康體檢者作為對照組。其中，男性128例，女性72例；年齡35～86 歲，平均（62.83±11.57）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

分別抽取實驗組和對照組患者晨起空腹外周靜脈血4～5 ml，室溫靜置30 min，3 000 r/min 離心15 min，分離上層血清，于1 h 內檢測。應用德國羅氏公司的601 型全自動電化學發光免疫分析儀和配套試劑盒，采用電化學發光免疫分析法分別檢測GSTP1、CYFRA21-1 水平。應用美國伯樂公司的酶標儀和法國CIS 國際生物公司生產的試劑盒對GSTP1、CYFRA21-1 進行生物素標記。將生物素標記的GSTP1、CYFRA21-1 分別與待測的各組血清樣本共同孵育，再與親和素標記的磁微粒共同孵育，用蠕動泵將反應液吸入流動室，磁微粒由磁鐵吸附到電極表面，加入三丙胺，電機加電壓，啟動電化學發光反應，由光電倍增管測量光的強度，光強度與濃度呈線性關系，即可算出各組血清樣本中GSTP1、CYFRA21-1 水平。采用ELISA 法檢測SCC-Ag 水平。使用抗SCC-Ag 單克隆抗體包被反應板，分別加入各組待測血清樣本反應，再加入辣根過氧化物酶標記的抗SCC-Ag 單克隆抗體，如血清中存在SCC-Ag，則會形成復合物，加入顯色劑發生顯色反應。上述所有操作按照相應試劑盒說明書進行。3 種腫瘤標志物的正常值分別為：GSTP1 ≤10 ng/ml、CYFRA21-1 ≤4 ng/ml、SCC-Ag ≤1.5 ng/ml[7]。

1.3 預后評估

對所有患者隨訪1年，記錄隨訪期間患者的生存時間。將患者分為生存時間＜1年和生存時間≥1年，分析GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平與患者生存時間的關系。

1.4 統計學方法

數據分析采用SPSS 20.0 統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗或方差分析，進一步兩兩比較用LSD-t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗；繪制ROC 曲線，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清腫瘤標志物比較

兩組血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經t檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05），實驗組高于對照組。見表1。

2.2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關系

不同性別、年齡及是否吸煙患者的血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經t檢驗，差異無統計學意義（P＞0.05）。不同病理類型患者GSTP1水平比較，經單因素方差分析，差異有統計學意義（P＜0.05），肺腺癌患者血清GSTP1 水平高于肺鱗癌、肺腺鱗癌和大細胞肺癌患者（P＜0.05），大細胞肺癌患者和肺腺鱗癌患者血清GSTP1 水平高于肺鱗癌患者（P＜0.05）。不同病理類型患者CYFRA21-1和SCC-Ag 水平比較，經單因素方差分析，差異有統計學意義（P＜0.05）；肺鱗癌患者血清CYFRA21-1和SCC-Ag 水平高于肺腺癌、肺腺鱗癌和大細胞肺癌患者（P＜0.05），肺腺鱗癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平高于大細胞肺癌和肺腺癌患者（P＜0.05），大細胞肺癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平與肺腺癌患者相近（P＞0.05）。不同臨床分期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經單因素方差分析，差異有統計學意義（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平低于Ⅲ、Ⅳ期患者（P＜0.05），Ⅲ期患者血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平低于Ⅳ期患者（P＜0.05），血清腫瘤標志物水平隨分期升高逐漸上升。見表2。

表1 兩組血清腫瘤標志物比較 （ng/ml，±s）

表1 兩組血清腫瘤標志物比較 （ng/ml，±s）

組別 n GSTP1 CYFRA21-1 SCC-Ag實驗組 600 38.64±17.53 8.07±3.26 4.24±2.16對照組 200 3.58±1.41 1.49±0.35 0.82±0.58 t 值 28.242 28.478 22.119 P 值 0.000 0.000 0.000

表2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關系 （ng/ml，±s）

表2 患者臨床病理特征與血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平的關系 （ng/ml，±s）

臨床病理特征 n GSTP1 t/F 值 P 值 CYFRA21-1 t/F 值 P 值 SCC-Ag t/F 值 P 值性別男397 39.12±14.31 1.200 0.115 8.13±1.53 1.479 0.070 4.18±1.25 1.578 0.088女203 37.70±12.45 7.95±1.14 4.36±1.23年齡＜60 歲 226 38.18±11.26 0.738 0.231 7.90±2.27 1.379 0.084 4.06±1.99 1.623 0.053≥60 歲 374 38.92±12.53 8.17±2.41 4.35±2.32吸煙是293 38.85±12.15 0.379 0.353 8.12±1.19 0.980 0.164 4.22±1.18 0.393 0.347否307 38.44±14.24 8.02±1.27 4.26±1.31病理類型肺腺癌 441 45.36±8.07 6.27±2.82 3.15±2.04肺鱗癌 107 18.42±6.24 15.01±3.26 8.60±2.72肺腺鱗癌 37 23.11±7.18 10.22±3.73 5.09±1.76大細胞肺癌 15 23.62±7.04 6.18±2.03 3.06±1.14臨床分期Ⅰ期 36 5.81±2.15 15.088 0.000 11.573 0.000 2.14±2.67 1.42±1.56Ⅱ期 127 16.82±4.73 3.75±2.64 1.94±1.83Ⅲ期 224 41.53±10.65 8.31±3.32 4.47±2.01 17.237 0.000 14.228 0.000 8.921 0.000 13.560 0.000Ⅳ期 213 54.16±16.39 11.49±5.92 5.84±2.28

