土壤酶及其生態指示作用研究進展

陸琴 李冬琴

摘要 土壤酶催化土壤生物地球化學反應，推動土壤生態系統中的物質循環和能量流動。從土壤酶的來源、存在狀態及功能、土壤酶活性的分布特征及時空動態變化進行了概述，強調了土壤酶活性對土地利用方式、耕作管理、施肥、農藥和地膜的使用及重金屬污染等的生態指示作用，為更好地利用土壤酶來及時了解土壤生態系統功能的運行狀況及采取適當管理措施提供支持。

關鍵詞 土壤酶;分布特征;時空動態;生態指示作用

中圖分類號 S154.2 ?文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2020）18-0014-04

Abstract Soil enzymes catalyze biogeochemical reactions in soil and drive material circulation and energy flow in the ecosystem.This paper summarized soil enzyme sources，status，functions，distribution characteristics and spatiotemporal dynamics，emphasizing that soil enzyme activities indicate changes in land use type，tillage and management，fertilization，pesticide application，plastic film use and heavy metal pollution in ecosystem.This paper was expected to provide support for better learning soil ecosystem function changes so that proper management measures can be taken as soon as possible.

Key words Soil enzymes;Distribution characteristics;Spatiotemporal dynamics;Ecosystem indicator

土壤酶催化生物地球化學反應的進行，推動著土壤中的物質轉化、元素循環和能量流動[1-2]，促進有機質的礦化和有機污染物的降解，與土壤肥力質量和土壤健康質量緊密聯系，指示土壤生態系統功能[3-4]。筆者對土壤酶的來源、在土壤中的存在狀態及功能、土壤酶活性的分布特征及時空動態變化、土壤酶的生態指示作用等方面進行論述，旨在為更好地利用土壤酶來認識土壤生態系統變化從而及時采取適當的管理措施提供理論支持。

1 土壤酶的來源、存在狀態及功能

1.1 來源

土壤酶主要來源于土壤中的微生物、動物和植物，其中大部分來源于植物及土壤微生物，少量來源于蚯蚓、螞蟻等土壤動物。一方面，這些生物在生命活動過程中向環境（土壤）中不斷分泌各種酶;另一方面，這些生物死后，它們的殘體在分解過程中不斷向環境中釋放各種酶[5]。

1.2 存在狀態

進入土壤后的酶以不同的狀態存在于土壤中，可分為自由態、吸附態和結合態。自由態的酶游離在土壤溶液中，活性大，但容易失活。有的酶吸附在土壤有機質和無機膠體上，這些吸附態的酶活性較大，不易失活。還有的酶與土壤腐殖質的基團結合，活性小，但穩定。土壤中自由態的酶比較少，大部分以酶-腐殖質、酶-無機礦物膠體、酶-有機無機復合體的形式存在[6]。

1.3 功能 土壤酶在土壤有機質礦化及元素循環中起著重要的作用，有機質礦化過程中的每一步都是在各種酶的催化下進行的，如木聚糖酶、轉化酶、纖維素酶等催化碳鍵斷裂[7-8]。植物枯枝落葉中復雜的氮聚合物在蛋白酶、氨肽酶、氨基酸氧化酶及轉氨酶等一系列土壤酶的催化作用下，分解為多肽、氨基酸，最后轉化為可被植物吸收利用的無機態氮（NH4+與NO3-）。表1列舉了一些受到廣泛關注的土壤酶，這些酶或者與具體某個元素的循環緊密相關，如脲酶、酸性磷酸酶等[9-10]，或者具有指示微生物整體活性的作用，如脫氫酶、熒光素二乙酸酯水解酶[3，11]。

2 土壤酶活性的分布特征

土壤酶來源于土壤微生物、植物及土壤動物，主要吸附在有機質及黏粒表面或與土壤腐殖質的基團結合。因此，土壤酶在土壤中的分布與土壤微生物在土壤中的分布、植物根系在土壤中的分布及土壤動物在土壤中的活動分布密切相關，反映土壤有機質及黏粒分布，也反映根系代謝活性及微生物活性。具體而言，在土壤垂直方向上，土壤酶活性普遍隨著土壤深度的增加而降低，在有機質含量高、根系密集分布、土壤微生物及動物活躍的土壤表層（如0～20 cm），土壤酶活性高;而在有機質含量低、根系少、微生物及動物少的土壤深層，土壤酶活性低[20]。如在太湖地區典型水稻土剖面中，15～40 cm土層中的葡糖苷酶活性大約為表層（0～15 cm）土壤中葡糖苷酶活性的25%，剖面60 cm處的葡糖苷酶活性約為表層的10%[22]。這種上下土層間酶活性的差異在森林土壤中更為明顯，農田土壤在耕作過程中經常翻耕，酶活性在土層間的差異因而減小[17]。在土壤水平方向上，根際土壤酶活性高，距離根際越遠，土壤酶活性越低[23-24]。這種分布特征在植物根系的完全形成期尤為明顯[23]。這一方面是根向土壤中分泌酶的結果，另一方面也是根分泌物對酶的誘導作用。酶譜分析法也直觀形象地展示了土壤酶在土壤中的這一分布特征[25-26]。

