GRB7在乳腺癌中表達及其臨床意義

戴玉鑫

（內蒙古民族大學第二臨床醫學院（內蒙古林業總醫院），內蒙古 呼倫貝爾 022150）

在臨床上，HER2（人類表皮生長因子受體蛋白2）的浸潤性導管癌陽性表達模式是曲妥珠單抗治療靶點，并且也已經廣泛地應用到臨床治療工作中，但是，這種治療方法費用高昂且對心臟會產生一定的毒副作用，所以仍存在操作爭議。生長因子受體結合蛋白-7基因（GRB7）作與HER2有相似性，并且被認為與乳腺癌發生和發展有一定聯系[1]。基于此，探究生長因子受體結合蛋白-7基因在乳腺癌中的表達以及意義成為了一項重要課題，本文就此展開研究，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院病理科在2017年1月～2019年1月未經放化療治療的乳腺浸潤性導管癌組織標本檔案作為研究組，女80例，年齡25～51歲，平均（44.12±0.33）歲。同時，選擇其中30例癌旁正常乳腺組織作為對照組。兩組患者基本指標均無明顯差異性，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

選擇上海艾博康貿易有限公司生產的GRB7鼠抗人單克隆抗體，選擇北京中杉金橋生物技術有限公司的人類表皮生長因子受體蛋白2。為研究組和對照組提供相同的方法處理。

選擇北京金菩嘉生產的HER2基因檢測試劑盒，按照試劑盒的說明步驟進行所有操作。（1）先采用脫蠟處理方式，將樣本組織脫蠟和脫二甲苯。（2）使用進行15 min孵育，使用胃蛋白酶。（3）進行洗滌和干燥處理。在干燥之后的樣本中中加入10 μL的DAPI顯色液，在使用熒光顯微鏡完成樣本組織檢查。

1.3 觀察指標

（1）判定兩組成分的免疫組化，參考ASCO分級標準，GRB7陽性呈棕黃色定位于細胞膜或者細胞質位置。腫瘤細胞染色陽性分別計數為0～3+。HER2陽性呈現棕黃色定位于細胞膜：①腫瘤細胞膜染色≤10%；②弱完整膜染色≥10%；③微弱不完整膜染色≥10%；④強完整膜陽性≥10%，計數分別為0～3+。

（2）參考美國臨床腫瘤學會檢驗標準，17號染色體絲粒為綠色信號。紅色信號為HER2基因，隨機計數為30個腫瘤細胞。

2 結 果

2.1 GRB7與臨床病理特征關系

研究得出，在進行乳腺癌臨床診斷中，患者GRB7表達率為48%。對照組30例樣本中，僅有1例為高表達3.33%。GRB7高表達和淋巴腫瘤結轉移、腫瘤體積增大、組織學分級高等密切相關，但是與患者的年齡、ER和PR無明顯關聯。

2.2 乳腺癌組織中GRB7表達生存分析

根據GRB7不同的表達可以分為（-）、（+～++）和（+++）三組，按照kaplan meier計算方法，將其累計的無腫瘤生存率進行計算，可以得出（-）組的患者無腫瘤生存時間在10.2年左右，（+～++）的無腫瘤生存率為9.9年，其余患者的生存率為10.7年，可以看出，GRB7表達時間累計無腫瘤生存的時間最長，具體見下圖：

圖1 GRB7不同表達對預后影響生存曲線示意圖

3 討 論

乳腺癌的治療方法主要包括了傳統手術模式、放化療以及內分泌模式為主，近幾年，明確將曲妥珠單抗作為乳腺癌病癥治療的新靶點。而且，在治療期間，輔助放化療治療方法，能取得較好的治療效果。但是，相關領域研究中得出，未經擴張染色體HER2呈陰性，血清轉移后的陽性細胞乳腺癌患者預后并不能達到理想狀態。針對乳腺癌細胞生物學特點、疾病治療手段和患者預后等多項內容的研究工作，已經成為疾病治療與抗癌研究的新熱點。

治療效果好、毒副作用小且能極大提升患者生存質量并降低死亡率，是乳腺癌抗癌治療的主要研究方向，通過對GRB7蛋白在乳腺癌中表達作用進行研究，為疾病治療提供了較好的方向。乳腺癌疾病發生證明與人類17號染色體有密切關系，這一染色體由超過8000萬堿基構成，其中含有1500個基因片段，并且與遺傳細胞編碼片段有較高重復性，能直接參與到多種蛋白表達和基因編碼合成，與多個乳腺癌表達基因位點有相關性。

人體細胞內存在許多SH2結構蛋白，且這些結構蛋白會直接參與到信號竄到級聯酶促反應中。GRB7蛋白是最近發現乙類具有多域編碼特征的接頭蛋白，且有較多SH2蛋白結構性特征。GRB7蛋白中包含了三種功能分區，分別位于脯氨酸功能前端N區域、C端SH2結構區域與中間GM區域。這一蛋白主要是通過信號從多種細胞表面受體介導，傳達到下游信號通路的方式，發揮出聯動作用。在研究中發現，人體內的GRB7蛋白細胞在胰腺中屬于高表達狀態，因此認為該細胞主要是通過SH2結構域完成與胰島受體的結合。為能更廣泛地參與到細胞受體信號、轉導與各種信號通路中，在腫瘤組織研究環節，重點對其侵入乳腺癌細胞進行研究，結果證明，在是乳腺癌細胞的生長和轉移中，HER2陽性粒子始終受到GRB7蛋白高表達狀態的影響，進而產生促進作用。HER2是當前研究領域中，較為透徹且具有酪氨酸酶活性特征的同源蛋白質，主要在胞內區與結合區等位置形成，分子內部包含23個氨基酸，質量約為185kDa。

GRB7在乳腺癌中表達腫瘤體積大、淋巴細胞轉移、組織學分級等有密切關系，但是與患者的年齡等其他因素無關。研究證明了在乳腺浸潤性導管癌中，GRB7高表達與臨床病理特征有直接關聯，所以這一指標可以作為評估患者乳腺癌預后的重要參考依據，能抑制患者乳腺腫瘤轉移，延長生存期。乳腺癌的治療只要以傳統手術、內分泌治療與放化療為主，近幾年，HER2成為治療靶點，輔助化療治療效果明顯提升，但是未擴增17號染色體HER2成陰性，血清轉移預后不佳[2]。受到乳腺癌細胞表皮生長因子刺激，表皮生長因子受體與GRB7結合會被磷酸化，此達到刺激腫瘤生長的作用。研究結果顯示，RB7和HER2有較強相關性，主要體現在在乳腺癌細胞中表達方面，這以結果證明GRB7對乳腺癌細胞轉移有重要影響，抑制其高表達，有可能提高HER2抑制效果，改善治療結局[3]。