2.3 血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 與患者生存時間的關系

生存時間＜1年與≥1年患者的血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平比較，經t檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05），生存時間＜1年患者GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平較高。見表3。

表3 血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平與患者生存時間的關系 （ng/ml，±s）

表3 血清GSTP1、CYFRA21-1、SCC-Ag 水平與患者生存時間的關系 （ng/ml，±s）

指標 生存時間＜1年 生存時間≥1年 t 值 P 值GSTP1 57.39±21.05 22.45±13.28 23.876 0.000 CYFRA21-1 13.31±5.26 3.55±2.13 28.956 0.000 SCC-Ag 6.02±2.92 2.70±0.46 18.757 0.000

2.4 GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預測NSCLC 患者1年內死亡的ROC 曲線

ROC 曲線結果顯示，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預測NSCLC 患者1年內死亡的AUC 分別為0.573（P=0.378），0.591（P=0.279） 和0.653（P=0.069），但3 者聯合預測1年內死亡的AUC 為0.668（P=0.045），其敏感性為93.92%（95% CI：0.817，0.980），特異性為50.00%（95% CI：0.424，0.609）。見圖1。

圖1 血清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 預測NSCLC 患者1年內死亡的ROC 曲線

3 討論

NSCLC 的早期癥狀較為隱匿，導致早期臨床檢出率較低，多數患者就診時已處中晚期，5年存活率較低[8]。近年來，盡管NSCLC 的臨床治療規范己逐步完善，也開始出現新的靶向藥物，但缺少敏感靶點的NSCLC 患者總體療效并不理想，一般預后較差[9-10]。

腫瘤標志物是指特具有征性、高表達于惡性腫瘤細胞、由惡性腫瘤細胞異常產生的物質或是宿主對腫瘤的刺激反應而產生的物質，能反映腫瘤發生、發展，監測腫瘤對治療的反應[11]。GSTP1 是GST 家族成員之一，在大腸癌、胃癌、乳腺癌、喉癌、卵巢癌及肺癌等腫瘤組織中表達異常，是一種常見的腫瘤相關因子，與腫瘤的發生、發展及抗藥性關系密切[12-13]。CYFRA21-1 是CYK-19 的可溶性片段，當細胞發生癌變時，CYK-19 釋放增加，經蛋白酶降解后，大量細胞角蛋白片段釋放入血液，導致血清CYFRA21-1 水平升高[14]。目前，CYFRA21-1 被認為是主要用于檢測肺癌的腫瘤標志物，其水平顯著升高提示腫瘤為晚期或預后差，但其水平正常或輕微升高，并不能排除腫瘤的存在[15]。最近有學者提出，血清CYFRA21-1水平的升高早于臨床癥狀和影像學表現[16]。SCC-Ag對宮頸鱗癌、肺鱗癌、頭頸部鱗癌等鱗狀上皮細胞癌的治療監測和復發監測有重要臨床意義[17-18]。有研究顯示，在腫瘤臨床診斷、復發轉移癥狀和體征出現前7 個月即出現SCC-Ag 升高[19]。另有研究顯示，SCCAg 聯合GSTP1 對診斷有互補作用，但不能作為肺腺癌與肺鱗癌的鑒別診斷依據[20]。

本研究結果顯示，肺腺癌患者血清GSTP1 水平明顯高于肺鱗癌和肺腺鱗癌患者，肺鱗癌患者血清CYFRA21-1 和SCC-Ag 水平高于肺腺癌和肺腺鱗癌患 者；血 清GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水 平隨臨床分期升高而升高。本研究結果表明，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平與患者生存時間有關，即GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 水平越高，患者生存時間≥1年的可能性越低。ROC 曲線結果顯示，GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 聯合檢測可以預測患者1年內死亡可能性，提示聯合檢測腫瘤標志物對NSCLC 的預后評估具有一定的應用價值。然而，由于觀察時間所限，3 種腫瘤標志物具體含量與患者生存時間的關系有待進一步探討。

綜上所述，腫瘤標志物GSTP1、CYFRA21-1 及SCC-Ag 對NSCLC 的預后評估具有一定的應用價值。