3 土壤酶活性的時空動態變化

土壤酶本質上是有活性的生物大分子蛋白質類物質，土壤酶活性對環境溫度及濕度變化反應靈敏。Sardans等[27]研究表明，當土壤濕度降低21%，脲酶活性降低10%～67%，而酸性磷酸酶活性降低31%～40%。小范圍內（如某一田塊），土壤酶在土壤中的分布主要受土壤有機質和植物生長影響，反映土壤有機質分布和根系活性;而在大范圍內，土壤酶活性則主要受環境溫度和濕度影響，與土壤溫度、濕度顯著相關，反映環境溫度和濕度變化[28]。具體體現在不同季節間的差異，山的南、北坡之間的差異、山腳與山頂間的差異以及不同緯度間的差異。如纖維素酶、轉化酶、多酚氧化酶、過氧化氫酶、硝酸還原酶、脲酶、酸性及堿性磷酸酶活性都表現為夏季高、冬季低[21]。又如長江中下游過渡地區灌木林土壤中的過氧化氫酶、脫氫酶、多酚氧化酶、脲酶及轉化酶都表現為7和10月的活性大于4月，12月活性最低。酶活性季節間的變化在土壤表層尤其明顯。因此，酶活性在不同土層間的差異也在7和10月最為明顯，而在12月最小[20]。北坡磷酸酶、芳基硫酸酯酶和脲酶活性比南坡的高，磷酸酶和芳基硫酸酯酶活性從山腳向山頂逐漸升高[29]。在我國東北松遼平原，緯度越高的地區，農田土壤中的轉化酶和酸性磷酸酶活性越高[30]。

4 土壤酶的生態指示作用

土壤酶活性受到環境溫度、濕度、pH、底物濃度、抑制劑等眾多因素影響，對不同土地利用方式、農田耕作制度與管理措施、氣候變化、污染等引起的土壤環境變化非常敏感，能夠做出迅速的反應，對于土壤質量變化、關鍵土壤過程的功能多樣性有指示作用[5]。

調查數據表明，農田土壤中的α-葡糖苷酶、β-木糖苷酶、芳基硫酸酯酶、磷酸酶等酶活性明顯比同地區草地和森林中的酶活性低[31-42]。主要原因是農田土壤有機質低，酶底物濃度低且種類單一。保護性耕作能夠降低耕作頻率，提高了底物濃度，有利于土壤酶活性維持在較高水平。如水稻-小麥輪作，兩季作物都采用免耕時土壤酶活性最高，其次是只有一季作物采用免耕的，兩季作物均采用常規耕作時土壤酶活性最低[33]。與少耕及常規耕作相比，免耕時酶活性高，尤其在表層[34]。秸稈還田增加了農田有機質的輸入，給土壤酶提供了豐富的底物，很多酶會受到誘導而活性提高。在Hemkemeyer等[35]的研究中，連續4年的秸稈還田后，0～60 cm 土層中的脲酶、磷酸酶和轉化酶活性分別平均提高19.6%、39.4%和44.3%，并且秸稈還田的量越大，酶活性提高越多。與添加有機物不同，化肥的施用通常對酶活性產生抑制作用。如幾丁質酶活性隨著土壤無機氮含量的升高而降低[36-37]。同樣，無機磷肥的施用通常導致磷酸酶活性的降低[37]。施用（NH4）2SO4后，土壤中芳基硫酸酯酶活性降低[38]。農藥使用短期內即對土壤酶活性產生強烈的抑制作用。在Sanchez-Hernandez等[15]的研究中，毒死蜱施用14 d后羧酸酯酶活性下降62%～78%，酸性磷酸酶活性下降56%～60%，β-葡糖苷酶活性下降43%～58%，脫氫酶活性下降47%，過氧化氫酶活性下降38%。在很多關于農藥施用的長期試驗中，指示土壤微生物整體活性的脫氫酶活性普遍降低，纖維素酶活性升高，而芳基硫酸酯酶活性變化不明顯[39]。

