葛 頌
(南京鼓樓醫院集團宿遷市人民醫院,江蘇 宿遷 223800)
回顧性分析我院2019年3月至8月門診及住院病人血常規檢測中107例血小板假性減少的樣本,分析減少的原因并針對性解決,糾正血小板計數。
Sysmex XN-2000全自動血球分析儀,Sysmex XN-550全自動血球分析儀,相應的進口配套試劑,奧林巴斯雙目顯微鏡(CX41RF),瑞氏-吉姆薩染色液(珠海貝索生物技術有限公司),37℃恒溫箱,真空EDTA-K2抗凝管(貝克曼)及枸櫞酸鈉抗凝管(貝克曼)。
對2019年3月至8月107份假性血小板減少的標本進行涂片、瑞氏染色及鏡檢,觀察鏡下血小板分布及形態,必要時估算其血小板數量。鏡下估算血小板值的前提是涂片中無血小板聚集,選取體尾交界處,紅細胞無明顯重疊,正常為平均每個油鏡視野8~15個,小于8個每油鏡為減少[1]。與鏡檢結果一致,且與臨床相符的為真性血小板減少。與鏡檢結果一致,但與臨床資料不符,懷疑抽血不規范導致血小板消耗的或者原因不明的,需重新采血復查。鏡檢結果與血球儀所得結果不一致的,查找原因并糾正。鏡檢見簇狀或片狀聚集的,采EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血兩管復查;鏡檢見較多大血小板的,用Sysmex XN-550全自動血球分析儀復測;鏡檢涂片估計值比血球儀所得結果高的,將標本重新混勻數次再復測;血量少,鏡下有聚集,重抽復測;涂片見紅細胞簇狀聚集的,將血標本放37℃水浴箱孵育半小時復測;未見聚集且與臨床不符的重新抽血復測或機旁即刻抽血即刻檢測。
107份假性血小板減少的標本中,其中鏡下血小板成簇或呈片狀聚集的19例,鏡下有較多的大及巨大血小板的28例,血小板數量比測得值高的 5 例,鏡下有聚集的42例,紅細胞簇狀聚集1例,血量少,未見聚集且與臨床不符的12例,找出引起其假性減少的原因并予相應方法糾正,糾正后結果得到改善。見表1。

表1 假性血小板標本鏡檢情況糾正方法比較(n,%)
儀器法檢測紅細胞和白細胞結果比較穩定,而血小板由于其體積小,自身抗體,易聚集等原因,易導致結果不準,其中以血小板假性減少最多見[2]。而造成血小板假性減少的主要因素及解決方案分析如下。
檢測血常規的抗凝劑為EDTA-K2抗凝劑,一般情況下, EDTA-K2抗凝血對細胞形態及血小板聚集性幾乎沒影響[3][4]。但也是最容易導致假性血小板減少的抗凝劑[5],改用枸櫞酸管抗凝血可獲得較為準確的血小板計數[6]。
儀器法測血小板,當血小板MPV超過30fl時,血球儀無法將其計數到血小板里,而導致血小板假性減少[7]。血球儀計數血小板的原理一般是阻抗法,即依據測定血小板體積計數的,而Sysmex XN-550全自動血球分析儀網織紅細胞檢測通道可以利用熒光染色法計數血小板,熒光染色法克服了阻抗法計數的局限性。所以當有大及巨大血小板比例升高時,采用熒光染色法復檢,更能確保血小板準確性和可靠性[8]。
上機前未充分混勻標本,顛倒混勻不充分,會影響抗凝效果,也是導致血小板假性減少的因素之一。由于每日標本量較大,在批量上機前如果不能及時手動混勻,全自動血球分析儀也未能充分混勻標本,就會影響抗凝效果,使血小板在標本中分布不均,從而導致血小板假性減少。因此,用血球分析儀檢測血標本要注意檢測前將標本充分混勻。
靜脈多次穿刺,采血手法不順暢,引起組織因子混入,產生肉眼看不見的凝塊,是引起假性血小板減少的原因之一[9]。本文中血樣采集不當50.5%,是造成假性減少的主要原因,分析上表,包括血涂片鏡下有聚集現象及未見聚集但與臨床不符。其中未見聚集但與臨床不符的占11.2%,分析是血小板的生理活性,容易破碎及聚集,而使血小板消耗的。而造成血小板消耗的原因,主要是臨床采血不規范,采血不暢,采血時間長,采血后未及時混勻。這就要求加強護理,檢驗采血人員的規范化操作,減少血小板假性減少的比率。另外,當鏡檢未見血小板聚集時,需要獲取病人臨床信息以了解病人的情況,當病人沒有血小板減少的相關體征或臨床表現時,就需要排除血小板假性減少的可能。本次研究抽血不順是導致血小板假性減少的主要因素,這與文獻所說的EDTA-K2抗凝血是導致血小板假性減少最常見原因不相符。
分析上表,11.2%為涂片未見聚集但與臨床不符的血小板假性減少的情況,其余88.8%的標本均在涂片鏡檢時發現。因此,出現血小板減少情況時,在排除儀器,試劑,質控等因素外,應該結合病人臨床表現,標本情況,鏡檢情況等綜合分析,排除血小板假性減少的因素,注重血涂片在鑒別診斷假性血小板減少中的極其重要作用,確保檢驗結果準確性與可靠性,以更好的協助臨床診療。