腺嘌呤核苷三磷酸生物發(fā)光法快速檢測短乳桿菌

郭立蕓,向杰,謝鑫,侍亞敏

1(北京燕京啤酒股份有限公司技術(shù)中心，北京，101300)2(啤酒釀造技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京，101300)

腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是高能磷酸化合物，由1分子核糖、1分子腺嘌呤和3個相連的磷酸基團(tuán)構(gòu)成的核苷酸，廣泛存在于各種動物、植物和微生物的活體細(xì)胞中。當(dāng)活體細(xì)胞裂解或死亡后，在胞內(nèi)酶的作用下，游離的ATP分子數(shù)量會迅速下降或消失[1]。1983年，日本學(xué)者M(jìn)OYER等[2]首次提出細(xì)胞內(nèi)源性ATP的含量可以反映細(xì)胞活性和活細(xì)胞數(shù)量，主要原理是ATP在蟲熒光素酶的催化作用下，與熒光素在有氧環(huán)境及Mg2+作用下反應(yīng)釋放出熒光，熒光強(qiáng)度與ATP數(shù)量在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系[3]。20世紀(jì)80年代，英國人率先研制出ATP熒光檢測系統(tǒng)，隨后發(fā)展到歐洲、美國和日本，應(yīng)用領(lǐng)域涉及食品加工、超市和飲食行業(yè)，檢測內(nèi)容包括微生物和食品殘渣[4]。2018年我國頒布標(biāo)準(zhǔn)GB/T 36004—2018《食品接觸表面清洗消毒效果實(shí)驗(yàn)方法 三磷酸腺苷生物發(fā)光法》，規(guī)定采用ATP生物發(fā)光方法評價食品接觸面清洗消毒效果，為生產(chǎn)企業(yè)執(zhí)行危害分析與關(guān)鍵控制點(diǎn)(hazard analysis and critical control point，HACCP)提供快速有效的技術(shù)手段。目前，該方法已在乳品發(fā)酵[5]、面粉生產(chǎn)[6]、啤酒行業(yè)[7]領(lǐng)域引入，應(yīng)用于食品企業(yè)生產(chǎn)原料、過程控制、設(shè)備表面清潔及微生物污染情況的檢驗(yàn)。

啤酒是一種發(fā)酵飲料，營養(yǎng)豐富，素有“液體面包”之稱，其釀造過程中始終伴隨著微生物污染的風(fēng)險，機(jī)械設(shè)備、人員及其裝備表面附著微生物和原位清洗(cleaning in place，CIP)不當(dāng)均可造成外源微生物的侵入，導(dǎo)致啤酒濁度的增加、香氣和風(fēng)味的改變。……