農業生產中采用的地膜覆蓋以及現在日益嚴重的白色污染，很多微塑料進入土壤，受到微塑料污染的土壤中FDA水解酶活性降低，與細菌群落豐度和多樣性降低一致[11]。在受到溴化阻燃劑四溴雙酚A污染的土壤中，過氧化氫酶、過氧化物酶和多酚氧化酶的活性都發生變化，但它們對污染的敏感程度及它們的變化趨勢是不同的。過氧化氫酶活性在3.75 mg/kg的四溴雙酚A濃度下即顯著增加，而過氧化氫酶和多酚氧化酶活性只有在75 mg/kg的四溴雙酚A濃度下才出現顯著變化，其中前者顯著降低，后者顯著升高[19]。同樣地，脲酶活性在75 mg/kg的四溴雙酚A濃度下才顯著受到抑制，而磷酸酶活性在低四溴雙酚A濃度時顯著升高，在四溴雙酚A濃度達到75 mg/kg時又顯著降低。

我國及世界范圍內很多農田受到工業廢水污染，又或者是水資源緊張的干旱半干旱區用含重金屬的污水來進行農業灌溉。受重金屬污染的土壤中酶活性顯著降低[40]。其中，脫氫酶和芳基硫酸酯酶活性對重金屬尤其敏感[41-42]。據Subrahmanyam等[43]的報道，經過20年工業廢水的影響，中度污染土壤中脫氫酶、堿性磷酸酶、β-葡糖苷酶和蛋白酶活性分別下降27.5%、23.6%、22.8%和19.5%，而重度污染土壤中分別下降46%、51.8%、44.5%和30.9%。在重金屬復合污染的采礦區，如鋅、銅、鉻、錳及鎳復合污染的礦區，轉化酶與β-葡糖苷酶活性顯著低于無污染土壤中對應酶活性，并且重金屬污染越嚴重，這2個酶活性越低[44]。Fang等[45]研究表明對農田鉛、鎘污染最為敏感的是脲酶，而對草地及林地鉛、鋅、鎘污染最為敏感的酶是過氧化氫酶和磷酸酶。

酶活性在指示生態系統惡化的同時也能指示生態系統功能的恢復。據Feng等[20]報道，退化林地在恢復的過程中，過氧化氫酶、脫氫酶、多酚氧化酶、脲酶和轉化酶活性也在提高，在11年后達到高峰，此后穩定或稍有下降。在重金屬污染修復過程中，酶活性的變化不僅反映土壤生態系統功能的恢復，也反映修復所用方法及材料在不同土壤的相互作用對土壤微生物及酶的影響。Jia等[46]研究發現生物炭修復重金屬污染土壤中的脲酶與轉化酶活性分別提高137.5%與67.9%。Tang等[47]研究表明生物炭抑制土壤酶活性，堆肥促進酶活性，兩者結合則對不同的酶效果不一樣。重金屬復合污染土壤用FeCl3淋洗后，脲酶、蔗糖酶和過氧化氫酶活性都顯著降低，添加石灰、生物炭或黑碳后酶活性有所提高，其中石灰效果最好[48]。

綜上，由于土壤理化性質，如土壤容重、有機質、陽離子交換量等，一般變化比較緩慢，對土壤短期變化不敏感，等這些性質發生比較明顯的變化時，土壤肥力或質量通常已經發生了非常大的或不可逆的變化，因而無法作為土壤生態系統功能變化的早期預警指數，尋找能夠快速應答環境脅迫的土壤質量指標顯得尤其重要。學者們的目光開始投向能快速響應環境變化、反映土壤質量變化趨勢、可普遍適用于不同土壤生態系統的生化指標，如土壤酶[49]。Eivazi等[16]研究表明酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、α-葡糖苷酶、芳基硫酸酯酶和脲酶活性可以很好地反映耕作系統、管理歷史及土壤性質。Muscolo等[3]研究指出熒光素二乙酸酯水解酶可指示由氣候變化引起的土壤質量變化。Sanchez-Hernandez等[15]證明了羧酸酯酶是有機磷污染的一個敏感指標。Duan等[26]研究則說明過氧化氫酶和蔗糖酶對鉛、鋅及鎘污染最為敏感。

5 結語

土壤酶作為土壤質量指標，指示土壤肥力質量及土壤健康質量已為大家所接受。但不同的酶分子組成、結構不同，催化的反應不同，受眾多環境因素影響，因此，酶活性變化背后所指示的生態功能或進程需要就具體的酶、具體的生態環境來討論，并沒有像土壤物理化學性質那樣簡單普遍適用的結論。目前大部分土壤酶的研究還是局限于測定其活性，而酶活性的測定方法尚無統一標準的方法，用干土還是鮮土，是否要加緩沖劑，是否要振蕩，是否要恒溫，合適的水土比等問題一直存在爭議。而土壤酶的分子生物學研究也在興起和發展，借助分子生物學手段將能更好地利用土壤酶來及時快速了解生態系統功能的變化趨勢，從而能更及時快速采取適宜的管理措施。

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